一种长双歧杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，公开了一种长双歧杆菌及其应用。本发明专利技术筛选了一种长双歧杆菌，所述长双歧杆菌为长双歧杆菌Bifidobacterium longum HGCW

【技术实现步骤摘要】
一种长双歧杆菌及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一种长双歧杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]双歧杆菌是定植于人体及动物肠道的重要菌群。长双歧杆菌作为双歧杆菌的重要益生菌，广泛定植于体肠道内，对人体具有多种潜在的益生功能，能合成并分泌各种多肽类物质和酶类，如抗菌肽、蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等，促进营养物质的分解从而有利于人体对其吸收和利用。长双歧杆菌发酵后产生的乳酸，能提高铁、磷、钙的利用和维生素D的吸收；能合成维生素B族、维生素C、维生素K、叶酸等多种维生素；也能合成γ
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氨基丁酸、共轭亚油酸、胞外多糖等物质，直接向宿主提供这些营养物质，此外还能能清除人体内的自由基从而延缓机体的衰老。长双歧杆菌能增加人体血液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)的活性及含量，从而加速体内自由基的清除从而减缓衰老，因而得到广泛的应用。
[0003]然而，长双歧杆菌在应用过程中，存在生长缓慢，活性低，容易染菌，生物量达不到生产要求，单体代谢产物少等问题，导致长双歧杆菌难以满足产业化以及提高产品的功效性能的要求。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种长双歧杆菌及其应用。该菌株具有生物量高和分泌活性肽较多的特性，可用于化妆品和食品领域。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：
[0006]第一方面，本专利技术筛选了一种长双歧杆菌，所述长双歧杆菌为长双歧杆菌Bifidobacterium sp.HGCW
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18，其保藏编号为CCTCC NO：M 20221015。
[0007]本专利技术的长双歧杆菌HGCW
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18生物量高、分泌活性肽较多，制备工艺简单，适宜工业生产。采用本专利技术的长双歧杆菌HGCW
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18制备得到的长双歧杆菌发酵产物滤液具有提升皮肤平滑度、皮肤光泽度和弹性、紧致毛孔、修复皮肤屏障、改善皮肤整体状态的效果，适应用于化妆品领域和食品领域。
[0008]作为本专利技术所述的长双歧杆菌的优选实施方式，所述长双歧杆菌的16SrDNA碱基序列如SEQ ID NO.1所示。
[0009]第二方面，本专利技术制备了一种长双歧杆菌发酵产物，由所述的长双歧杆菌发酵制得。
[0010]第三方面，本专利技术提供了一种长双歧杆菌发酵产物的制备方法，包括以下步骤：
[0011]取所述的长双歧杆菌，接种于发酵培养基中，于35℃～39℃厌氧培养36～60h，即得。优选的，所述发酵培养为MRS培养基。
[0012]第四方面，本专利技术制备了一种长双歧杆菌发酵产物滤液，由所述的长双歧杆菌发酵制得。
[0013]第五方面，本专利技术提供了一种长双歧杆菌发酵产物滤液的制备方法，包括以下步
骤：
[0014]取所述长双歧杆菌发酵产物；离心处理，取上清液，将所述上清液进行过滤处理，即得。
[0015]作为本专利技术所述的长双歧杆菌发酵产物滤液的制备方法的优选实施方式，所述离心处理的转速为4000rpm～7000rpm，时间为15min～30min；所述过滤处理为将所述上清液过0.45um和/或0.20um水系滤膜。
[0016]第六方面，本专利技术将所述的长双歧杆菌在化妆品或食品中应用。
[0017]作为本专利技术所述的应用的优选实施方式，所述化妆品包括所述长双歧杆菌制得的发酵产物、二裂酵母发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、二裂酵母发酵产物提取物中的至少一种。
[0018]作为本专利技术所述的应用的优选实施方式，按质量百分比计，所述长双歧杆菌的发酵产物滤液在所述化妆品中的添加量为1％～20％。
[0019]作为本专利技术所述的应用的优选实施方式，所述长双歧杆菌可与嗜热链球菌和保加利亚杆菌混合接种至原料奶中，保温发酵后，制得酸奶。
[0020]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0021]本专利技术的长双歧杆菌HGCW
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18(保藏编号为CCTCC NO：M 20221015)生物量高、分泌活性肽较多，制备工艺简单，适宜工业生产。采用本专利技术的长双歧杆菌HGCW
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18制备得到的长双歧杆菌发酵产物滤液具有提升皮肤平滑度、皮肤光泽度和弹性、紧致毛孔、修复皮肤屏障、改善皮肤整体状态的效果，适应用于化妆品领域和食品领域。
附图说明
[0022]图1为分离得到长双歧杆菌HGCW
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18的菌落形态图；
[0023]图2为显微镜下长双歧杆菌HGCW
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18的革兰氏染色图；
[0024]图3为长双歧杆菌HGCW
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18的16S rDNA PCR产物的琼脂糖凝胶电泳图。
具体实施方式
[0025]为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。本领域技术人员应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0026]实施例中所用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0027]实施例1：长双歧杆菌HGCW
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18的分离和鉴定
[0028]1、分离纯化和形态鉴定
[0029]2018年6月由程建华团队于云南省楚雄市采集奶酪制品样品，用TPY固体培养基分离奶酪制品中的微生物。将分离的微生物于工作站中37℃培养48h，挑取平板上的优势菌落划线分离得到纯菌落，通过革兰氏染色进行形态学观察，并将纯菌落接种于TPY固体培养基中37℃厌氧培养48h，培养结束后置于4℃保藏。得到单个菌株HGCW
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18。
[0030]菌株HGCW
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18纯化后在TPY固体培养基中形成单菌落，其形态如图1所示，菌落形态几乎一致，大多数呈圆形，白色，表面粗糙较为干燥。在30℃～45℃环境下均能生长，接触
酶、运动性、硝酸盐还原、吲哚、产H2S及明胶液化试验均为阴性，
[0031]通过革兰氏染色结果如图2所示，在显微镜下观察到紫色杆状细胞形态，判定为乳酸杆菌中的一种。
[0032]2、薄层层析法检测鉴定
[0033]乳酸杆菌属糖酵解过程产生以乳酸、乙酸为主的短链脂肪酸，利用此特性，通过采用薄层层析法检测不同糖源糖酵解过程中有机酸的产生来对菌株HGCW
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18进行鉴定。
[0034]将上述步骤中分离的菌株HGCW
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18在含不同糖源的培养基中37℃培养24h，于5000rpm离心20min，收集上清液，以溶于70％酒精中的甲基化和溴酚蓝混合溶液为指示剂，进行薄层层析法检测。
[0035]结果如表1所示。
[0036]表1菌株HGCW
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18的薄层层析法检测结果
[0037]检测项目检测结果阿拉伯糖+核糖+本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种长双歧杆菌，其特征在于，所述长双歧杆菌为长双歧杆菌Bifidobacterium longum HGCW
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18，其保藏编号为CCTCC NO：M 20221015。2.根据权利要求1所述的长双歧杆菌，其特征在于，所述长双歧杆菌的16SrDNA碱基序列如SEQ ID NO.1所示。3.一种长双歧杆菌发酵产物，其特征在于，由权利要求1或2所述的长双歧杆菌发酵制得。4.一种长双歧杆菌发酵产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取权利要求1或2所述的长双歧杆菌，接种于发酵培养基中，于35℃～39℃厌氧培养36～60h，即得。5.一种长双歧杆菌发酵产物滤液，其特征在于，由权利要求1或2所述的长双歧杆菌发酵制得。6.一种长双歧杆菌发酵产物滤液的制备方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：何俊杰，张继勇，黄桂州，陆丽杰，李燕琴，郑华生，张鹏，谢培镇，陈杰烽，陈彦烁，杜克斯，程建华，
申请(专利权)人：广州增城潮徽生物技术有限公司广州潮徽生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：