试剂盒及其制备方法和使用方法以及即用型测定培养基的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种试剂盒及其制备方法和使用方法以及即用型测定培养基的制备方法，其中，试剂盒用以制备即用型测定培养基，试剂盒的制备方法包括：将基础成分溶解于液体中，进行无菌化处理，并将预定量的无菌溶液装至无菌的第一试剂瓶中；将预定量的微量成分装至第二试剂瓶中并制备为冻干，微量成分包括光热敏感成分，光热敏感成分中包括冻干保护成分。应用本发明专利技术的技术方案，能够有效地解决现有技术中即用型测定培养基的稳定性差、保质期短的问题。题。题。

【技术实现步骤摘要】
试剂盒及其制备方法和使用方法以及即用型测定培养基的制备方法


[0001]本专利技术涉及培养基领域，具体而言，涉及一种试剂盒及其制备方法和使用方法以及即用型测定培养基的制备方法。

技术介绍

[0002]现有技术中，水溶性B维生素的检测在国标方法中多采用微生物方法，以叶酸为例，作为鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus(ATCC 7469)生长所必需的营养素，在一定控制条件下，将鼠李糖乳杆菌接种至含有试样液的培养液中，培养一段时间后测定透光率(或吸光度值)，根据叶酸含量与透光率(或吸光度值)的标准曲线计算出试样中叶酸的含量。此方法中，维生素检测培养基的性能对最终检测结果有着关键影响。该培养基成分复杂、微量成分繁多、保质期短，对于维生素快速检测产品——即用型试剂盒而言，培养基的处理方式一直是一个难点。

技术实现思路

[0003]本专利技术的主要目的在于提供一种试剂盒及其制备方法和使用方法以及即用型测定培养基的制备方法，以解决现有技术中即用型测定培养基的稳定性差、保质期短的问题。
[0004]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了一种试剂盒的制备方法，试剂盒用以制备即用型测定培养基，即用型测定培养基为叶酸即用型测定培养基、维生素B
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即用型测定培养基、生物素即用型测定培养基与泛酸即用型测定培养基中的任一种，试剂盒的制备方法包括：将基础成分溶解于液体中，进行无菌化处理，并将预定量的无菌溶液装至无菌的第一试剂瓶中；将预定量的微量成分装至第二试剂瓶中并制备为冻干，微量成分包括光热敏感成分，光热敏感成分中包括冻干保护成分；其中，在即用型测定培养基为叶酸即用型测定培养基的情况下，基础成分包括：酸水解无维生素酪蛋白、无水葡萄糖、三水合乙酸钠、磷酸氢二钾以及磷酸二氢钾，微量成分包括：葡萄糖、L
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色氨酸、L
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盐酸半胱氨酸、L
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天冬氨酸、硫酸腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、黄嘌呤、聚山梨酯
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80、还原型谷胱甘肽、七水合硫酸镁、氯化钠、七水合硫酸亚铁、一水合硫酸锰、核黄素、对氨基苯甲酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、泛酸钙、尼克酸以及生物素；在即用型测定培养基为维生素B
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即用型测定培养基的情况下，基础成分包括：酸水解无维生素酪蛋白、无水葡萄糖、乙酸钠、抗坏血酸、磷酸氢二钾以及磷酸二氢钾，微量成分包括：葡萄糖、天门冬酰胺、L
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胱氨酸、DL
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色氨酸、硫酸腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、黄嘌呤、核黄素、盐酸硫胺素、生物素、烟酸、ρ
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氨基苯甲酸、泛酸钙、盐酸吡哆醇、盐酸吡哆醛、烟酸吡哆胺、叶酸、硫酸镁、氯化钠、硫酸亚铁、硫酸锰以及聚山梨糖单油酸酯；在即用型测定培养基为生物素即用型测定培养基的情况下，基础成分包括：酸水解无维生素酪蛋白、无水葡萄糖、乙酸钠、磷酸氢二钾以及磷酸二氢钾，微量成分包括：无水葡萄糖、L
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胱氨酸、DL
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色氨酸、硫酸腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、盐酸硫胺素、核黄素、烟酸、泛酸钙、盐酸吡哆醇、ρ
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氨基苯甲酸、硫酸镁、氯化钠、硫酸亚铁以及硫酸锰；在即
用型测定培养基为泛酸即用型测定培养基的情况下，基础成分包括：酸水解无维生素酪蛋白、无水葡萄糖、乙酸钠、磷酸氢二钾以及磷酸二氢钾，微量成分包括：无水葡萄糖、L
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胱氨酸、L
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色氨酸、硫酸镁、氯化钠、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、核黄素、盐酸硫胺素、生物素、ρ
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氨基苯甲酸、烟酸、盐酸吡哆醇以及聚山梨糖单油酸酯。
[0005]在一个实施方式中，试剂盒用以进行维生素测定，试剂盒的制备方法还包括：将预定量的标准品装至第三试剂瓶中并制备为冻干；和/或，将预定量的检测菌球装至第四试剂瓶中并制备为冻干；其中，在即用型测定培养基为叶酸即用型测定培养基的情况下，标准品为叶酸标准品，检测菌球为叶酸检测菌球；在即用型测定培养基为维生素B
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即用型测定培养基的情况下，标准品为维生素B
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标准品，检测菌球为维生素B
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检测菌球；在即用型测定培养基为生物素即用型测定培养基的情况下，标准品为生物素标准品，检测菌球为生物素检测菌球；在即用型测定培养基为泛酸即用型测定培养基的情况下，标准品为泛酸标准品，检测菌球为泛酸检测菌球。
[0006]在一个实施方式中，将预定量的微量成分装至第二试剂瓶中并制备为冻干，微量成分包括光热敏感成分，光热敏感成分中包括冻干保护成分，包括：将微量成分按配方配置成浓缩50倍的浓缩溶液并将预定量的浓缩溶液装入第二试剂瓶中，微量成分包括光热敏感成分，光热敏感成分中包括冻干保护成分；将第二试剂瓶放入设备中以进行冻干操作；密封第二试剂瓶。
[0007]在一个实施方式中，在即用型测定培养基为叶酸即用型测定培养基的情况下，配置1000ml的浓缩液的基础成分的配方为：酸水解无维生素酪蛋白10g、无水葡萄糖39g、三水合乙酸钠40g、磷酸氢二钾2g以及磷酸二氢钾2g；配置1000ml的浓缩液的微量成分的配方为：葡萄糖1g、L
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色氨酸0.4g、L
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盐酸半胱氨酸0.4g、L
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天冬氨酸0.6g、硫酸腺嘌呤20mg、盐酸鸟嘌呤20mg、尿嘧啶20mg、黄嘌呤20mg、聚山梨酯
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80 0.1g、还原型谷胱甘肽5mg、七水合硫酸镁0.4g、氯化钠20mg、七水合硫酸亚铁20mg、一水合硫酸锰20mg、核黄素1mg、对氨基苯甲酸2mg、盐酸吡哆醇4mg、盐酸硫胺素400μg、泛酸钙800μg、尼克酸800μg以及生物素20μg；在即用型测定培养基为维生素B
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即用型测定培养基的情况下，配置1000ml的浓缩液的基础成分的配方为：酸水解无维生素酪蛋白15g、无水葡萄糖39g、乙酸钠20g、抗坏血酸4.0g、磷酸氢二钾1.0g以及磷酸二氢钾1.0g；配置1000ml的浓缩液的微量成分的配方为：葡萄糖1.0g、天门冬酰胺0.2g、L
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胱氨酸0.4g、DL
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色氨酸0.4g、硫酸腺嘌呤20.0mg、盐酸鸟嘌呤20.0mg、尿嘧啶20.0mg、黄嘌呤20.0mg、核黄素1.0mg、盐酸硫胺素1.0mg、生物素10.0μg、烟酸2.0mg、ρ
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氨基苯甲酸2.0mg、泛酸钙1.0mg、盐酸吡哆醇4.0mg、盐酸吡哆醛4.0mg、烟酸吡哆胺800μg、叶酸200μg、硫酸镁0.4g、氯化钠20.0mg、硫酸亚铁20.0mg、硫酸锰20mg以及聚山梨糖单油酸酯2.0g；在即用型测定培养基为生物素即用型测定培养基的情况下，配置1000ml的浓缩液的基础成分的配方为：酸水解无维生素酪蛋白12g、无水葡萄糖39g、乙酸钠20g、磷酸氢二钾1.0g以及磷酸二氢钾1.0g；配置1000ml的浓缩液的微量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种试剂盒的制备方法，其特征在于，所述试剂盒用以制备即用型测定培养基，所述即用型测定培养基为叶酸即用型测定培养基、维生素B
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即用型测定培养基、生物素即用型测定培养基与泛酸即用型测定培养基中的任一种，所述试剂盒的制备方法包括：将基础成分溶解于液体中，进行无菌化处理，并将预定量的无菌溶液装至无菌的第一试剂瓶中；将预定量的微量成分装至第二试剂瓶中并制备为冻干，所述微量成分包括光热敏感成分，所述光热敏感成分中包括冻干保护成分；其中，在所述即用型测定培养基为叶酸即用型测定培养基的情况下，所述基础成分包括：酸水解无维生素酪蛋白、无水葡萄糖、三水合乙酸钠、磷酸氢二钾以及磷酸二氢钾，所述微量成分包括：葡萄糖、L
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色氨酸、L
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盐酸半胱氨酸、L
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天冬氨酸、硫酸腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、黄嘌呤、聚山梨酯
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80、还原型谷胱甘肽、七水合硫酸镁、氯化钠、七水合硫酸亚铁、一水合硫酸锰、核黄素、对氨基苯甲酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、泛酸钙、尼克酸以及生物素；在所述即用型测定培养基为维生素B
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即用型测定培养基的情况下，所述基础成分包括：酸水解无维生素酪蛋白、无水葡萄糖、乙酸钠、抗坏血酸、磷酸氢二钾以及磷酸二氢钾，所述微量成分包括：葡萄糖、天门冬酰胺、L
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胱氨酸、DL
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色氨酸、硫酸腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、黄嘌呤、核黄素、盐酸硫胺素、生物素、烟酸、ρ
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氨基苯甲酸、泛酸钙、盐酸吡哆醇、盐酸吡哆醛、烟酸吡哆胺、叶酸、硫酸镁、氯化钠、硫酸亚铁、硫酸锰以及聚山梨糖单油酸酯；在所述即用型测定培养基为生物素即用型测定培养基的情况下，所述基础成分包括：酸水解无维生素酪蛋白、无水葡萄糖、乙酸钠、磷酸氢二钾以及磷酸二氢钾，所述微量成分包括：无水葡萄糖、L
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胱氨酸、DL
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色氨酸、硫酸腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、盐酸硫胺素、核黄素、烟酸、泛酸钙、盐酸吡哆醇、ρ
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氨基苯甲酸、硫酸镁、氯化钠、硫酸亚铁以及硫酸锰；在所述即用型测定培养基为泛酸即用型测定培养基的情况下，所述基础成分包括：酸水解无维生素酪蛋白、无水葡萄糖、乙酸钠、磷酸氢二钾以及磷酸二氢钾，所述微量成分包括：无水葡萄糖、L
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胱氨酸、L
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色氨酸、硫酸镁、氯化钠、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、核黄素、盐酸硫胺素、生物素、ρ
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氨基苯甲酸、烟酸、盐酸吡哆醇以及聚山梨糖单油酸酯。2.根据权利要求1所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述试剂盒用以进行维生素测定，所述试剂盒的制备方法还包括：将预定量的标准品装至第三试剂瓶中并制备为冻干；和/或，将预定量的检测菌球装至第四试剂瓶中并制备为冻干；其中，在所述即用型测定培养基为叶酸即用型测定培养基的情况下，所述标准品为叶酸标准品，所述检测菌球为叶酸检测菌球；在所述即用型测定培养基为维生素B
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即用型测定培养基的情况下，所述标准品为维生素B
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标准品，所述检测菌球为维生素B
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检测菌球；在所述即用型测定培养基为生物素即用型测定培养基的情况下，所述标准品为生物素标准品，所述检测菌球为生物素检测菌球；在所述即用型测定培养基为泛酸即用型测定培养基的情况下，所述标准品为泛酸标准品，所述检测菌球为泛酸检测菌球。3.根据权利要求1所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，将预定量的微量成分装至第二试剂瓶中并制备为冻干，所述微量成分包括光热敏感成分，所述光热敏感成分中包括冻
干保护成分，包括：将微量成分按配方配置成浓缩50倍的浓缩溶液并将预定量的浓缩溶液装入第二试剂瓶中，所述微量成分包括光热敏感成分，所述光热敏感成分中包括冻干保护成分；将所述第二试剂瓶放入设备中以进行冻干操作；密封所述第二试剂瓶。4.根据权利要求3所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，在所述即用型测定培养基为叶酸即用型测定培养基的情况下，配置1000ml的浓缩液的所述基础成分的配方为：酸水解无维生素酪蛋白10g、无水葡萄糖39g、三水合乙酸钠40g、磷酸氢二钾2g以及磷酸二氢钾2g；配置1000ml的浓缩液的所述微量成分的配方为：葡萄糖1g、L
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色氨酸0.4g、L
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盐酸半胱氨酸0.4g、L
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天冬氨酸0.6g、硫酸腺嘌呤20mg、盐酸鸟嘌呤20mg、尿嘧啶20mg、黄嘌呤20mg、聚山梨酯
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80 0.1g、还原型谷胱甘肽5mg、七水合硫酸镁0.4g、氯化钠20mg、七水合硫酸亚铁20mg、一水合硫酸锰20mg、核黄素1mg、对氨基苯甲酸2mg、盐酸吡哆醇4mg、盐酸硫胺素400μg、泛酸钙800μg、尼克酸800μg以及生物素20μg；在所述即用型测定培养基为维生素B
12
即用型测定培养基的情况下，配置1000ml的浓缩液的所述基础成分的配方为：酸水解无维生素酪蛋白15g、无水葡萄糖39g、乙酸钠20g、抗坏血酸4...

【专利技术属性】
技术研发人员：何艳玲，吴艳辉，刘丰瑞，胡朋，
申请(专利权)人：北京陆桥技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：