用于检测人类K-ras基因突变的引物、探针及其使用方法技术

用于检测人类Ｋ－ｒａｓ基因突变的引物、探针及其使用方法，涉及基因突变的检测。本发明专利技术将荧光定量ＰＣＲ技术与荧光双环探针技术方法相结合，发展了一种可以快速检测基因突变的多重实时荧光ＰＣＲ方法并设计了相关引物。将该方法用于检测Ｋ－ｒａｓ基因第１２位和第１３位密码子发生的突变，分别采用针对其不同突变方式设计的突变型引物对待测样品进行检测，只有突变型样品能被顺利扩增出双链ＤＮＡ产物，该产物才能与双链ＤＮＡ探针结合，发出荧光信号从而被检测到。本发明专利技术可检测到样品中含量为１／１０００的突变型基因。具有快速、简便、安全、高灵敏、高通量和低成本等优点，可用于大量临床样本的Ｋ－ｒａｓ基因突变筛查。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
用于检测人类Ｋ－ｒａｓ基因突变的引物及探针，其特征在于：包括：　以下序列的引物对：　（１）ＴＧＧＴＡＧＴＴＧＧＡＧＣＴＧＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１）　ＣＴＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＴＡＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２）　（２） ＴＧＧＴＡＧＴＴＧＧＡＧＣＴＧＣ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３）　ＣＴＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＴＡＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４）　（３）ＴＧＧＴＡＧＴＴＧＧＡＧＣＴＧＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５）　ＣＴＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＴＡＴＧ（Ｓ ＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６）　（４）ＴＧＧＴＡＧＴＴＧＧＡＧＣＴＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７）　ＣＴＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＴＡＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８）　（５）ＴＧＧＴＡＧＴＴＧＧＡＧＣＴＣ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９）　ＣＴ ＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＴＡＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０）　（６）ＴＧＧＴＡＧＴＴＧＧＡＧＣＴＴ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１１）　ＣＴＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＴＡＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２）　（７）ＴＧＧＴＧＧＡＧＣＴＧＧＴＧＡ （ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１３）　ＣＴＧＣＡＣＣＡＧＴＡＡＴＡＴＧ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４）和　以下序列的探针：　ＦＡＭ－５’ＴＣＡＡＧＧＣＧＴＧＣＣＴＴＧＡＣＧＡＴＡＣＡＧＣＴＣＴＧＴＡＴ　３’－ＴＡＭＲＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　 ＮＯ：１５）　以及内控引物对　５′－ＧＣＣＴＴＣＣＣＡＡＣＣＡＴＴ－３′（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６）　５′－ＣＡＴＴＣＣＣＣＡＡＧＡＧＣＴＴＡＣ－３′（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７）　和内控双环探针　ＨＥＸ－５’Ｔ ＴＧＴＣＡＴＴＧＡＣＡＡＣＧＣＴＡＴＧＣＴＣＣＡＴＡＧＣ　３’－ＴＡＭＲＡ（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８）。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：阮力，何东华，郑立谋，
申请(专利权)人：厦门艾德生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]