一种性早熟动物模型的构建方法技术

本发明专利技术属于动物模型构建技术领域，具体涉及一种性早熟动物模型的构建方法。该构建方法包括：使用高脂和/或高糖饮食饲喂幼龄动物直至性成熟。该构建方法可以降低动物的降低了动物幼崽阴道开口年龄，加速了阴道细胞周期；而且可提高动物幼崽子宫和卵巢的重量，促进了生殖器官的发育，建模周期短，并且安全简单。并且安全简单。并且安全简单。

【技术实现步骤摘要】
一种性早熟动物模型的构建方法


[0001]本专利技术属于动物模型构建
，具体涉及一种性早熟动物模型的构建方法。

技术介绍

[0002]动物模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(包括新药筛选)研究。性早熟动物模型是其中一种重要的模型之一。
[0003]现目前动物模型有达那唑诱导大鼠性早熟模型，该模型所具有的独特优点是：模型容易建立而且稳定，造模周期短，性周期和正常青春期动物性周期完全一致；缺点是：至阴门开启之日发情间期持续时间较其它药物诱导的性早熟模型长，不利于模型组和实验组之间各项指标的比较和把握；还有N一甲基一DL一天冬氨酸(NMA)诱导大鼠性早熟模型，利用这种方法制作的大鼠真性性早熟模型为进一步研究儿童性早熟提供了一种简便有效的实验手段，克服了达那唑诱导性早熟模型的一些不足之处，提前出现的性发育特征与正常青春启动的变化完全相同；但是在发育早期开始的NMA注射对早熟有显著影响，但对同步性影响很小，甚至没有；还有瘦素(1eptin)诱导大鼠性早熟模型，leptin可能是人类青春发育启动的允许因子(但并不是唯一的青春启动刺激因子)。当leptin作为一种外源性刺激作用于青春期前的动物，可能使HPGA功能提前发动，从而模拟人类ICPP主要病理生理变化；瘦素作用于生殖中枢，启动性腺轴，从而启动第二性征发育的，模型建立成功后容易复制，但是其造模成功率低；另外，还有双酚A诱导建立的性早熟大鼠模型，大于400mg/kg的剂量虽然能使阴道121提前开放，但能显著延长其发情间期，降低动物体重，而且有一定的毒性。
[0004]综上，现有的性早熟动物模型或者构建方法存在建模周期长，具有毒性或操作复杂等缺陷。因此，研发一种建模周期短，简单且安全的性早熟动物模型的构建方法是有必要的。

技术实现思路

[0005]针对以上问题，本专利技术目的在于提供一种性早熟动物模型的构建方法，该方法是通过高脂和/或高糖饮食饲喂得到的性早熟动物模型，该构建方法动物性成熟周期短，且构建的性早熟动物模型相关指标均达到成熟动物的指标，并且安全简单。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术可以采用以下技术方案：
[0007]本专利技术一方面提供一种性早熟动物模型的构建方法，其包括：使用高脂和/或高糖饮食饲喂幼龄动物直至性成熟。
[0008]进一步地，上述性早熟动物模型的构建方法中，幼龄动物可以选择断奶后动物。
[0009]进一步地，上述性早熟动物模型的构建方法中，幼龄可以动物选择2
‑
4周龄动物。
[0010]进一步地，上述性早熟动物模型的构建方法中，饲养环境可以为：在12小时的暗/光循环下，可以自由饮水。
[0011]进一步地，上述性早熟动物模型的构建方法中，幼龄动物可以为老鼠。
[0012]进一步地，上述性早熟动物模型的构建方法中，幼龄动物可以为雌性。
[0013]本专利技术有益效果包括：本专利技术提供的性早熟动物模型的构建方法可以降低动物的降低了动物幼崽阴道开口年龄，加速了阴道细胞周期；而且可提高动物幼崽子宫和卵巢的重量，促进了生殖器官的发育，即建模周期短；并且安全简单。
附图说明
[0014]图1为各组大鼠体重变化；
[0015]图2为各组大鼠阴道脱落细胞涂片观察，其中，a：发情前期对照组；b：发情期高糖组；c：发情期高脂组；d发情后期高糖高脂组；
[0016]图3为各组大鼠卵巢重量；
[0017]图4为各组大鼠卵巢系数；
[0018]图5为各组大鼠子宫重量；
[0019]图6为各组大鼠子宫系数；
[0020]图7为各组大鼠卵巢HE病理观察；
[0021]图8为各组大鼠子宫HE病理观察；
[0022]图9为各组大鼠初级卵泡计数；
[0023]图10为各组大鼠生长卵泡计数；
[0024]图11为各组大鼠成熟卵泡计数；
[0025]图12为各组大鼠总卵泡数量计数；
[0026]图13为各组大鼠黄体计数；
[0027]图14为各组大鼠血清中黄体生成素(LH)含量水平；
[0028]图15为各组大鼠血清中雌二醇(E2)含量水平；
[0029]图16为各组大鼠血清中促卵泡素(FSH)含量水平；
[0030]图17为各组大鼠血清中GnRH含量水平；
[0031]图18为各组大鼠下丘脑中GnRH的mRNA表达水平；
[0032]图19为各组大鼠下丘脑中kiss
‑
1的mRNA表达水平；
[0033]图20为各组大鼠下丘脑中GPR54的mRNA表达水平。
具体实施方式
[0034]所举实施例是为了更好地对本专利技术进行说明，但并不是本专利技术的内容仅局限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述
技术实现思路
对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本专利技术的保护范围。
[0035]本文中使用的术语仅用于描述特定实施例，并且无意于限制本公开。除非在上下文中具有明显不同的含义，否则单数形式的表达包括复数形式的表达。如本文所使用的，应当理解，诸如“包括”、“具有”、“包含”之类的术语旨在指示特征、数字、操作、组件、零件、元件、材料或组合的存在。在说明书中公开了本专利技术的术语，并且不旨在排除可能存在或可以添加一个或多个其他特征、数字、操作、组件、部件、元件、材料或其组合的可能性。如在此使用的，根据情况，“/”可以被解释为“和”或“或”。
[0036]本专利技术实施例提供一种性早熟动物模型的构建方法，其包括：使用高脂和/或高糖饮食饲喂幼龄动物直至性成熟。
[0037]需要说明的是，肥胖和性早熟之间的机制仍然很大程度上未知，但很明显，脂肪因子和瘦素水平的增加与性早熟有关，即胰岛素抵抗性肾上腺雄激素分泌增加导致脂肪组织芳香化酶活性，从而雄激素在周围转化为雌激素，最终影响性成熟。一项研究表明，出生后超重的大鼠青春期提前是由于下丘脑神经酰胺含量增加，它激活了青春期信号kisspeptin。一项研究发现，超重患者和中枢性性早熟患者的一氧化氮(NO)合成水平较高，而一氧化氮作为一种重要的气体神经递质，升高不仅会加速促性腺激素释放激素的产生，从而导致青春期的调节，还会增强宿主的胰岛素抵抗，导致肥胖。然而，肥胖与性早熟关系的深层机制还有待进一步研究。
[0038]另外，在儿童肥胖的许多并发症中，青春期年龄的变化，主要是女孩的性早熟，具有越来越多的潜在长期健康后果。研究发现，青春期时间的改变会对人体的身体发育和心理成熟产生有害影响，甚至会降低总体预期寿命。尽管越来越多的研究提出了营养不良导致青春期推迟的机制，但营养过剩导致的肥胖对青春期的影响已经得到了很好的证实。
[0039]再者，青春期由表观遗传机制调节，对代谢和营养线索高度敏感。然而，调节营养和肥胖对青春期时间影响的表观遗传途径尚不清楚。sirtuin1(SIRT1)是一种燃料感应脱乙酰酶，是一种通过表观遗传抑制青春期激活基因Kiss1来抑制女性青春期的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种性早熟动物模型的构建方法，其特征在于，包括：使用高脂和/或高糖饮食饲喂幼龄动物直至性成熟。2.根据权利要求1所述的性早熟动物模型的构建方法，其特征在于，幼龄动物选择断奶后动物。3.根据权利要求1所述的性早熟动物模型的构建方法，其特征在于，幼龄动物选择2
‑
4周龄动物。4.根据权利要求1、2或3所述的性早熟动物模型的构建方法，其特征在于，饲养环境为：在12小时的暗/光循环下，可以自由饮水。5....

【专利技术属性】
技术研发人员：黄晓燕，何小解，陈积雄，莫少伟，罗海伶，李海丹，
申请(专利权)人：海南省妇女儿童医学中心海南省妇幼保健院，海南省儿童医院，海南省妇产科医院，
类型：发明
国别省市：