Tricin的检测方法技术

本发明专利技术属于化学分析技术领域，具体涉及白酒和/或酿酒副产物中Tricin的检测方法。针对目前尚未见检测白酒和/或酿酒副产物中Tricin的相关报道，且解决白酒中微量黄酮类化合物难于定性和定量检测的问题，本发明专利技术提供了从白酒和/或酿酒副产物中检测Tricin的方法。该方法通过固相萃取小柱富集净化预处理，结合高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
Tricin的检测方法


[0001]本专利技术属于化学分析
，具体涉及白酒和/或酿酒副产物中Tricin的检测方法。

技术介绍

[0002]Tricin，化学名为5,7
‑
二羟基
‑2‑
(4
‑
羟基
‑
3,5
‑
二甲氧基苯基)苯并吡喃
‑4‑
酮，是天然黄酮的一种，广泛分布于禾本科、大戟科植物中，具有显著的抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗病毒和免疫调节等作用。
[0003]白酒是以粮谷为主要原料，以大曲、小曲或麸曲及酒母等为糖化发酵剂，经蒸煮、糖化、发酵、蒸馏而制成的蒸馏酒。酿酒副产物由白酒酿造过程起糟滴窖产生的黄水、蒸馏摘酒后段的尾水和蒸馏摘酒后的丢糟等。酿酒副产物的产量非常大，丢糟、尾水和黄水大多作为废弃物处理，既增加了废弃物处理成本，又浪费了资源。
[0004]目前，白酒行业黄酮类化合物的研究还属于空白。这类化合物一般具有难挥发，高沸点的物理化学性质，普遍认为白酒中的微量成份主要是挥发性、低沸点的化合物，难挥发、高沸点的化合物不易随着酒醅的蒸馏过程进入到白酒中。随着分析技术的发展，天然药物分离技术综合运用，白酒及酿酒副产物中分离鉴定出多类高沸点、不挥发性健康功能因子，但目前尚未见检测白酒和/或酿酒副产物中Tricin的相关报道，因此，亟需提供一种操作简便、灵敏度高、准确度高的从白酒和/或酿酒副产物中检测Tricin的检测方法。

技术实现思路

[0005]针对目前尚未见检测白酒和/或酿酒副产物中Tricin的相关报道，且解决白酒中微量黄酮类化合物难于定性和定量检测的问题。本专利技术提供了一种从白酒和/或酿酒副产物中检测Tricin的方法。
[0006]本专利技术提供Tricin的检测方法，从白酒和/或酿酒副产物中检测。
[0007]进一步地，所述Tricin的检测方法，包括以下步骤：
[0008]白酒和/或酿酒副产物采用固相萃取小柱预处理后得待测样品，采用液相质谱法对待测样品进行检测，即可。
[0009]进一步地，所述固相萃取小柱预处理的方法包括：小柱活化，平衡，上样，淋洗，洗脱。
[0010]更进一步地，所述小柱活化是以甲醇或乙腈作为小柱活化溶剂。
[0011]更进一步地，所述小柱平衡是采用1g/L甲酸水溶液进行平衡。
[0012]更进一步地，所述上样包括：将白酒和/或酿酒副产物稀释至酒精浓度5％～20％后进行上样。
[0013]更进一步地，所述淋洗是采用1g/L甲酸水溶液淋洗。
[0014]更进一步地，所述洗脱方式为40％v/v，70％v/v，100％v/v甲醇水溶液梯度洗脱。
[0015]进一步地，所述酿酒副产物为酒糟、黄水、酒尾或底锅水中至少一种。
[0016]进一步地，所述液相质谱法是高效液相色谱
‑
质谱联用法；其中，所述高效液相色谱为反相色谱，流动相的水相中含有0.01～1g/L甲酸或乙酸，有机相为甲醇或乙腈；所述质谱采用正模式检测。
[0017]进一步地，所述高效液相色谱采用梯度洗脱，流动相为：0～10min：20～100％v/v甲醇；10.1～15min：100％v/v甲醇；15.1～17min：20％v/v甲醇；停止洗脱。
[0018]进一步地，所述高效液相色谱的色谱柱为C18柱。
[0019]优选地，色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18柱。
[0020]更优选地，所述ZORBAX Eclipse Plus C18柱长100mm，内径为2.1mm，粒径为1.8μm。
[0021]进一步地，所述高效液相色谱柱温为20～40℃，流速为0.1～0.2mL/min，进样量为1～10uL。
[0022]更优选地，柱温为30℃，流速为0.2mL/min，进样量为2uL。
[0023]进一步地，所述质谱的检测条件为：采用电喷雾离子源，干燥气温度300～350℃，干燥气流量8～12L/min，雾化气压力30～40psig，毛细管电压3500～4000v，毛细管出口电压60～175v。
[0024]优选地，干燥气温度350℃，干燥气流量12L/min，雾化气压力40psig，毛细管电压4000v，毛细管出口电压135v。
[0025]本专利技术检测方法还包括对Tricin含量进行计算的步骤，其包括：
[0026]a、绘制标准曲线：配制Tricin标准溶液，以Tricin标准溶液浓度为横坐标，以Tricin分子离子质荷比信号峰的峰面积为纵坐标，绘制浓度－峰面积标准曲线；
[0027]b、检测并计算Tricin含量：白酒和/或酿酒副产物按所述检测方法进样检测，根据Tricin M/Z信号峰的峰面积与步骤a的标准曲线计算出含量，即可。
[0028]有益效果：
[0029]1、本专利技术首次从白酒和酿酒副产物中分离鉴定出Tricin，并建立了白酒和酒醅中Tricin的定性定量分析方法，为更多黄酮类化合物在白酒酿造领域的检出提供了技术基础。
[0030]2、酿酒副产物黄水中富含多糖、蛋白等大分子杂质和小分子的糖类、酸类杂质，要想从成份复杂的黄水中分离检测出Tricin，难度很大。酿酒副产物中Tricin的研究，一方面可以提高酿酒副产物的循环利用价值，具有一定的经济效益；一方面可以减轻废液处理负担，具有一定的环保效益。
[0031]3、本专利技术创新性地采用固相萃取小柱进行样品前处理，确保样品中大部分杂质成分除去的同时，实现Tricin柱保留，进一步优选小柱的洗脱梯度，最大限度的除去杂质成分，实现Tricin的富集。
[0032]4、本专利技术采用高分辨的液相色谱四级杆飞行时间质谱联用技术，采用分子离子、二级碎片离子定性Tricin，检测灵敏度高，准确性高。
附图说明
[0033]图1为实施例1中Tricin的二级质谱图；
[0034]图2为实施例1中40％甲醇水洗脱液的总离子流图(TIC)和Tricin的提取离子流图
(EIC)；
[0035]图3为实施例1中70％甲醇水洗脱液的总离子流图(TIC)和Tricin的提取离子流图(EIC)；
[0036]图4为实施例1中纯甲醇洗脱液的总离子流图(TIC)和Tricin的提取离子流图(EIC)；
[0037]图5为实施例2中70％甲醇水洗脱液的总离子流图(TIC)和Tricin的提取离子流图(EIC)。
具体实施方式
[0038]白酒属于蒸馏酒，而黄酮类化合物Tricin具有高沸点、不挥发、弱极性的物理化学性质，不容易随着白酒蒸馏过程进入白酒，由此白酒中含量很低。如何预处理对白酒样品中Tricin进行富集的同时，除去其中主要干扰物酸、酯、醇类，是需要解决的一大难题。本专利技术创新性地采用固相萃取小柱进行样品前处理，确保样品中大部分杂质成分除去的同时，实现Tricin柱保留，进一步优选小柱的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Tricin的检测方法，其特征在于：从白酒和/或酿酒副产物中检测，包括以下步骤：白酒和/或酿酒副产物采用固相萃取小柱预处理后得待测样品，采用液相质谱法对待测样品进行检测，即可。2.根据权利要求1所述的Tricin的检测方法，其特征在于：所述固相萃取小柱预处理的方法包括：小柱活化，平衡，上样，淋洗，洗脱。3.根据权利要求2所述的Tricin的检测方法，其特征在于：满足以下至少一项：所述小柱活化是以甲醇或乙腈作为小柱活化溶剂；所述小柱平衡是采用1g/L甲酸水溶液进行平衡；所述淋洗是采用1g/L甲酸水溶液淋洗。4.根据权利要求2或3所述的Tricin的检测方法，其特征在于：所述洗脱方式为40％v/v，70％v/v，100％v/v甲醇水溶液梯度洗脱。5.根据权利要求1所述的Tricin的检测方法，其特征在于：所述酿酒副产物为酒糟、黄水、酒尾或底锅水中至少一种。6.根据权利要求1～5任一项所述的Tricin的检测方法，其特征在于：所述液相质谱法是高效液相色谱
‑
质谱联用法；其中，所述高效液相色谱为反相色谱，流动相的水相中含有0.01～1g/L甲酸或乙酸，有机相为甲醇或乙腈；所述质谱采用正模式检测。7.根据权利要求6所述的Tricin的检测方法，其特征在于：所述高效液相色谱采用梯度洗脱，流动相为：0～10min：20～100％v/v甲醇；10.1～15min：100％v/v甲醇；15.1～17min：20％v/v甲醇；停止...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖勤俭，周韩玲，郑佳，赵东，李杨华，王芳，郭艳，罗珠，宋廷富，胡娇，李松柏，
申请(专利权)人：宜宾五粮液股份有限公司，
类型：发明
国别省市：