一株用于防治犬脓皮病的乳酸乳球菌及其应用制造技术

技术编号:38614548 阅读:17 留言:0更新日期:2023-08-26 23:42
本发明专利技术属于益生菌筛选与应用技术领域,具体涉及一株新的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)及其应用。所提供的乳酸乳球菌分离自发酵乳样本,能有效的抑制假中间葡萄球菌的增殖,能有效预防和治疗犬脓皮病及其他假中间葡萄球菌引发的感染疾病,已于2022年8月19日保藏于中国武汉 武汉大学的中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:M20221308。M20221308。

【技术实现步骤摘要】
一株用于防治犬脓皮病的乳酸乳球菌及其应用


[0001]本专利技术属于益生菌筛选与应用
,具体涉及一株用于防治犬脓皮病的乳酸乳球菌及其应用。

技术介绍

[0002]在健康犬的皮肤上,本身存在一定数量的微生物,以细菌居多,所以称为正常菌群。依据细菌在皮肤和毛发上的增殖情况,又可将正常菌群分为常住菌群和暂住菌群。这些正常菌群,在犬出生7 天后就存在,相互制约,相互依存,在微观生态学上保持一种动态平衡关系,构成机体防御系统的一部分。大量研究表明,犬正常皮肤表面或毛囊菌群中定居的细菌有:微球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和阳性葡萄球菌,α溶血性链球菌、不动杆菌、产气荚膜梭菌、痤疮丙酸杆菌、伪中间型葡萄球菌(易在毛囊处找到 ) 。但任何内部或者外部的因素改变,如pH值、温度、盐度、湿度、白蛋白、脂肪酸等浓度的改变,均会打破正常菌群的平衡关系,导致某种菌的过度增殖,从而引发疾病。
[0003]犬脓皮病即是由该原因导致的犬类常见病之一。犬脓皮病是指犬皮肤感染化脓性细菌而引起的化脓性皮肤病,又称为细菌性皮肤病,或犬细菌性毛囊炎。该病若治疗得当,病情会很快痊愈;若治疗失当,则病情反复,久治不愈,极少情况甚至可致病原菌侵入血液循环,引起全身性感染,危及生命。而现代研究表明,假中间葡萄球菌为犬脓皮病的最主要致病菌。
[0004]假中间葡萄球菌(Staphylococcus pseudintermedius)又叫伪中间葡萄球菌,它是由Devriese等2005年发现并命名的新型葡萄球菌,是一种新的凝固酶阳性葡萄球菌,是一种常见的条件致病菌。广泛存在于动物皮肤、毛囊、皮毛、鼻咽部黏膜及肠道内,特别是皮肤粘膜部位,如口腔、鼻子、腹股沟、会阴部和肛门。当宿主的抵抗力降低,皮肤屏障被易感因素改变,从而引起动物机体一系列的机会性感染,导致胸腹部和四肢处感染,表现为皮下组织肿胀、化脓、破溃、皮肤结痂,严重者流出黄白色分泌物或散发腐臭味。除了皮肤感染,还会有外耳炎、尿路感染、术后感染、菌血症等其他感染。近年来,随着人们生活质量的提高,宠物的饲养率在不断提高,在犬的主人和兽医身上也发现了假中间葡萄球菌的定植,并相继出现假中间葡萄球菌感染人的报道。因此,假中间葡萄球菌作为一种潜在的重要动物传染性病原菌,将会对人类公共健康造成严重威胁。
[0005]目前对于假中间葡萄球菌感染的治疗常采取消毒剂与抗菌药联合应用的方法,该疗法虽然简单有效,却易导致致病菌消毒剂抗性与抗菌药耐药性的增强,且二者之间密切相关,存在共同耐药性。而随着抗生素在伴侣动物中的广泛使用,假中间葡萄球菌的耐药性已经不断增加,尤其是耐甲氧西林假中间葡萄球菌的出现和流行,已经超出兽医临床抗生素用药范围,引起了越来越多的关注。遏制动物源细菌耐药是人类控制细菌耐药的重要组成部分。针对目前细菌耐药性问题,包括抗菌肽、噬菌体、中草药、益生菌等抗菌剂或抗生素替代产品的研发逐步开展。其中,益生菌来源广泛、种属繁多、不会对宿主造成其他伤害,是安全、有效的抗生素替代品。因此,通过筛选有效抑制假中间葡萄球菌的益生菌株来防治假
中间葡萄球菌引发的感染疾病尤为重要。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一株乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)及其应用。该菌株分离自发酵乳样本,能有效的抑制假中间葡萄球菌的增殖,能有效预防和治疗犬脓皮病及其他假中间葡萄球菌引发的感染疾病。
[0007]本专利技术所提供的乳酸乳球菌,为乳酸乳球菌VHPribo V60(Lactococcus lactis VHPribo V60),已于2022年8月19日保藏于中国武汉 武汉大学的中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:M20221308。
[0008]所述乳酸乳球菌VHPribo V60株,其16s rDNA序列SEQ ID NO:1。
[0009]所述乳酸乳球菌VHPribo V60株,其MALDI

TOF核糖体蛋白分子量图谱如图2所示;其Riboprinter 指纹图谱如图3所示;其RAPD指纹图谱如图4所示;rep

PCR指纹图谱如图5所示。
[0010]本专利技术提供的乳酸乳球菌在制备具有抑制假中间葡萄球菌功能的制品中的应用。
[0011]本专利技术提供的乳酸乳球菌在制备用于防治犬脓皮病的制品中的应用。
[0012]本专利技术提供的乳酸乳球菌在制备用于治疗细菌性皮肤感染的制品中的应用。
[0013]所述的制品为功能性食品、保健品或药品。
[0014]一种治疗犬脓皮病的药品,包含乳酸乳球菌VHPribo V60株和/或其发酵产物。
[0015]一种治疗犬脓皮病的药品,包含乳酸乳球菌VHPribo V60株的裂解液。
[0016]本专利技术提供的乳酸乳球菌VHPribo V60耐酸耐胆盐特性良好,对人工肠胃液具有很强的耐受性,经人工胃液消化后活菌量基本没有变化,经过人工肠液消化后活菌量仅下降0.78个Log值。
[0017]所述乳酸乳球菌VHPribo V60可以有效的抑制假中间葡萄球菌的生长,其菌液和发酵液的抑菌圈直径分别达到1.68cm和1.54cm;且对假中间葡萄球菌有凝集作用,而其本身并无自凝集特性。
[0018]乳酸乳球菌VHProbi V60在动物皮肤微环境体外模拟体系中对假中间葡萄球菌的增殖生长有良好的抑制效果。与对照组相比,与乳酸乳球菌VHProbi V60共培养的实验组假中间葡萄球菌的活菌量显著下降;其中,共培养8h时,其活菌量仅有对照组的31%,共培养24h时,其活菌量仅有对照组的2%,效果非常显著。
[0019]乳酸乳球菌VHProbi V60可用于犬脓皮病的预防和治疗,能有效缩小皮损面积,改善红肿、化脓程度,效果显著。
[0020]本专利技术提供的乳酸乳球菌VHProbi V60,对机体无毒害作用,可以添加在食品或药品中,用于防治犬脓皮病,具有广阔的应用前景。
附图说明
[0021]图1为V60菌株菌落照片;图2为V60菌株MALDI

TOF核糖体蛋白峰图;图3为V60菌株Riboprinter 指纹图谱;图4为V60菌株的RAPD指纹图谱;
图5为V60菌株的rep

PCR指纹图谱;图6为V60菌株API50CHL碳源代谢图谱;图7为抑菌圈照片;图8为凝集实验结果对比;图9为假中间葡萄球菌生长趋势对比图;图10为细胞活性对比图;图11为患病犬治疗前后皮损面积对比图。
具体实施方式
[0022]本专利技术提供的乳酸乳球菌VHProbi V60符合法规要求,经多相分类学鉴定,乳酸乳球菌VHProbi V60为一株新发现的菌株。本专利技术提供的乳酸乳球菌VHProbi V60能够有效治疗和缓解犬脓皮病,单独使用该菌株且无需与抗生素复配即可对犬脓皮病有缓解功效;具有重要的应用价值。
[0023]申请人于2022年8月19日将所述乳酸乳球菌VHProbi V60保藏于中国武汉 武本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乳酸乳球菌,其特征在于,所述乳酸乳球菌的保藏号为CCTCC NO:M20221308。2.如权利要求1所述的乳酸乳球菌,其特征在于,所述乳酸乳球菌的16s rDNA序列如SEQ ID NO:1所示。3.如权利要求1所述的乳酸乳球菌,其特征在于,所述乳酸乳球菌的MALDI

TOF核糖体蛋白分子量图谱如图2所示;其Riboprinter 指纹图谱如图3所示;其RAPD指纹图谱如图4所示;rep

PCR指纹图谱如图5所示。4.权利要求1所述的乳...

【专利技术属性】
技术研发人员:段治步欣萍郭超群张景燕吴松洁崔洪昌
申请(专利权)人:青岛蔚蓝生物股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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