一种甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记及其引物对和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记及其引物对和应用。本发明专利技术通过图位克隆测方法将油菜低温雄性不育位点Bnlst1定位在A07染色体上，位于BnInDel06和BnInDel24之间，该位点与BnInDel12、BnInDel18、BnInDel20和BnInDel23共分离。甘蓝型油菜低温雄性不育性状与这四个分子标记呈共分离，单株基因型和表型一致，因此这四个分子标记在油菜低温雄性不育系辅助选择育种中具有巨大的应用前景，其可以有效快速，在油菜苗期筛选出低温雄性不育材料，区分可育材料，提高选择效率，还可以在分离世代提高选择的准确性，另外可以减少在开花期剔除可育、不育制种的工作量。种的工作量。种的工作量。

【技术实现步骤摘要】
一种甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记及其引物对和应用


[0001]本专利技术涉及植物育种领域，具体涉及一种甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记及其引物对和应用

技术介绍

[0002]油菜是主要油料作物之一，杂种优势利用对油菜产业的发展具有重要的推动作用。很好的利用作物的杂种优势可以明显提高作物的产量，改善作物品质，有效提升育种效率，缓解作物品质、产量、抗性间的矛盾。杂交油菜应用的大范围推广，对于促进油菜产业未来良好发展具有重要作用。
[0003]生态型雄性不育是油菜杂种优势利用的重要授粉控制系统之一。生态型雄性不育系以此独特的优势受到植物育种者的亲睐与重视。其中，温敏型雄性不育系指生态型雄性不育系材料的育性以受温度影响为主而光照长度对其影响不大，可分为高温不育类型和低温不育类型。生态型雄性不育系一般表现为低温可育高温不育，也有一些低温不育、高温可育的雄性不育系，即反型温敏不育型。如雄性不育系533S在日均温低于23℃时表现不育，日均温26℃时表现可育，为低温不育、高温可育类型。Huiyou50S低温不育、高温可育，其育性转换的临近温度为昼22℃/夜12℃。
[0004]为了更好的利用杂种优势，有必要对植物低温雄性不育系不育基因进行基因定位、基因克隆及功能研究，明确其败育机理。油菜低温雄性不育系材料甚少，对于调控油菜低温雄性不育性状的分子基础还鲜有报道。需要继续开发控制油菜低温雄性不育性状的新位点及其分子标记，为油菜杂种优势利用提供基础。开发油菜低温雄性不育新位点的紧密连锁分子标记，可以在油菜苗期筛选低温雄性不育基因型，提高选择效率，还可以在分离世代提高选择的准确性。因此，油菜低温雄性不育位点的紧密连锁的分子标记开发和应用是油菜杂种优势利用的关键技术。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：针对现有技术存在的问题，本专利技术一种甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记，其可以有效快速，在油菜苗期筛选出低温雄性不育材料，区分可育材料，提高选择效率，还可以在分离世代提高选择的准确性。另外，可以减少在开花期剔除可育、不育制种的工作量；丰富现有技术中油菜低温雄性不育系的种质资源，提供与油菜低温雄性不育性状共分离的分子标记。
[0006]本专利技术还提供位于甘蓝型油菜A07染色体上控制油菜低温雄性不育性状的新位点。
[0007]本专利技术的另一目的是提供甘蓝型油菜低温雄性不育性状新基因位点的分子标记BnInDel12、BnInDel18、BnInDel20和BnInDel23引物对。
[0008]本专利技术的又一个目的是提供甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记
BnInDel12、BnInDel18、BnInDel20和BnInDel23或其引物对在检测所述的低温雄性不育油菜及选育油菜低温雄性不育系中的应用。
[0009]技术方案：为了实现上述目的，本专利技术所述一种甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记，所述分子标记包括BnInDel12、BnInDel18、BnInDel20和BnInDel23中的任意一种或者多种，其序列分别如SEQ ID NO.1
‑
4所示。
[0010]其中，所述的分子标记分别是与油菜低温雄性不育位点Bnlts1共分离的BnInDel12、BnInDel18、BnInDel20和BnInDel23。所述分子标记BnInDel12、BnInDel18、BnInDel20和BnInDel23位于甘蓝型油菜A07染色体上，紧密连锁标记BnInDel12位于甘蓝型油菜A07染色体上27623091bp
‑
27623316bp，其序列如SEQ ID NO.1所示；紧密连锁标记BnInDel18位于甘蓝型油菜A07染色体上27959625bp
‑
27959830bp，其序列如SEQ ID NO.2所示；紧密连锁标记BnInDel20位于甘蓝型油菜A07染色体上28045463bp
‑
28045664bp，其序列如SEQ ID NO.3所示；紧密连锁标记BnInDel23位于甘蓝型油菜A07染色体上28128007bp
‑
28128207bp，其序列如SEQ ID NO.4所示。
[0011]本专利技术用于扩增和检测所述的甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记的引物对，所述引物对包括Seq InDel12
‑
F和Seq InDel12
‑
R、Seq InDel18
‑
F和Seq InDel18
‑
R、Seq InDel20
‑
F和Seq InDel20
‑
R、Seq InDel23
‑
F和Seq InDel23
‑
R中任意一对或者多对，其中：
[0012]Seq InDel12
‑
F的序列如SEQ ID NO.5所示；
[0013]Seq InDel12
‑
R的序列如SEQ ID NO.6所示；
[0014]Seq InDel18
‑
F的序列如SEQ ID NO.7所示；
[0015]Seq InDel18
‑
R的序列如SEQ ID NO.8所示；
[0016]Seq InDel20
‑
F的序列如SEQ ID NO.9所示；
[0017]Seq InDel20
‑
R的序列如SEQ ID NO.10所示；
[0018]Seq InDel23
‑
F的序列如SEQ ID NO.11所示；
[0019]Seq InDel23
‑
R的序列如SEQ ID NO.12所示。
[0020]其序列为：
[0021]Seq InDel12
‑
F：CGATAAACGATTTTGCCATT(5
’‑3’
)
[0022]Seq InDel12
‑
R：AAACAGAGGAGCCGAAGG(5
’‑3’
)
[0023]Seq InDel18
‑
F：AAGAAGTGAAGGAGTTTT(5
’‑3’
)
[0024]Seq InDel18
‑
R：AATCTAGGGTTTAAGCAG(5
’‑3’
)
[0025]Seq InDel20
‑
F：CTCTTTTCCTAATTCCAT(5
’‑3’
)
[0026]Seq InDel20
‑
R：AGGATAAACGTGTATTCT(5
’‑3’
)
[0027]Seq InDel23
‑
F：TAAAGAATCGAGTAAAAGAG(5
’‑3’
)<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记，其特征在于，所述分子标记包括BnInDel12、BnInDel18、BnInDel20和BnInDel23中的任意一种或者多种，其序列分别如SEQ ID NO.1
‑
4所示。2.一种用于扩增和检测权利要求1所述的甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记的引物对，其特征在于，所述引物对优选包括Seq InDel12
‑
F和Seq InDel12
‑
R、Seq InDel18
‑
F和Seq InDel18
‑
R、Seq InDel20
‑
F和Seq InDel20
‑
R、Seq InDel23
‑
F和Seq InDel23
‑
R中任意一对或者多对，其中：Seq InDel12
‑
F的序列如SEQ ID NO.5所示；Seq InDel12
‑
R的序列如SEQ ID NO.6所示；Seq InDel18
‑
F的序列如SEQ ID NO.7所示；Seq InDel18
‑
R的序列如SEQ ID NO.8所示；Seq InDel20
‑
F的序列如SEQ ID NO.9所示；Seq InDel20
‑
R的序列如SEQ ID NO.10所示；Seq InDel23
‑
F的序列如SEQ ID NO.11所示；Seq InDel23
‑
R的序列如SEQ ID NO.12所示。3.一种控制甘蓝型油菜低温雄性不育位点，其特征在于，所述控制甘蓝型油菜低温雄性不育位点为Bnlst1，由权利要求1所述的述分子标记BnInDel12、BnInDel18、BnInDel20和BnInDel23与油菜低温雄性不育位点紧密连锁的分子标记BnInDel06和BnInDel24，将所述控制甘蓝型油菜低温雄性不育位点Bnlst1，定位于甘蓝型油菜A07染色体上Bna A07_27452837bp
‑
28262531bp，位于分子标记BnInDel06和BnInDel24之间的809.41kb区间内；所述分子标记BnInDel06和BnInDel24的序列分别如SEQ ID NO.13和16所示。4.一种权利要求1所述的甘蓝型油菜低温雄性不育位点的分子标记的筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)甘蓝型油菜低温雄性不育位点的获得：利用低温雄性不育材料7613S与其姊妹系进行杂交，得到杂种F1，F1与低温雄性不育材料7613S进行回交，得到BC1群体，选择BC1群体中的若干株低温雄性不育单株和若干株低温可育单株，进行BSA测序分析，低温雄性不育位点被定位在A07：27432829bp
‑
29445255bp区间内，共包含8496个SNPs和2459个InDels；(2)甘蓝型油菜矮杆位点紧密分子标记的获得：利用BSA混合分组分析法将低温雄性不育位点定位在油菜A07染色体上的A0...

【专利技术属性】
技术研发人员：管荣展，杨茂，曹丽芳，陈俊，江小美，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：