一种聚合酶链反应检测香蕉穿孔线虫的方法技术

一种聚合酶链反应检测香蕉穿孔线虫的方法，特异性引物由正向引物Ｒｓ－Ｆ、反向引物Ｒｓ－Ｒ组成，正向引物的序列是：５′－ＣＡＡＴＡＣＧＡＴＴＣＣＧＴＣＣＴＴＴＧＧＴＧＧＧＣ－３′；反向引物的序列是：５′－ＧＧＡＡＧＴＧＡＣＴＣＣＡＡＴＧＧＣＧＣＡＡＴＧＴＧ－３′。线虫的核酸提取方法提取效率高，提取的核酸纯度高。操作人员无需丰富的形态学知识和经验，采用普通ＰＣＲ扩增仪，就可以使用本发明专利技术设计的引物及方法，快速准确地对香蕉穿孔线虫的幼虫、雌虫和雄虫，甚至单条香蕉穿孔线虫的幼虫、雌虫和雄虫进行检疫、检测和鉴定，反应时间可以缩减为７０分钟，并且可以对单条香蕉穿孔线虫的幼虫进行ＰＣＲ扩增反应。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种聚合酶链反应检测香蕉穿孔线虫的方法，依次有以下步骤：１）合成引物，２）培养线虫，３）提取核酸，４）扩增反应，其特征在于：　所述步骤１）合成引物是先设计一对由特异性正向引物Ｒｓ－Ｆ、特异性反向引物Ｒｓ－Ｒ组成的一对特异性引物，再按照 特异性正向引物Ｒｓ－Ｆ、特异性反向引物Ｒｓ－Ｒ的序列合成特异性引物备用；　所述正向引物Ｒｓ－Ｆ的序列是：　５′－ＣＡＡＴＡＣＧＡＴＴＣＣＧＴＣＣＴＴＴＧＧＴＧＧＧＣ－３′；　所述反向引物Ｒｓ－Ｒ的序列是：　５′－ＧＧＡＡＧＴ ＧＡＣＴＣＣＡＡＴＧＧＣＧＣＡＡＴＧＴＧ－３′。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李芳荣，龙海，彭德良，李一农，
申请(专利权)人：深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]