HDAC10作为靶点在制备STAT3相关疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供HDAC10作为靶点在制备STAT3相关疾病药物中的应用。本研究发现在哮喘患者以及哮喘小鼠肺部巨噬细胞中，HDAC10高表达。此外，巨噬细胞中HDAC10的缺失显著保护小鼠免受过敏原诱导的气道炎症的影响，同时肺中M2型巨噬细胞的聚集显著减少。在机制上，Hdac10通过激活PI3K/Akt信号通路促进STAT3表达，HDAC10通过去乙酰化修饰STAT3促进巨噬细胞M2极化。本发明专利技术还探索了HDAC10抑制剂，通过腹腔内注射，靶向巨噬细胞M2极化，来缓解过敏原诱导的气道炎症。通过一系列的前期研究，本发明专利技术开辟了HDAC10作为靶点进行相关疾病研究、以及治疗的新途径。的新途径。

【技术实现步骤摘要】
HDAC10作为靶点在制备STAT3相关疾病药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及HDAC10作为靶点在制备STAT3相关疾病药物中的应用。

技术介绍

[0002]支气管哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病，是多种炎症细胞及炎症介质参与的气道慢性炎症。哮喘是全球发病率上升最快的疾病之一，世界范围哮喘发病率平均每10年增加50％，目前尚无有效的治疗方法。因此，研究哮喘发生与发展的分子机制至关重要。巨噬细胞在宿主肺防御中至关重要，其特点是具有可塑性和多样性，主要分为经典激活表型(M1)和替代激活表型(M2)两大类。包括我们以往的研究表明，M2巨噬细胞，在调节过敏性哮喘气道炎症、气道高反应性和气道重塑中发挥主导作用，且与哮喘疾病严重程度呈正相关。
[0003]HDAC10为第II类组蛋白去乙酰化酶。同源性比较表明HDAC10与HDAC6最相似。两者都含有在其它HDAC中未发现的独特的第二催化结构域。但是，在HDAC10中，此域不起作用。因此，HDAC10和HDAC6具有不寻常的结构和药理学特征。此外，HDAC10与HDAC6不同的是，HDAC6通常存在于细胞质中，而HDAC10主要存在于细胞核中。目前关于HDAC10是否参与哮喘的发病机制尚未见报道。此外，信号转导和转录激活因子3(STAT3)与多种免疫性疾病、感染性疾病以及肿瘤等的发生、发展密切相关。而HDAC10是否对STAT3去乙酰化表观遗传修饰的研究也未见报道。因此，有必要开展这方面的相关研究，以开辟相关疾病治疗的新途径。
专利
技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于探索HDAC10与哮喘发病机制之间的关联，进而提供HDAC10作为靶点在制备STAT3相关疾病药物中的应用。还提供HDAC10作为靶点制备小鼠模型中的应用。以及一种HDAC10抑制剂及其应用。
[0005]为达到以上技术目的，本申请采用的技术方案如下：
[0006]第一方面，本专利技术提供HDAC10作为靶点在制备STAT3相关疾病药物中的应用。
[0007]优选地，所述STAT3相关疾病为STAT3信号通路过表达产生的免疫性疾病、感染性疾病或者肿瘤；更为优选地，所述STAT3相关疾病为过敏原诱发的哮喘；
[0008]和/或，优选地，所述药物通过抑制HDAC10生成或者降低HDAC10含量进而预防和/或治疗STAT3相关疾病。
[0009]第二方面，本专利技术提供HDAC10作为靶点在制备M2型巨噬细胞相关疾病药物中的应用。
[0010]优选地，所述M2型巨噬细胞相关疾病为M2型巨噬细胞极化导致的炎症性疾病；更为优选地，所述M2型巨噬细胞相关疾病为过敏原诱发的哮喘；
[0011]和/或，优选地，所述药物通过抑制HDAC10生成或者降低HDAC10含量进而预防和/或治疗M2型巨噬细胞相关疾病。
[0012]第三方面，本专利技术提供一种HDAC10抑制剂，所述HDAC10抑制剂通过抑制HDAC10生
成或者降低HDAC10含量进而预防和/或治疗STAT3相关疾病或者M2型巨噬细胞相关疾病。
[0013]优选地，所述STAT3相关疾病为STAT3信号通路过表达产生的免疫性疾病、感染性疾病或者肿瘤；更为优选地，所述STAT3相关疾病为过敏原诱发的哮喘。
[0014]优选地，所述M2型巨噬细胞相关疾病为巨噬细胞M2极化导致的炎症性疾病；更为优选地，所述M2型巨噬细胞相关疾病为过敏原诱发的哮喘。
[0015]优选地，所述HDAC10抑制剂至少含有丹酚酸B、异类叶升麻苷、安格洛甙C、氧丙酸、帕比司他中的至少一种；
[0016]和/或，优选地，所述HDAC10抑制剂的剂型为口服剂和注射剂；更为优选地，所述HDAC10抑制剂为注射溶液剂，并通过腹腔注射方式给予；
[0017]和/或，优选地，所述HDAC10抑制剂还包括药学上可接受的载体或辅料。
[0018]第四方面，本专利技术提供HDAC10作为靶点制备巨噬细胞条件性敲除Hdac10缺失小鼠模型中的应用。
[0019]第五方面，本专利技术提供一种巨噬细胞条件性敲除Hdac10缺失小鼠模型的构建方法：包括：
[0020]步骤1，获取靶向条件敲除HDAC10基因的小鼠模型；
[0021]步骤2，将靶向条件敲除HDAC10基因的小鼠模型与LysMCre小鼠杂交繁殖，获得F1代杂合子，即为巨噬细胞条件性敲除HDAC10缺失小鼠模型。
[0022]优选地，所述步骤1中，获取靶向条件敲除HDAC10基因的小鼠模型的过程包括：
[0023]步骤1
‑
1，采用CRISPR
‑
Cas9系统设计靶向HDAC10基因的gRNA，所述gRNA作用位点为HDAC10的2号外显子和14号外显子；
[0024]步骤1
‑
2，将靶向Hdac10基因的gRNA、含有loxP位点的供体载体和Cas9 mRNA共同注射到小鼠受精卵中，然后将受精卵移植到假孕母鼠体内，产出F0代，对F0代进行PCR鉴定。
[0025]优选地，所述gRNA的序列如Seq_1和Seq_2所示(5
’‑
CTGTGCCCATAGCTACACCGTGG
‑3’
，5
’‑
GCCAAATTGCTTAAAACTACAGG
‑3’
)；
[0026]优选地，PCR鉴定引物序列如Seq_3～6所示：
[0027]5’
arm forward primer(F2):5
’‑
GACAAGTTCTGGGCAAATACACTTT
‑3’
(Seq_3)
[0028]3’
loxP reverse primer(R2):5
’‑
GTGGATTCGGACCAGTCTGA
‑3’
(Seq_4)
[0029]5’
loxP forward primer(F1):5
’‑
GACCACGGATAACTTCGTATAGC
‑3’
(Seq_5)
[0030]3’
arm reverse primer(R1):5
’‑
GTTCTGGAGGTAGAGGACGCCTG
‑3’
(Seq_6)；
[0031]和/或，优选地，所述步骤2中，F1代杂合子进行杂交筛选获得HDAC10基因敲除的纯合子代，以所述纯合子代作为巨噬细胞条件性敲除HDAC10缺失小鼠模型。
[0032]本专利技术展开一系列前期研究，进而提供HDAC10作为靶点在制备STAT3相关疾病药物中的应用，以及提供HDAC10作为靶点制备小鼠模型中的应用。本研究发现在哮喘患者以及哮喘小鼠肺部巨噬细胞中，HDAC10高表达。此外，巨噬细胞中HDAC10的缺失显著保护小鼠免受过敏原诱导的气道炎症的影响，同时肺中M2巨噬细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.HDAC10作为靶点在制备STAT3相关疾病药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述STAT3相关疾病为STAT3信号通路过表达产生的免疫性疾病、感染性疾病或者肿瘤；更为优选地，所述STAT3相关疾病为过敏原诱发的哮喘；和/或，所述药物通过抑制HDAC10生成或者降低HDAC10含量进而预防和/或治疗STAT3相关疾病。3.HDAC10作为靶点在制备M2型巨噬细胞相关疾病药物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述M2型巨噬细胞相关疾病为M2型巨噬细胞极化导致的炎症性疾病；更为优选地，所述M2型巨噬细胞相关疾病为过敏原诱发的哮喘；和/或，所述药物通过抑制HDAC10生成或者降低HDAC10含量进而预防和/或治疗M2型巨噬细胞相关疾病。5.一种HDAC10抑制剂，其特征在于：所述HDAC10抑制剂通过抑制HDAC10生成或者降低HDAC10含量进而预防和/或治疗STAT3相关疾病或者M2型巨噬细胞相关疾病。6.根据权利要求5所述的一种HDAC10抑制剂，其特征在于：所述STAT3相关疾病为STAT3信号通路过表达产生的免疫性疾病、感染性疾病或者肿瘤；更为优选地，所述STAT3相关疾病为过敏原诱发的哮喘；或者，所述M2型巨噬细胞相关疾病为巨噬细胞M2极化导致的炎症性疾病；更为优选地，所述M2型巨噬细胞相关疾病为过敏原诱发的哮喘。7.根据权利要求5或6所述的一种HDAC10抑制剂，其特征在于：所述HDAC10抑制剂至少含有丹酚酸B、异类叶升麻苷、安格洛甙C、氧丙酸、帕比司他中的至少一种；和/或，所述HDAC10抑制剂的剂型为口服剂和注射剂；更为优选地，所述HDAC10抑制剂为注射溶液剂，并通过腹腔...

【专利技术属性】
技术研发人员：赖天文，钟宇，吕莹莹，苏国媚，王云，方佳，
申请(专利权)人：广东医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：