一种HLB固相萃取-UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法技术

本发明专利技术提供一种HLB固相萃取

【技术实现步骤摘要】
一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法


[0001]本专利技术属于中药成分检测的
，涉及一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，具体涉及一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基总含量的方法。

技术介绍

[0002]蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍或黑框蟾蜍的干燥分泌物。多于夏、秋二季捕捉蟾蜍，洗净，挤取耳后腺和皮肤腺的白色浆液，加工，干燥。蟾酥的化学成分十分复杂，包括蟾蜍内酯类、吲哚类生物碱、甾醇类等，其中蟾蜍内酯类是蟾酥药材非常重要的活性成分，迄今为止，已报道了蟾酥中近100种蟾蜍甾二烯类成分。其中，蟾酥中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的总含量是评价蟾酥质量的重要指标。2020版《中国药典》中规定：按干燥品计算，含蟾毒灵(C
24
H
34
O4)、华蟾酥毒基(C
26
H
3406
)和脂蟾毒配基(C
24
H
32
O4)的总量不得少于7.0％。
[0003]近年来，随着蟾酥价格的不断上涨以及企业对蟾酥需求的持续增加，蟾酥的含量对麝香保心丸成品的质量及蟾酥的采购都至关重要。2020版《中国药典》中蟾酥的含量测定需要经过蟾酥鲜浆的加工、干燥、粉碎、提取及HPLC检测分析才能得到蟾酥含量。检测方法所用时间较长，所用检测分析仪器较贵。目前没有一个可以快速检测蟾酥鲜浆中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基总含量的方法。

技术实现思路

[0004]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，能够快速、准确检测蟾酥鲜浆中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基总含量，并快速表征蟾酥药材的质量。
[0005]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，包括如下步骤：
[0006]1)将蟾酥鲜浆样品加第一溶剂溶散，再加入第二溶剂超声提取后取上清液混匀、放冷，获得提取液；
[0007]2)将步骤1)中获得的提取液上样至HLB固相萃取柱后采用第三溶剂清洗，再采用第四溶剂洗脱、定容，获得供试品溶液；
[0008]3)将华蟾酥毒基的对照品加入第二溶剂溶解并定容，获得对照品溶液；
[0009]4)将步骤2)中获得的供试品溶液和步骤3)中获得的对照品溶液分别采用紫外分光光度法(UV)进行测定，采用标准曲线法进行定量，确定供试品溶液中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的总含量。
[0010]本专利技术第二方面提供上述HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法在分析蟾酥鲜浆质量中的用途。
[0011]本专利技术第三方面提供一种蟾酥鲜浆质量的分析方法，包括如下步骤：
[0012]a)采用上述HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法获得供试品溶液中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的总含量对应的吸光度值；
[0013]b)采用快速水分测定仪测定蟾酥鲜浆样品中的水分值；
[0014]c)将步骤a)中的吸光度值和步骤b)中的水分值代入公式(1)中计算蟾酥鲜浆样品中以干燥品计的蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的折干总含量，
[0015]所述公式(1)为：
[0016]式中，A为供试品溶液的吸光度值；m为蟾酥鲜浆样品的称样量，mg；水分为采用快速水分仪测得的水分值；
[0017]d)将c)获得蟾酥鲜浆样品中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的折干总含量与限定折干总含量值进行比较，确定蟾酥鲜浆样品的质量。
[0018]如上所述，本专利技术提供的一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，具有如下有益效果：
[0019](1)本专利技术提供的一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，能够采用Oasis PRiME HLB固相萃取小柱对蟾酥鲜浆进行纯化分离，得到蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基3个成分的混合物，样品处理方法简单、快速，有机溶剂使用少，分析速度快，样品经预处理后即可直接上样，无需活化和平衡。
[0020](2)本专利技术提供的一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，经紫外分光光度计直接检测其含量，检测结果快速、准确，检测仪器价格较低且便于携带，在蟾蜍养殖基地或蟾酥鲜浆供应商处即可实现检测含量的目的。
[0021](3)本专利技术提供的一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，通过与快速水分仪测定相结合，能够快速表征蟾酥药材的质量，全面完善蟾酥鲜浆的质量控制体系，为蟾酥鲜浆的质量控制提供了依据。
附图说明
[0022]图1显示为本专利技术的对照品及供试品的紫外吸收光谱图1a、1b，其中，图1a为对照品的紫外吸收光谱图，图1b为供试品的紫外吸收光谱图。
[0023]图2显示为本专利技术中华蟾酥毒基的线性曲线图。
具体实施方式
[0024]本专利技术第一方面提供一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，包括如下步骤：
[0025]1)将蟾酥鲜浆样品加第一溶剂溶散，再加入第二溶剂超声提取后取上清液混匀、放冷，获得提取液；
[0026]2)将步骤1)中获得的提取液上样至HLB固相萃取柱后采用第三溶剂清洗，再采用第四溶剂洗脱、定容，获得供试品溶液；
[0027]3)将华蟾酥毒基的对照品加入第二溶剂溶解并定容，获得对照品溶液；
[0028]4)将步骤2)中获得的供试品溶液和步骤3)中获得的对照品溶液分别采用紫外分
光光度法(UV)进行测定，采用标准曲线法进行定量，确定供试品溶液中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的总含量。
[0029]较佳地，步骤1)中，所述第一溶剂为无机溶剂，包括且不限于水，优选为水。
[0030]较佳地，步骤1)中，所述蟾酥鲜浆样品加入的质量g与第一溶剂加入的体积mL之比为0.2:5
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50，具体如0.2:5
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12.5、0.2:12.5
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25、0.2:25
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50，优选为0.2:12.5。
[0031]较佳地，步骤1)中，所述溶散采用涡旋进行溶解分散，所述涡旋至蟾酥鲜浆样品无结块。
[0032]较佳地，步骤1)中，所述第二溶剂为有机溶剂，包括且不限于甲醇、乙醇、丙酮等，优选为甲醇。
[0033]较佳地，步骤1)中，所述蟾酥鲜浆样品加入的质量g与第二溶剂加入的体积mL之比为0.2:5
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50，具本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，包括如下步骤：1)将蟾酥鲜浆样品加第一溶剂溶散，再加入第二溶剂超声提取后取上清液混匀、放冷，获得提取液；2)将步骤1)中获得的提取液上样至HLB固相萃取柱后采用第三溶剂清洗，再采用第四溶剂洗脱、定容，获得供试品溶液；3)将华蟾酥毒基的对照品加入第二溶剂溶解并定容，获得对照品溶液；4)将步骤2)中获得的供试品溶液和步骤3)中获得的对照品溶液分别采用紫外分光光度法进行测定，采用标准曲线法进行定量，确定供试品溶液中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的总含量。2.根据权利要求1所述的一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，其特征在于，步骤1)中包括以下条件中任一项或多项：A1)所述第一溶剂为无机溶剂；优选地，所述第一溶剂为水；A2)所述蟾酥鲜浆样品加入的质量与第一溶剂加入的体积之比为0.2:5
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50，g/mL；A3)所述溶散采用涡旋进行溶解分散，所述涡旋至蟾酥鲜浆样品无结块；A4)所述第二溶剂为有机溶剂；优选地，所述第二溶剂选自甲醇、乙醇或丙酮中一种；更优选地，所述第二溶剂为甲醇；A5)所述蟾酥鲜浆样品加入的质量与第二溶剂加入的体积之比为0.2:5
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50，g/mL；A6)所述超声提取的时间为10
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50min。3.根据权利要求1所述的一种HLB固相萃取
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UV法快速检测蟾酥鲜浆中有效成分含量的方法，其特征在于，步骤2)中包括以下条件中任一项或多项：B1)所述HLB固相萃取柱为Oasis PRiME HLB固相萃取小柱；B2)所述提取液在HLB固相萃取柱的上样量为0.5
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2mL；B3)所述第三溶剂为体积百分比浓度为28
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30％的乙腈水溶液；B4)所述提取液与第三溶剂加入的体积之比为0.5
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2:4.5
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5.5；B5)所述第四溶剂为体积百分比浓度为90
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98％的乙腈水溶液；B6)所述提取液与第四溶剂加入的体积之比为0.5

【专利技术属性】
技术研发人员：孔瑶，詹常森，姜鹏，温方方，武志立，孙丽雪，戴悦，
申请(专利权)人：上海和黄药业有限公司，
类型：发明
国别省市：