本发明专利技术提供一种胶原／壳聚糖三维立体网络人工角膜支架的制备方法包括以醋酸溶液为溶剂，胶原、壳聚糖为溶质配制胶原／壳聚糖共混液，并加入１－乙基－３－（３－二甲基氨丙基）碳二亚胺和Ｎ－羟基琥珀酰亚胺混合交联剂，混合后再加入壳聚糖交联剂，最后除气泡后注入模型，再置于超低温冰箱中冷冻接着转入冷冻干燥机中冷冻干燥即得到胶原／壳聚糖三维立体网络人工角膜支架。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及人工角膜材料
，具体是指一种胶原/壳聚糖三维立体 网络人工角膜支架及其制备方法。
技术介绍
角膜病是仅次于白内障的第二大致盲眼病，角膜移植是目前治疗角膜盲 的有效方法，但是面临着角膜供体严重缺乏、术后发生免疫排斥反应和医源性 散光等问题。随着组织工程技术的发展和进步，组织工程角膜将为角膜病的治 疗开辟新的途径，构建组织工程角膜替代部分或全层受损角膜的核心是建立 细胞与生物材料的三维立体空间复合体，理想的支架材料一直是制约组织工 程角膜发展的瓶颈问题.胶原、壳聚糖由于其良好的生物相容性等特点而广泛应用于组织工程支 架材料。胶原纤维是天然角膜基质层的主要组成成分，胶原蛋白占角膜干重的 75%。胶原无抗原性，组织相容性好，含有某些特异的氨基酸序列，有利于种子 细胞的黏附与生长，胶原的不足之处在于稳定性较差，机械强度小，降解快。 而壳聚糖缺乏键合生物活性，脆性大，且降解慢、亲水性差。因而，改进胶 原和壳聚糖本身的一些缺点也是胶原和壳聚糖基体复合支架需要解决的问 题，而将胶原和壳聚糖共混物同时作为复合支架的基体或者将两者形成新的 结构，则有望在一定程度上改善单纯胶原或壳聚糖做基体时力学强度的问题， 同时获得合适的降解速度。近年来，三维立体网络支架发展十分迅速，有望 很好地解决上述问题。三维立体网络支架是用化学方法将两种以上的聚合物 互相贯穿成交织网络状的一类新型复相聚合物材料，是聚合物共混改性技术 发展的新领域，为制造特殊性能的材料开拓了崭新的途径，目前三维立体网 络技术用于胶原/壳聚糖人工角膜组织工程支架的制备没有先例，如果能成功 应用该技术，将实现在胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜组织工程支架中实 现支架材料的稳定性、力学性能的改善，也有望从结构和功能上实现复相聚 合物的有效复合。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足，通过利用三维立体网络技 术将胶原和壳聚糖两种聚合物互相贯穿成交织网络状的新型复相聚合物支 架，从而研发出一种胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜支架并给出其制备方 法。为解决上述问题，本专利技术采用以下技术方案一种胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜支架的制备方法，包括以下步骤a. 以质量百分比浓度为2%的醋酸溶液为溶剂胶原为溶质配制3mg/ml 10mg/ral的胶原溶液；b. 按壳聚糖胶原溶质的质量比为O. 1 9 : 1的比例将壳聚糖加入到上述a的胶原溶液中，用高速分散机充分混合后得到胶原/壳聚糖的共混液；c. 在上述b的胶原/壳聚糖的共混液中加入混合交联剂，所加混合交联 剂在共混液中的质量浓度为0.01 1%，所述混合交联剂是指l一乙基一3 —(3 — 二甲基氨丙基)碳二亚胺和N—羟基琥珀酰亚胺在常温下搅拌交联至少 12h的混合溶液，其中l一乙基一3— (3 —二甲基氨丙基)碳二亚胺(EDC) 与N—羟基琥珀酰亚胺(NHS)的质量比为1 4 : 1;d. 在上述c最终所得的混合液中再加入壳聚糖交联剂，所加壳聚糖交联 剂在共混液中的质量浓度为0.01 1%，并在常温下搅拌交联至少12h;e. 将上述d最终所得的混合液减压、除气泡后注入模型，再置于超低温 冰箱中冷冻至少24小时，接着转入冷冻干燥机中冷冻干燥至少24小时，即 得到胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜支架。所述壳聚糖交联剂为戊二醛、聚乙二醇双縮水甘油醚、聚丙三醇三縮水 甘油醚。本专利技术与现有技术相比较有如下突出的优点1、 本专利技术首次将三维立体网络的制备技术成功应用到胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜支架的制备中，通过交联剂的桥梁作用，使得胶原、壳聚糖2种聚合物在立体网络基体中分散良好且与互相形成有效、稳定的键合。2、 由于三维立体网络是用化学方法将两种以上的聚合物互相贯穿成交织 网络状的一类新型复相聚合物材料，因而本专利技术制备的胶原/壳聚糖三维立体网络角膜支架解决了胶原及壳聚糖复合支架力学性能不佳的问题，同时获得 了合适的降解速度。3.本专利技术制备工艺简单，操作简捷，易于推广应用。具体实施例方式下面结合实施例，对本专利技术作进一步地详细说明，但实施方式并不仅限 于此。实施例1:(1) 用质量百分比浓度为2%的醋酸溶液配制3mg/ml的胶原溶液5ooml;(2) 按壳聚糖:胶原溶质的质量比为0.1:1的比例将壳聚糖加入到上述 (1)的胶原溶液中，采用高速分散机以100转/分的速度充分混合后得到胶原/壳聚糖的共混液；(3) 在上述(2)的胶原/壳聚糖的共混液中加入按质量百分比计总含量 为0.01%的混合交联剂，在常温下搅拌交联12h，混合交联剂中1一乙基一3 一 (3 — 二甲基氨丙基)碳二亚胺(EDC)与N—羟基琥珀酰亚胺(NHS)的质 量比为1:1;(4) 在上述(3)经EDC+NHS交联的胶原/壳聚糖的混合液中再加入按质 量百分比计含量为0. 01%的戊二醛溶液并在常温下搅拌交联12h;(5) 将上述(4)最终所得的胶原/壳聚糖的混合液减压、除气泡后注入 模型，再置于-5C的超低温冰箱中冷冻24小时，接着转入冷冻干燥机中冷冻 干燥24小时，即得到胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜支架。实施例2(1) 用质量百分比浓度为2%的醋酸溶液配制4mg/ml的胶原溶液500ml;(2) 按壳聚糖:胶原溶质的质量比为0. 25:1的比例将壳聚糖加入到上述 (1)的胶原溶液中，采用高速分散机以1000转/分的速度充分混合后得到胶原/壳聚糖的共混液；(3) 在上述(2)的胶原/壳聚糖的混合液中加入按质量百分比计总含量 为0.05%的混合交联剂，在常温下搅拌交联12h，混合交联剂中1一乙基一3 一 (3 — 二甲基氨丙基)碳二亚胺(EDC)与N—羟基琥珀酰亚胺(NHS)的质量比为2:1;(4) 在上述(3)经EDC+NHS交联的胶原/壳聚糖的混合液中再加入按质 量百分比计含量为0.05%的聚乙二醇双縮水甘油醚并在常温下搅拌交联 12h;(5) 将上述(4)最终所得的胶原/壳聚糖的混合液减压、除气泡后注入 模型，再置于-l(TC的超低温冰箱中冷冻24小时，接着转入冷冻干燥机中冷 冻干燥36小时，即得到胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜支架；实施例3(1) 用质量百分比浓度为2%的醋酸溶液配制5mg/ml的胶原溶液500ml;(2) 按壳聚糖:胶原溶质的质量比为0. 65:1的比例将壳聚糖加入到上述 (1)的胶原溶液中，采用高速分散机以2000转/分的速度充分混合后得到胶原/壳聚糖的共混液；(3) 在上述(2)的胶原/壳聚糖的混合液中加入按质量百分比计总含量 为0. 1%的混合交联剂，在常温下搅拌交联12h，混合交联剂中l一乙基一3 一 (3 — 二甲基氨丙基)碳二亚胺(EDC)与N—羟基琥珀酰亚胺(NHS)的质 量比为4:1;(4) 在上述(3)经EDC+NHS交联的胶原/壳聚糖的混合液中再加入按质 量百分比计含量为0. 1%的聚乙二醇双縮水甘油醚并在常温下搅拌交联12h;(5) 将上述(4)最终所得的胶原/壳聚糖的混合液减压、除气泡后注入 模型，再置于-2(TC的超低温冰箱中冷冻24小时，接着转入冷冻干燥机中冷 冻干燥48小时，即得到胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜支架；实施例4(1) 用质量百分比浓度为2%的醋酸溶液配制7本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种胶原／壳聚糖三维立体网络人工角膜支架的制备方法，包括以下步骤： ａ．以质量百分比浓度为２％的醋酸溶液为溶剂、胶原为溶质配制３ｍｇ／ｍｌ～１０ｍｇ／ｍｌ的胶原溶液； ｂ．按壳聚糖∶胶原溶质的质量比为０．１～９∶１的比例将壳聚糖 加入到上述ａ的胶原溶液中，用高速分散机充分混合后得到胶原／壳聚糖的共混液； ｃ．在上述ｂ的胶原／壳聚糖的共混液中加入混合交联剂，所加混合交联剂在共混液中的质量浓度为０．０１～１％，所述混合交联剂是指１－乙基－３－（３－二甲基氨丙基）碳 二亚胺和Ｎ－羟基琥珀酰亚胺在常温下搅拌交联至少１２ｈ的混合溶液，其中１－乙基－３－（３－二甲基氨丙基）碳二亚胺与Ｎ－羟基琥珀酰亚胺的质量比为１～４∶１； ｄ．在上述ｃ最终所得的混合液中再加入壳聚糖交联剂，所加壳聚糖交联剂在共混液中的质 量浓度为０．０１～１％，并在常温下搅拌交联至少１２ｈ； ｅ．将上述ｄ最终所得的混合液减压、除气泡后注入模型，再置于超低温冰箱中冷冻至少２４小时，接着转入冷冻干燥机中冷冻干燥至少２４小时，即得到胶原／壳聚糖三维立体网络人工角膜支架。
【技术特征摘要】
1.一种胶原/壳聚糖三维立体网络人工角膜支架的制备方法，包括以下步骤a.以质量百分比浓度为2％的醋酸溶液为溶剂、胶原为溶质配制3mg/ml～10mg/ml的胶原溶液；b.按壳聚糖∶胶原溶质的质量比为0.1～9∶1的比例将壳聚糖加入到上述a的胶原溶液中，用高速分散机充分混合后得到胶原/壳聚糖的共混液；c.在上述b的胶原/壳聚糖的共混液中加入混合交联剂，所加混合交联剂在共混液中的质量浓度为0.01～1％，所述混合交联剂是指1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺在常温下搅拌交联至少12h的混合溶液，其中1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺与N-羟基琥珀酰亚...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈浩，瞿佳，
申请(专利权)人：温州医学院眼视光研究院，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。