嵌合抗原受体制造技术

本发明专利技术的技术课题在于提供一种新型的嵌合抗原受体，该技术课题通过如下的嵌合抗原受体来解决，该嵌合抗原受体包括抗原结合性结构域、跨膜结构域、以及包含CD79A细胞内结构域和CD40细胞内结构域的细胞内信号结构域，并且，(A)上述抗原结合性结构域与上述跨膜结构域之间的构成氨基酸残基数为100以下；和/或(B)上述抗原结合性结构域的靶标抗原为CD19以外的抗原。抗原。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】嵌合抗原受体


[0001]本专利技术涉及嵌合抗原受体等。

技术介绍

[0002]嵌合抗原受体(Chimeric Antigen Receptor。以下也称为“CAR”)根据抗体的特异性，与抗原结合，由此，能够引起靶标细胞的损伤、细胞因子释放、刺激后的T细胞分裂。能够通过基因导入对T细胞赋预特异性。细胞的制备总体上比对内源性的肿瘤特异性T细胞受体(TCR)阳性T细胞进行培养扩增的情况容易。另外，关于利用CAR的治疗方法(CAR
‑
T疗法)，与抗体疗法相比显示更高的细胞伤害活性，由于以1次输注而利用抗原刺激进行自我扩增从而不需要多次治疗，从这些方面来讲是优异的。在TCR基因导入时，由于以HLA和在其上提呈的肽的复合体为靶标，所以仅在患者具有特定的HLA的情况下能够治疗(HLA限制性)，CAR在没有HLA限制性的方面更为有利。即，只要肿瘤细胞中靶标抗原为阳性，则能够以靶标抗原阳性的全部患者为对象进行治疗。
[0003]关于嵌合抗原受体基因导入T细胞(CAR
‑
T细胞)疗法，CD19CAR
‑
T在美国已经被批准作为药品。其临床效果高，对各种恶性肿瘤可以期待临床的有用性(例如，专利文献1)。
[0004]现有技术文献
[0005]专利文献
[0006]专利文献1：日本专利第5312721号公报

技术实现思路

[0007]专利技术所要解决的技术课题
[0008]本专利技术的技术课题在于提供一种新型的嵌合抗原受体。优选以提供癌症的预防或治疗效果更高的抗原受体为技术课题。
[0009]用于解决技术课题的技术方案
[0010]本专利技术的专利技术人对于上述技术课题深入进行了研究，结果发现适合采用包含CD79A细胞内结构域和CD40细胞内结构域的细胞内信号结构域。而且，进一步进行研究的结果，作为一个方案，发现了一种嵌合抗原受体能够解决上述技术课题，该嵌合抗原受体包括抗原结合性结构域、跨膜结构域、以及包含CD79A细胞内结构域和CD40细胞内结构域的细胞内信号结构域，并且，(A)上述抗原结合性结构域与上述跨膜结构域之间的构成氨基酸残基数为100以下；和/或(B)上述抗原结合性结构域的靶标抗原为CD19以外的抗原。基于该发现进一步进行研究，结果完成了本专利技术。即，本专利技术包括下述方案。
[0011]即，本专利技术包括下述方案。
[0012]项1.一种嵌合抗原受体，其包括：抗原结合性结构域、跨膜结构域、以及包含CD79A细胞内结构域和CD40细胞内结构域的细胞内信号结构域，并且，(A)上述抗原结合性结构域与上述跨膜结构域之间的构成氨基酸残基数为100以下；和/或(B)上述抗原结合性结构域的靶标抗原为CD19以外的抗原。
[0013]项2.如项1所述的嵌合抗原受体，其中，上述细胞内信号结构域包含细胞内活化结构域。
[0014]项3.如项2所述的嵌合抗原受体，其中，上述细胞内活化结构域为选自CD3ζ细胞内结构域和FcεRIγ细胞内结构域中的至少1种。
[0015]项4.如项2或3所述的嵌合抗原受体，其中，上述CD79A细胞内结构域、上述CD40细胞内结构域、和上述细胞内活化结构域从跨膜结构域侧起以该顺序配置。
[0016]项5.如项1～4中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，在上述抗原结合性结构域与上述跨膜结构域之间包含IgG的铰链部或其一部分。
[0017]项6.如项1～5中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，上述构成氨基酸残基数为1～30。
[0018]项7.如项1～6中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，上述抗原结合性结构域的结构为单链抗体结构。
[0019]项8.如项1～7中任一项所述的嵌合抗原受体，其中，上述抗原结合性结构域的靶标抗原为选自CD19、GD2、GD3、CD20、CD37、CEA、HER2、EGFR、III型突变EGFR(type III mutant EGFR)、CD38、BCMA、MUC
‑
1、PSMA、WT1、肿瘤睾丸抗原(cancer testis antigen)、突变肽(mutation peptide)、hTERT、PRAM、TYRP1、间皮素、PMEL、和粘蛋白中的至少1种。
[0020]项9.编码项1～8中任一项所述的抗原受体的多核苷酸。
[0021]项10.包含项9所述的多核苷酸的细胞。
[0022]项11.如项10所述的细胞，其为淋巴细胞。
[0023]项12.含有项10或11所述的细胞的医药组合物。
[0024]项13.如项12所述的医药组合物，其用于癌症的治疗、预防或改善。
[0025]专利技术的效果
[0026]根据本专利技术，能够提供一种新型的抗原受体。通过使用该抗原受体，能够有效地治疗或预防癌症。
附图说明
[0027]图1表示试验例1中制作的CAR构建体的一部分的结构示意图。
[0028]图2表示试验例3的生物发光成像的结果。纵轴表示发光强度(表示癌的扩散程度。)。横轴表示接种癌细胞后的经过天数。数据以平均值
±
SEM(双向ANOVA；*P＜0.05、**P＜0.01)的形式表示，从使用3个不同的供体(CD19CAR SH T细胞：每组n＝8；tEGFR
‑
T：n＝4)的3个独立实验算出。
[0029]图3表示试验例3的存活曲线。纵轴表示小鼠的存活率。横轴表示接种癌细胞后的经过天数。Wilcoxon检验；*P＜0.05、****P＜0.0001。
[0030]图4表示试验例4的生物发光成像的结果(短铰链的构建体的情况)。纵轴表示发光强度(表示癌的扩散的程度。)。横轴表示接种癌细胞后的经过天数。数据以平均值
±
SEM(双向ANOVA；*P＜0.05、**P＜0.01、***P＜0.001、****P＜0.0001)的形式表示，从使用3个不同供体(CD19CAR SH T细胞：每组n＝13；tEGFR
‑
T：n＝7)的3个独立实验算出。
[0031]图5表示试验例4的生物发光成像的结果(长铰链的构建体的情况)。纵轴表示发光强度(表示癌的扩散的程度。)。横轴表示接种癌细胞后的经过天数。数据以平均值
±
SEM(双
向ANOVA；***P＜0.001)的形式表示，从使用2个不同的供体(CD19CAR SH T细胞：每组n＝8；tEGFR
‑
T：n＝6)的2个独立实验算出。
[0032]图6表示试验例4的存活曲线(短铰链的构建体的情况)。纵轴表示小鼠的存活率。横轴表示接种癌细胞后的经过天数。
[0033]图7表示试验例4的存活曲线(长铰链的构建体的情况)。纵轴表示小鼠的存活率。横轴表示接种癌细胞后的经过天数。
[0034]图8表示试验例5的活细胞数测定结果。纵轴表示CD19CAR
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T细胞的活细胞数的相对值，横轴本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种嵌合抗原受体，其特征在于：包括：抗原结合性结构域、跨膜结构域、以及包含CD79A细胞内结构域和CD40细胞内结构域的细胞内信号结构域，并且(A)所述抗原结合性结构域与所述跨膜结构域之间的构成氨基酸残基数为100以下；和/或(B)所述抗原结合性结构域的靶标抗原为CD19以外的抗原。2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于：所述细胞内信号结构域包含细胞内活化结构域。3.如权利要求2所述的嵌合抗原受体，其特征在于：所述细胞内活化结构域为选自CD3ζ细胞内结构域和FcεRIγ细胞内结构域中的至少1种。4.如权利要求2或3所述的嵌合抗原受体，其特征在于：所述CD79A细胞内结构域、所述CD40细胞内结构域和所述细胞内活化结构域从跨膜结构域侧起以该顺序配置。5.如权利要求1～4中任一项所述的嵌合抗原受体，其特征在于：在所述抗原结合性结构域与所述跨膜结构域之间包含IgG的铰链部或其一部分。6.如权利要求1～5中任一项所述的嵌...

【专利技术属性】
技术研发人员：寺仓精太郎，J，
申请(专利权)人：国立大学法人东海国立大学机构，
类型：发明
国别省市：