鸟苷酸环化酶C(GCC)抗原结合剂的组合物及其使用方法技术

公开了结合鸟苷酸环化酶C(GCC)的抗原结合剂(例如单结构域抗体)，以及包含GCC抗原结合结构域的嵌合抗原受体。还公开了包含这些抗原结合剂及其片段的核酸、重组表达载体、宿主细胞、抗原结合片段和药物组合物。本发明专利技术还提供利用本文所提供的抗体和抗原结合分子的治疗方法。疗方法。疗方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】鸟苷酸环化酶C(GCC)抗原结合剂的组合物及其使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年12月9日提交的美国临时专利申请序列号63/123,331的优先权，所述临时专利申请以引用的方式整体并入本文中。
[0003]序列表
[0004]本申请含有已经以电子方式以ASCII格式提交并且特此以引用的方式整体并入的序列表。所述ASCII副本创建于2021年11月19日，名称为MIL
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005WO_SL.txt并且大小为140,478字节。

技术介绍

[0005]鸟苷酸环化酶C(GCC)为一种跨膜细胞表面受体，其功能为维持肠液、电解质体内稳态和细胞增殖，参见例如Carrithers等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 100:3018
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3020(2003)。GCC表达于内衬小肠、大肠和直肠的粘膜细胞(Carriters等人,Dis Colon Rectum 39:171
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181(1996))。GCC表达在肠上皮细胞的致瘤性转化之后仍维持，并且在所有原发性和转移性结肠直肠肿瘤中均有表达(Carriters等人,Dis Colon Rectum 39:171
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181(1996)；Buc等人,Eur J Cancer 41:1618
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1627(2005)；Carrithers等人,Gastroenterology 107:1653
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1661(1994))。目前需要新颖的且改进的靶向GCC的方法。

技术实现思路

[0006]GCC信号传导途径的破坏与多种胃肠病症(包括结肠直肠癌)有关。本专利技术尤其提供新颖的抗GCC抗原结合分子(例如，单结构域抗体(sdAb))和包含抗GCC抗原结合结构域(例如，sdAb)的嵌合抗原受体(CAR)。此外，本专利技术提供表达所述CAR的宿主细胞(例如，T细胞)，以及编码所述CAR或抗GCC抗原结合分子的核酸分子。所述CAR细胞包含在细胞表面上表达的抗GCC CAR分子。在一些实施方案中，所述CAR在经转导T细胞上表现出高表面表达，在体内具有高度细胞溶解和经转导T细胞扩增和持久性。还提供使用所公开的CAR、宿主细胞和核酸分子例如来治疗受试者的癌症的方法。
[0007]在一个方面中，本专利技术提供一种抗鸟苷酸环化酶C(GCC)嵌合抗原受体(CAR)，其包含与鸟苷酸环化酶C(GCC)结合的细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和至少一个细胞内信号传导结构域。
[0008]在一些实施方案中，所述抗GCC CAR包含抗原结合结构域，所述抗原结合结构域包含：具有HYYWS(HCDR1)(SEQ ID NO:8)、RIYPSGSTSYNPSLKS(HCDR2)(SEQ ID NO:11)和DRSTGWSEWN SDL(HCDR3)(SEQ ID NO:16)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(VH)；具有RYWMS(HCDR1)(SEQ ID NO:9)、KIRHDGGEKYYV DSVKG(HCDR2)(SEQ ID NO:12)和DYTRDV(HCDR3)(SEQ ID NO:17)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(VH)；具有RYWMT(HCDR1)(SEQ ID NO:10)、KIKYDGSEKYYADSVKG(HCDR2)(SEQ ID NO:13)和DYNKDY(HCDR3)(SEQ ID NO:18)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(VH)；具有RYWMT(HCDR1)(SEQ ID NO:10)、KIRHDGGEKYYPDSVKG(HCDR2)(SEQ ID NO:14)和DYNKDL(HCDR3)(SEQ ID NO:19)的互补决定
区(CDR)序列的重链可变区(VH)；或具有RYWMT(HCDR1)(SEQ ID NO:10)、KIRHDGGEKYYADSVKG(HCDR2)(SEQ ID NO:15)和DYNKDY(HCDR3)(SEQ ID NO:18)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(VH)。
[0009]在一些实施方案中，所述抗GCC CAR的抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:20至少90％同一的重链可变区(VH)。
[0010]在一些实施方案中，所述抗GCC CAR的抗原结合结构域包含免疫球蛋白重链可变(VH)区，所述免疫球蛋白重链可变(VH)区包含与SEQ ID NO:21至少90％同一的氨基酸序列；免疫球蛋白重链可变(VH)区，所述免疫球蛋白重链可变(VH)区包含与SEQ ID NO:26至少90％同一的氨基酸序列；免疫球蛋白重链可变(VH)区，所述免疫球蛋白重链可变(VH)区包含与SEQ ID NO:27至少90％同一的氨基酸序列；免疫球蛋白重链可变(VH)区，所述免疫球蛋白重链可变(VH)区包含与SEQ ID NO:28至少90％同一的氨基酸序列。
[0011]在一些实施方案中，所述抗GCC CAR的抗原结合结构域包含仅具抗GCC抗原结合结构域的免疫球蛋白可变重链。
[0012]在一些实施方案中，所述抗GCC CAR的细胞外抗GCC抗原结合结构域前接有编码前导肽的前导核苷酸序列。
[0013]在一些实施方案中，所述前导肽包含SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:42。
[0014]在一些实施方案中，所述抗GCC CAR还包含铰链结构域。
[0015]在一些实施方案中，所述铰链结构域包含CD28的铰链结构域。
[0016]在一些实施方案中，所述CD28铰链结构域包含SEQ ID NO:29。
[0017]在一些实施方案中，所述抗GCC CAR包含与所述跨膜结构域融合的铰链结构域。
[0018]在一些实施方案中，所述跨膜结构域包含蛋白质的跨膜结构域，所述蛋白质选自T细胞受体的α、β或ζ链、CD8、CD28、CD3ε、CD45、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD64、CD80、CD83、CD86、CD134、CD137、CD154和TNFRSF19，以及其任何组合。
[0019]在一些实施方案中，所述跨膜结构域包含CD28跨膜结构域。
[0020]在一些实施方案中，所述CD28跨膜结构域包含SEQ ID NO:30。
[0021]在一些实施方案中，所述至少一个细胞内信号传导结构域包含共刺激结构域和初级信号传导结构域。
[0022]在一些实施方案中，所述共刺激结构域包含OX40、CD70、CD27、CD28、CD5、ICAM
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1、LFA
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1(CD11a/CD18)、ICOS(CD278)、DAP10、DAP12和4
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1BB(CD137)的功能性信号传导结构域，或其任何组合。
[0023]在一些实施方案中，所述共刺激结构域包含CD2本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗鸟苷酸环化酶C(GCC)嵌合抗原受体(CAR)，其包含与鸟苷酸环化酶C(GCC)结合的细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和至少一个细胞内信号传导结构域。2.如权利要求1所述的抗GCC CAR，其中所述抗原结合结构域包含具有HYYWS(HCDR1)(SEQ ID NO:8)、RIYPSGSTSYNPSLKS(HCDR2)(SEQ ID NO:11)和DRSTGWSEWNSDL(HCDR3)(SEQ ID NO:16)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(V
H
)；具有RYWMS(HCDR1)(SEQ ID NO:9)、KIRHDGGEKYYVDSV KG(HCDR2)(SEQ ID NO:12)和DYTRDV(HCDR3)(SEQ ID NO:17)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(V
H
)；具有RYWMT(HCDR1)(SEQ ID NO:10)、KIKYDGSEKYYADS VKG(HCDR2)(SEQ ID NO:13)和DYNKDY(HCDR3)(SEQ ID NO:18)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(V
H
)；具有RYWMT(HCDR1)(SEQ ID NO:10)、KIRHDGGEKYYPDS VKG(HCDR2)(SEQ ID NO:14)和DYNKDL(HCDR3)(SEQ ID NO:19)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(V
H
)；或具有RYWMT(HCDR1)(SEQ ID NO:10)、KIRHDGGEKYYADS VKG(HCDR2)(SEQ ID NO:15)和DYNKDY(HCDR3)(SEQ ID NO:18)的互补决定区(CDR)序列的重链可变区(V
H
)。3.如权利要求1所述的抗GCC CAR，其中所述抗原结合结构域包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:20至少90％同一的重链可变区(V
H
)。4.如权利要求1所述的抗GCC CAR，其中所述抗原结合结构域包含免疫球蛋白重链可变(VH)区，所述免疫球蛋白重链可变(VH)区包含与SEQ ID NO:21至少90％同一的氨基酸序列；免疫球蛋白重链可变(VH)区，所述免疫球蛋白重链可变(VH)区包含与SEQ ID NO:26至少90％同一的氨基酸序列；免疫球蛋白重链可变(VH)区，所述免疫球蛋白重链可变(VH)区包含与SEQ ID NO:27至少90％同一的氨基酸序列；或免疫球蛋白重链可变(VH)区，所述免疫球蛋白重链可变(VH)区包含与SEQ ID NO:28至少90％同一的氨基酸序列。5.如权利要求1
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4中任一项所述的抗GCC CAR，其中所述抗原结合结构域包含仅具抗GCC抗原结合结构域的免疫球蛋白可变重链。6.如权利要求1
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5中任一项所述的抗GCC CAR，其中所述细胞外抗GCC抗原结合结构域前接有编码前导肽的前导核苷酸序列。7.如权利要求28所述的抗GCC CAR，其中所述前导肽包含SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:42。8.如权利要求1
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7中任一项所述的抗GCC CAR，所述抗GCC CAR还包含铰链结构域。9.如权利要求8所述的抗GCC CAR，其中所述铰链结构域包含CD28的铰链结构域。10.如权利要求9所述的抗GCC CAR，其中所述CD28铰链结构域包含SEQ ID NO:29。11.如权利要求8
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10中任一项所述的抗GCC CAR，其中所述铰链结构域与所述跨膜结构域融合。12.如权利要求1
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11中任一项所述的抗GCC CAR，其中所述跨膜结构域包含蛋白质的跨膜结构域，所述蛋白质选自T细胞受体的α、β或ζ链、CD8、CD28、CD3ε、CD45、CD4、CD5、CD8、CD9、CD16、CD22、CD33、CD37、CD64、CD80、CD83、CD86、CD134、CD137、CD154和TNFRSF19，以及其任何组合。
13.如权利要求12所述的抗GCC CAR，其中所述跨膜结构域包含CD28跨膜结构域。14.如权利要求13所述的抗GCC CAR，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：G，
申请(专利权)人：武田药品工业株式会社，
类型：发明
国别省市：