本发明专利技术公开了一种大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，其氨基酸序列为PRQVCPYAVISFHFK，抗菌肽FAM286的分子量为1791道尔顿。本发明专利技术抗菌肽FAM286具有强烈的抑制副溶血性弧菌生长的作用，可作为制备预防或抑制副溶血性弧菌感染的药物、饲料添加剂和食品防腐剂。饲料添加剂和食品防腐剂。饲料添加剂和食品防腐剂。
【技术实现步骤摘要】
一种大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286及其应用
[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286及其应用。
技术介绍
[0002]副溶血性弧菌是常见的食源性病原菌，广泛分布于近海水域、河口及海底沉积物中，是海产品中受污染程度最严重的病原菌之一。该菌在水产品中的天然带菌率较高。食用被该菌污染的生的或未煮熟的水产品，极易引起恶心、呕吐、腹泻、腹痛等肠胃炎症状。目前主要使用抗生素用来防治副溶血性弧菌感染，但大规模使用抗生素容易产生耐药性。
[0003]抗菌肽作为广泛存在于自然界生物中的一类多肽物质，对细菌具有良好的抑制作用，且安全性高，符合当今绿色生产的要求，可作为传统抗生素和饲料添加剂的代替品。鱼类属脊索动物门，非特异性免疫系统是鱼类抵抗各类病原体的第一道防御屏障，抗菌肽是鱼类非特异性免疫系统的重要组成部分。鱼类栖息在含有各种微生物的水体环境中，当其受到病原微生物侵袭或机体损伤时，能够迅速产生以抗菌肽为主的免疫分子以防御病原微生物的侵入或者杀伤病原微生物。因此，从鱼类分离出能够防御病原微生物侵入或者杀伤病原微生物的抗菌肽具有良好的应用前景。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286及其应用，解决上述
技术介绍
中的问题。
[0005]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之一是：提供一种大黄鱼TASO R蛋白抗菌肽FAM286。其氨基酸序列为PRQVCPYAVISFHFK，如SEQ ID NO：1所示。
[0006]抗菌肽FAM286的分子量为1791道尔顿，所带电荷为+2，总疏水性比为47％。
[0007]抗菌肽FAM286是从如下原理对细菌造成破坏：
[0008](一)抗菌肽FAM286具有的正电荷可与细菌细胞膜发生作用，增加细菌细胞膜成孔活性；
[0009](二)破坏细胞膜的同时改变细菌细胞膜的通透性，使细胞内物质外渗进而导致细菌死亡；
[0010](三)以嵌插方式与DNA结合，破坏细菌DNA结构，导致细菌死亡。
[0011]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之二是：提供一种大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286在制备抗菌药物中的应用，该抗菌药物用于抑制和/或杀灭副溶血性弧菌。
[0012]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之三是：提供一种抗菌药物，其有效成分包括大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，所述抗菌肽FAM286的氨基酸序列为SEQ ID NO：1。
[0013]在本专利技术一较佳实施例中，所述抗菌药物的有效成分为大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，所述抗菌肽FAM286的氨基酸序列为SEQ ID NO：1。
[0014]在本专利技术一较佳实施例中，所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭副副溶血性弧菌。
[0015]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之四是：提供一种饲料添加剂，其有效成分包括大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，所述抗菌肽FAM286的氨基酸序列为SEQ ID NO：1。
[0016]在本专利技术一较佳实施例中，所述饲料添加剂的有效成分为大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，所述抗菌肽FAM286的氨基酸序列为SEQ ID NO：1。
[0017]在本专利技术一较佳实施例中，所述饲料添加剂用于抑制和/或杀灭副溶血性弧菌。
[0018]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之五是：提供一种食品防腐剂，其有效成分为大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，所述抗菌肽FAM286的氨基酸序列为SEQ ID NO：1。
[0019]在本专利技术一较佳实施例中，所述食品防腐剂用于抑制和/或杀灭副溶血性弧菌。
[0020]本专利技术的抗菌肽可以采用本领域技术人员已知的方法合成，例如固相合成，并采用本领域技术人员已知的方法进行纯化，例如高效液相色谱法。
[0021]实施本专利技术，具有如下有益效果：
[0022]本专利技术以大黄鱼为研究对象，通过LC
‑
MS质谱结果对所的肽段进行生物信息学预测，发现一个全新氨基酸序列的多肽FAM286。研究多肽FAM286对副溶血性弧菌的抑菌活性，实验结果表明，该肽对副溶血性弧菌具有强烈的抑制作用。它的抑菌机理是首先吸附在细菌表面，破坏细菌的细胞膜，并与细菌DNA相结合破坏DNA的结构，从而达到使细菌死亡的作用。本专利技术抗菌肽FAM286可用于制备预防或抑制副溶血性弧菌感染的药物、饲料添加剂或食品防腐剂。
附图说明
[0023]图1为抗菌肽FAM286的质谱图。
[0024]图2为抗菌肽FAM286的结构示意图。
[0025]图3为抗菌肽FAM286对副溶血性弧菌最低杀菌浓度(MBC)测定对照图。
[0026]其中，
[0027]A：抗菌肽浓度0μg/mL；
[0028]B：抗菌肽浓度31.2μg/mL；
[0029]C：抗菌肽浓度15.6μg/mL；
[0030]D：抗菌肽浓度7.8μg/mL；
[0031]E：抗菌肽浓度3.9μg/mL；
[0032]F：抗菌肽浓度1.8μg/mL。
[0033]图4为抗菌肽FAM286对副溶血性弧菌时间杀伤(Time
‑
Kill)曲线分析图。
[0034]图5为抗菌肽FAM286与溴化乙锭(EB)竞争性结合副溶血性弧菌中的DNA的荧光强度图。
[0035]图6为抗菌肽FAM286与副溶血性弧菌中的DNA结合的荧光强度图。
[0036]图7为菌液中核酸含量的测定结果图。
[0037]图8为菌液中蛋白质含量的测定结果图。
[0038]图9为抗菌肽FAM286与副溶血性弧菌DNA结合电泳图。
[0039]其中，条带g：空白对照；条带a
‑
f：分别是FAM286与DNA质量比为10/1，5/1，5/2，5/3，5/4，1/1。
[0040]图10为抗菌肽FAM286导致副溶血性弧菌凋亡的流式细胞图。
[0041]其中，A：未处理过的副溶血性弧菌荧光强度；
[0042]B：1
×
MBC的抗菌肽FAM286处理过的副溶血性弧菌荧光强度；
[0043]C：2
×
MBC的抗菌肽FAM286处理过的副溶血性弧菌荧光强度。
[0044]图11为贮藏过程中大黄鱼及罗非鱼菌落总数的变化图。其中，
[0045]A：4℃下大黄鱼的菌落总数变化；
[0046]B：25℃下大黄鱼的菌落总数变化；
[0047]C：4℃下罗非鱼的菌落总数变化；
[0048]D：25℃下罗非鱼的菌落总数变化。
具体实施方式
[0049]为了更好地理解本专利技术，下面结合实施例和附图对本专利技术做进一步的详细说明，但本领域技术人员了解，下述实施例不是对本专利技术保护范围的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。2.如权利要求1所述的大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286在制备抗菌药物中的应用，其特征在于：所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭副溶血性弧菌。3.一种抗菌药物，其特征在于：其有效成分包括大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，所述抗菌肽FAM286的氨基酸序列为SEQ ID NO：1。4.如权利要求3所述的抗菌药物，其特征在于：其有效成分为大黄鱼TASOR蛋白抗菌肽FAM286，所述抗菌肽FAM286的氨基酸序列为SEQ ID NO：1。5.如权利要求3或4任一项所述的抗菌药物，其特征在于：所述抗菌药物用于抑制和/或杀灭副溶血性弧菌。6.一种饲料添...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨燊，魏光磊，裘德，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：
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