大麻植物来源的细胞外囊泡及使用其的治疗方法技术

公开了一种使用植物细胞外囊泡(EV)作为载体将治疗分子递送到CNS的方法和组合物。证明了植物EV是比通过其他方法的递送更有效的载体。这些载体可用于治疗中枢神经系统疾病，例如癌症、损伤(例如TBI)、退行性病变(例如阿尔茨海默病和衰老)以及认知障碍(例如PTSD、抑郁症和焦虑症)。包括使用大麻来源的EV治疗大脑中的癌症和影响大脑中的前体细胞及分离EV的新数据。此外，公开了使用EV时对鼻内递送和口服递送效果的改进。口服递送效果的改进。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】大麻植物来源的细胞外囊泡及使用其的治疗方法

技术介绍

[0001]由于其治疗不同疾病，如疼痛、癫痫、癌症化疗相关症状(例如恶心和呕吐)并且也由于其通过诱导肿瘤细胞中的细胞死亡的直接抗癌作用，长期使用大麻素。广泛使用的主要大麻素是δ9
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四氢大麻酚(THC)和大麻二酚(CBD)。这些大麻素从含有不同比例粗酸性形式的不同大麻素的不同大麻植物品种提取、纯化和脱羧。虽然已经使用脱羧的大麻素进行了许多研究，但科学界已经开始认识到酸性形式的大麻素的治疗作用，例如大麻二酚酸(CBD
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A)的抗肿瘤活性和四氢大麻酚酸(THC
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A)的神经保护作用。
[0002]大麻素在治疗应用中不仅受到所使用的大麻素类型的限制，还受到其递送方法的限制；口服、口腔粘膜、经皮和瘤内施用，每种都有其独特的优点和缺点。对于在中枢神经系统中进行治疗，特别是对于脑肿瘤，为了达到治疗浓度(在脑肿瘤床中)，患者需要每天口服相对大剂量的大麻素。这具有挑战性，原因有几个：1
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如果口服大麻素，则其经历广泛的肝脏首过代谢，这降低其血浆浓度，并且施用THC时增加精神活性代谢产物11
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羟基THC。2
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由于大麻素的亲脂性，口服给药导致在体内全身分布，并且从长远来看其在血管丰富且多脂肪的器官中累积。3
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全身分布和累积对心血管、肾和肝功能有不良影响，特别是在患有基础疾病的老年人中。此外，为了避免THC的精神活性作用而施用低剂量可能导致肿瘤床中次优的浓度，这可能增加肿瘤增殖。为了避免CNS肿瘤治疗中的这些问题，大麻素可以肿瘤内递送，其是侵入性的和创伤性的。此外，尽管在后一种方法中向肿瘤核心递送高浓度的大麻素，但足够的量可能无法到达远离输注部位的肿瘤位置，这进而可能导致差的治疗结果。
附图说明
[0003]在附图的各图中以示例而非限制的方式说明实施例。
[0004]以下附图仅是说明性的而非限制性的。
[0005]图1示出了大麻EV的表征：A)由NTA确定的EV尺寸分布。B)大麻EV的TEM图。C)基于LC
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MS/MS分析的大麻EV的主要大麻素含量。
[0006]图2示出了用游离SYTOTM RNASelectTM染料染色的肿瘤细胞(人GBM L0)(A)vs孵育3小时后吸收SYTOTM RNASelectTM染色的大麻EV(B)。
[0007]图3示出了大麻EV对A)小鼠KR158vs(B)人L0 GBM系的体外抗增殖[不同浓度，7天]作用，以及(C)大麻NP对培养中的人L0 GBM系的抗迁移[1μM，24小时]作用。*P<0.05，**P＝0.001，****P<0.0001。
[0008]图4示出了SYTOTM RNASelectTM染色的大麻NP鼻内递送到小鼠大脑中。1和2分别示出了大麻NP在冠状脑切片的肿瘤[1]vs非肿瘤[2]区域中的分布。
[0009]图5示出了对照(A)vs大麻NP治疗(B)小鼠大脑中的小胶质细胞Iba
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1免疫染色。大麻NP治疗改变了大脑中小胶质细胞的形态和密度。
[0010]图6示出了大麻NP治疗对携带KR158神经胶质瘤的小鼠存活率的影响。大麻NP治疗增加了中位生存期(对数秩检验，**P＝0.0016，31天[对照]vs 42天[大麻NP])。
[0011]图7示出了大麻NP治疗导致脑组织中大量CBD
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A和CBG
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A累积。
[0012]图8示出了大麻NP治疗导致脑肿瘤组织中大量CBD
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A和CBG
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A累积。
[0013]图9示出了植物来源的细胞外囊泡[EV]将鼻内递送提高了5倍。
[0014]图10示出了植物来源的细胞外囊泡[EV]改善了药物向中枢神经系统的口服递送。
[0015]图11示出了植物来源的EV如何在TBI模型中减少炎症。
[0016]图12示出了TBI后EV治疗的动物中IBA
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1表达水平降低。
[0017]图13示出了植物EV如何靶向胶质瘤祖细胞和胶质瘤干细胞。
[0018]图14示出了大麻EV不同地调节神经干细胞[NSC]和祖细胞增殖。
[0019]详细说明
[0020]虽然调节药物制剂中每种成分大麻素、如THC的总量可以提高这些抗神经胶质瘤化合物的广度和有效性，但大麻素的纳米包装、使用酸性大麻素和利用靶向、局部和非侵入性CNS递送方法、如鼻内途径是用于癌症和其他CNS疾病的有吸引力的转化方法。这些策略降低了大麻素的总给药剂量及其不希望的副作用，同时保持或甚至增强了大麻素对CNS疾病的作用和抗肿瘤功效。
[0021]在一实施例中，提供了一种治疗受试者脑癌的方法，包括向受试者施用含一种或多种大麻素的植物细胞外囊泡(PEV)(CPEV)，其中CPEV递送到受试者的大脑。例如，此处所述的方法可用于治疗胶质母细胞瘤。在某些方面，通过鼻内或替代地肠胃外施用PEV治疗脑癌。将CPEV递送至大脑可导致高于其他施用方式(例如血管内或口服施用)造成的血清浓度的大脑浓度，从而允许待使用的含大麻素的CPEV剂量对治疗脑癌是有效的，同时不会引起通常与在受试者中大麻素施用相关的上述副作用。
[0022]在第二实施例中，提供了一种通过向受试者的中枢神经系统施用治疗有效量的CPEV治疗神经退行性疾病的方法。用在此所述的组合物可治疗的CNS的神经退行性疾病的示例包括但不限于阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、运动神经元病、脊髓小脑性共济失调和脊髓性肌萎缩中的一种或多种。
[0023]在第三实施例中，提供了一种通过施用治疗有效量的在此所述的CPEV治疗受试者中CNS损伤的方法。通过在此公开的方法的CNS损伤的示例包括但不限于中风、创伤性脑损伤、脑震荡、脊髓损伤等。
[0024]在第四实施例中，提供了一种通过施用治疗有剂量的在此公开的CPEV减少受试者的CNS中炎症病症的方法。通过在此所述的组合物可治疗的炎症病症的示例包括自身免疫性疾病(例如多发性硬化症、脑炎等)。
[0025]在第五实施例中，提供了一种通过施用治疗有效量的在此公开的CPEV增强CNS功能的方法。增强CNS功能包括但不限于减少大脑老化，维持或增强认知功能、运动功能和/或对损伤和疾病的复原力。
[0026]在第六实施例中，提供了一种使用治疗有效量的CPEV增强分子口服递送至CNS的方法。这种递送方法可用于治疗各种CNS疾病、功能障碍、减轻炎症和增强CNS功能。
[0027]在一些方面，在此公开的方法涉及向受试者施用包含CPEV的组合物，从而将CPEV递送到受试者的大脑。例如，CPEV可以鼻内或颅内给药，并且在各个方面，给药1、2、3、4、5次或更多次。在一些方面，通过套管提供CPEV完成CPEV的颅内给药。在某些其他方面，CPEV在配制用于鼻内给药的液体组本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种治疗有需要的受试者的脑癌的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(CPEV)。2.根据权利要求1所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述CPEV通过鼻内施用。4.根据权利要求1
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3任一项所述的方法，其中所述施用包括使用选自由鼻内吸入器、鼻内喷雾装置、雾化器、喷雾器、定量吸入器(MDI)、加压定量吸入器、吹入器、单位剂量容器、泵、滴管、鼻喷雾瓶、挤压瓶和双向装置组成的组的鼻内递送装置施用CPEV。5.根据权利要求1
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4任一项所述的方法，进一步包括联合实施辅助癌症治疗方案。6.根据权利要求5所述的方法，其中所述辅助癌症治疗方案包括在施用CPEV之前、期间或之后用辐射治疗哺乳动物。7.根据权利要求5所述的方法，其中所述辅助癌症治疗方案包含另外的化学治疗剂。8.一种组合物，包含CPEV和药学上可接受的载体。9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述药学上可接受的载体包含用于鼻内递送的赋形剂。10.一种装置，包括容器，其中CPEV组合物放在所述容器内，以及与所述容器相连的喷嘴，所述喷嘴配置为插入到有需要的受试者的鼻孔中。11.一种治疗有需要的受试者的神经退行性疾病的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(CPEV)。12.根据权利要求11所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。13.根据权利要求11所述的方法，其中所述神经退行性疾病包括中风、阿尔茨海默病、ALS、MS、帕金森病、创伤性脑损伤或衰老。14.一种治疗有需要的受试者的CNS损伤的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(CPEV)。15.根据权利要求14所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。16.一种治疗有需要的受试者的炎症病症的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(CPEV)。17.根据权利要求16所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌肉内施用。18.一种增强受试者的CNS功能的方法，包括向有需要的受试者施用治疗有效量的含大麻素的植物细胞外囊泡(CPEV)。19.根据权利要求18所述的方法，其中组合物通过吸入、鼻内、口服、静脉内、皮下或肌...

【专利技术属性】
技术研发人员：H，
申请(专利权)人：佛罗里达大学研究基金会有限公司，
类型：发明
国别省市：