稳定乳液及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开稳定乳液及其制备方法和用途。本发明专利技术通过氢氧化铝微凝胶稳定乳液。稳定乳液包括油相、水相和吸附在油水界面或分散在水相中的复合稳定剂。在稳定剂中加入与氢氧化铝微凝胶相互作用的带电颗粒，可以进一步提升乳液稳定性及免疫应答效果。本发明专利技术的稳定乳液可用作油乳佐剂，其粒径均一、分散性良好、稳定性良好、性质可调控，可同时激活体液免疫和细胞免疫应答，可以作为疫苗佐剂或疫苗递送系统应用于预防性疫苗和治疗性疫苗。于预防性疫苗和治疗性疫苗。于预防性疫苗和治疗性疫苗。

【技术实现步骤摘要】
稳定乳液及其制备方法和用途


[0001]本专利技术属于生物制品领域，特别涉及可以用于人或其他动物体内的稳定乳液及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]新型疫苗(如：裂解疫苗、重组亚单位疫苗、抗独特型抗体疫苗、核酸疫苗及合成肽疫苗等)结构简单，仅将病毒中可以表达特异性抗体的蛋白序列通过基因工程的方式重组表达出来，无传染性且不携带病原体炎症或引发其他副作用的成分，具有良好的生物安全性，但是这些抗原的免疫原性和免疫保护性普遍较弱，所以需要加入佐剂提升抗原保护效果，强化免疫应答。特别是应对突发疫情以及肿瘤等慢性疾病，急需合理化设计稳定、安全、高效的疫苗佐剂以强化疫苗的免疫效果。
[0003]基于氢氧化铝或铝盐的铝微凝胶因其较大的比表面积、较高的抗原负载量以及较长的抗原储库效应，使其在疫苗佐剂中得到了广泛的应用。
[0004]其中，以氢氧化铝和磷酸铝凝胶为主的铝微凝胶仍是我国唯一批准使用的疫苗佐剂。自1926年Glenny首先应用铝盐吸附白喉类毒素开始，至今铝微凝胶佐剂已经广泛应用于多种疫苗。虽然在百日咳、乙肝等疫苗中可以有效激活抗原特异性抗体分泌，但其佐剂的作用机制仍然不清晰，同时其细胞免疫效果较差，难以引发有效的细胞免疫对机体产生综合性的保护，在H5N1等疫苗中的响应效果十分有限，难以满足日益增加的疫苗佐剂需求。
[0005]因此，为应对突发传染病以及肿瘤等慢性疾病，如何合理化改造铝微凝胶佐剂，以构建安全高效的疫苗佐剂，并深入探究其免疫活化机制是急需解决的关键科学问题。
[0006]目前，对基于氢氧化铝和铝盐的铝微凝胶佐剂的改造主要集中在优化基于氢氧化铝和铝盐的铝微凝胶佐剂的形貌。如：纳米级氢氧化铝凝胶(CN103948921A)、棒状的铝佐剂(CN108324939A)以及微针阵列(CN110680916A)等；或在铝佐剂中加入免疫活化物质，如：单磷脂酰A(GSK公司的AS04)、表皮生长因子受体EGFR(CN105385658A)、双链聚核苷
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ε
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聚赖氨酸
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硫酸聚糖复合物(CN109701011A)、吲哚胺
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2,3双加氧酶的非竞争性抑制剂(CN106474468B)等。
[0007]
技术介绍
中的信息仅仅在于说明本专利技术的总体背景，不应视为承认或以任何形式暗示这些信息构成本领域一般技术人员所公知的现有技术。

技术实现思路

[0008]为解决现有技术中的至少部分技术问题，专利技术人进行了深入研究，发现当铝源材料中氢氧化铝含量超过15％(w/w)即可有效稳定油水界面，并且在加入带电颗粒，特别是带负电颗粒后，可以进一步提升乳液稳定性，同时具有优异的技术效果，例如能够改善铝微凝胶的分散性，带电颗粒与正电荷的铝微凝胶发生桥联作用，使得在油水界面的铝微凝胶链接更加紧密，有效降低长期储存中油相的溢出，进而提升乳液稳定性。与此同时这种复合型乳液可以有效降低油水界面能，得到粒径更小的乳液。具体地，本专利技术包括以下内容。
[0009]本专利技术的第一方面，提供一种稳定乳液，其包括油相、水相和吸附在油水界面或分散在水相中的复合稳定剂，所述复合稳定剂包含氢氧化铝微凝胶以及与所述氢氧化铝微凝胶相互作用的带电颗粒。
[0010]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述带电颗粒与所述氢氧化铝微凝胶具有生物相容性，所述相互作用包括桥联作用。
[0011]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述氢氧化铝微凝胶选自以氢氧化铝、磷酸铝、硫酸铝钾、蒙脱石、含有钙、锰、铝的水合盐等中的至少一种，通过碱液调控pH，使其中氢氧化铝质量比超过15％含有铝元素的胶体或混悬液；所述带电颗粒选自非阳离子型颗粒或生物大分子。
[0012]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述油相包含选自角鲨烯、肉豆蔻酸异丙酯、蓖麻油、生育酚、米格列醇、植物油、维生素E、亚油酸乙酯、月桂酸异丙酯、内豆蔻酸异丙酯、二甲基硅油、橄榄油、辛酸甘油三酯和癸酸甘油三酯中的至少一种；所述水相包含选自纯化水、注射用水、甘油水溶液、缓冲盐水溶液和临床输液中的至少一种。
[0013]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述带电颗粒选自天然蛋白、核酸、病毒颗粒、细菌颗粒、聚合物纳米颗粒、脂质体和脂质纳米颗粒。
[0014]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述水相内包含抗原。
[0015]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述复合稳定剂，即铝微凝胶和非阳离子型颗粒/生物大分子形成的复合物的平均粒径为50μm，所述稳定乳液中乳滴直径在200nm
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100μm之间，优选200nm
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50μm之间，例如200nm、400nm、600nm、800nm、1μm、10μm、20μm、30μm、40μm、50μm或期间任意范围的直径。
[0016]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述稳定乳液为水包油乳液。
[0017]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述铝微凝胶和/或所述带电颗粒的表面具有选自亲水修饰、疏水修饰、覆层和接枝改性中的至少一种修饰。
[0018]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，油相和水相的体积比为1:200
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8:1，所述复合稳定剂在所述水相中的质量浓度在0.02
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20wt％。
[0019]根据本专利技术所述的稳定乳液，优选地，所述复合稳定剂中所述铝微凝胶与所述带电颗粒的重量比为1:1
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100。
[0020]本专利技术的第二方面，提供稳定乳液的制备方法。
[0021]本专利技术的第三方面，提供稳定乳液作为疫苗佐剂或疫苗递送系统的用途。
[0022]与已有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0023]本专利技术中，通过调控pH，可以构建片状的氢氧化铝微凝胶，其具备一定的柔性，与铝纳米颗粒以及磷酸铝微球等相比，具备更大的比表面积，有利于其更好地贴合油水界面，进而形成更稳定的乳液。同时，将铝微凝胶和非阳离子型颗粒/生物大分子共同制备稳定的复合型水包油乳液(油乳制剂)结合制备不需表面活性剂的油乳佐剂，应用于疫苗佐剂的开发领域。铝微凝胶和非阳离子型颗粒/生物大分子的加入，不仅可以提高制剂的生物相容性，避免表面活性剂对人体、动物或疫苗带来的不良影响，并且能够更加有效地刺激免疫细胞，激发免疫调节功能。同时，铝微凝胶和非阳离子型颗粒/生物大分子的性质便于调控，可以对其进行表面修饰或覆层，或者选择不同性质(如组成、形貌、结构、粒径等)的铝微凝胶和非阳离子型颗粒/生物大分子，发挥不同的免疫增强机制，以及对抗原进行包埋、吸附或
偶联，作为抗原的运送载体，利用其抗原控制释放的能力来调节免疫应答，还可以应用于多种免疫接种方式。
[0024]本专利技术采用铝微凝胶和带电颗粒如非阳离子型颗粒及生物大分子共同稳定乳液，一方面可以中和带正电荷的铝微凝胶表面电荷，改善铝微凝胶的分散性；另一方面，负电的颗粒或生物大分子可以与正电荷的铝微凝胶发生一定程度的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种稳定乳液，其特征在于，包括油相、水相和吸附在油水界面或分散在水相中的复合稳定剂，所述复合稳定剂包含氢氧化铝微凝胶以及与所述氢氧化铝微凝胶相互作用的带电颗粒。2.根据权利要求1所述的稳定乳液，其特征在于，所述带电颗粒与所述氢氧化铝微凝胶具有生物相容性，所述相互作用包括桥联作用。3.根据权利要求1所述的稳定乳液，其特征在于，所述氢氧化铝微凝胶包括磷酸铝凝胶、氢氧化铝微凝胶和硫酸铝钾凝胶、蒙脱石、含有钙、锰、铝的水合盐中的至少一种，其通过碱液进行调控pH，从而使其中氢氧化铝质量比超过15％含有铝元素的胶体或混悬液；所述带电颗粒选自非阳离子型颗粒或生物大分子。4.根据权利要求3所述的稳定乳液，其特征在于，经调控后的pH值在6.8
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14.0范围之间。5.根据权利要求1所述的稳定乳液，其特征在于，所述油相包含选自角鲨烯、肉豆蔻酸异丙酯、蓖麻油、生育酚、米格列醇、植物油、亚油酸乙酯、月桂酸异丙酯、内豆蔻酸异丙酯、二甲基硅油、橄榄油、辛酸甘油三酯和癸酸甘油三酯中的至少一种；所述水相包含选自纯化水、注射用水、甘油水溶液、缓冲盐水溶液和临床输液中的至少一种。6.根据权利要求1所述的稳定乳液，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏宇飞，马光辉，彭沙，燕雨蒙，
申请(专利权)人：中国科学院过程工程研究所，
类型：发明
国别省市：