一种适用于果树的气孔窝叶表皮的制作方法技术

本发明专利技术涉及一种适用于果树的气孔窝叶表皮的制作方法，该制作方法包括如下步骤：S1，制作果树叶片下表皮的切片样本；S2，将所述切片样本放入无水乙醇中浸泡50

【技术实现步骤摘要】
一种适用于果树的气孔窝叶表皮的制作方法


[0001]本专利技术涉及植物叶片表皮制片
，尤其是涉及一种适用于果树的气孔窝叶表皮的制作方法。

技术介绍

[0002]植物叶片表皮制片常用次氯酸钠离析法和铬酸离析法及其部分改良方法。然而针对不同的植物材料，以上方法不能完全满足研究需要。如在使用次氯酸钠离析法处理时，植物材料表皮细胞在乙醇脱水及二甲苯中透明时极易发生卷曲，造成植物材料观察的不完全性；而铬酸离析法在处理过程中容易造成植物材料表皮细胞的破碎，并且处理需要的时间长、操作繁琐，不适合快速查看叶片窝叶气孔器，且不能准确的看出气孔器的位置和保卫细胞的状态。
[0003]公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在加深对本申请的总体
技术介绍
的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域技术人员所公知的现有技术。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种适用于果树的气孔窝叶表皮的制作方法，以解决现有技术中存在的技术问题。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供了的一种适用于果树的气孔窝叶表皮的制作方法，该制作方法包括如下步骤：S1，制作果树叶片下表皮的切片样本；S2，将所述切片样本放入无水乙醇中浸泡50
‑
70秒；S3，将所述切片样本放入蒸馏水中浸泡至下表皮细胞舒展；S4，完成果树气孔窝叶表皮观察样本的制作。
[0006]进一步的，果树叶片按如下方法带回：从每枝果树上选择3
‑
5枚发育良好的叶片从根部剪断，剪断的叶片切口浸泡在蒸馏水中带回。
[0007]进一步的，所述S1中，从果树叶片中段选取3
‑
5cm2的叶片进行切割，切割后刮除叶片上表皮和叶表层的叶肉细胞，保留叶片的下表皮。
[0008]进一步的，所述S2中，将所述切片样本放入无水乙醇中浸泡60秒。
[0009]进一步的，所述S3中，将所述切片样本放入蒸馏水中浸泡30秒。
[0010]进一步的，在使用显微镜进行观察前，利用移液枪移取适量蒸馏水滴在载玻片中央，将经过无水乙醇处理的所述切片样本用育种夹夹进所述载玻片上的蒸馏水中，盖上盖玻片后用擦镜纸吸除载玻片上多余的蒸馏水。
[0011]采用上述技术方案，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术提供的适用于果树的气孔窝叶表皮的制作方法，将叶片下表皮细胞放入无水乙醇中短暂浸泡，无水乙醇可溶解下表皮细胞层中的叶绿素，短时间的浸泡不会溶解气孔保卫细胞中的叶绿素，方便后续在荧光显微镜中观察各个不同品种的苹果植物的气孔的
数目和气孔形状以及气孔与叶脉之间的分布规律。但是无水乙醇浸泡过的下表皮极易发生卷曲，如果立即放入载玻片观察表皮细胞，此时表皮彼此重叠使视镜内的气孔数目难以分辨，所以用镊子将其夹出再放入蒸馏水中浸泡直到下表皮细胞在蒸馏水中舒展。
[0012]该方法实验，操作简单、易于掌握，能有效的解决植物叶表皮制片中表皮易发生卷曲破碎、气孔细胞不好观察、计数等难题，为植物叶表皮气孔器微形态研究找到了一条方便、快捷的途径。
附图说明
[0013]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0014]图1为海棠绚丽叶片图；图2为海棠春雪叶片图。
实施方式
[0015]下面将结合附图对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0016]在本专利技术的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
[0017]在本专利技术的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本专利技术中的具体含义。
[0018]以下结合附图对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。
实施例
[0019]将被测试的苹果叶片用剪刀齐根部剪断，每枝苹果选择3
‑
5枚叶片发育良好的叶片，剪断的叶片切口处放进盛满蒸馏水的玻璃瓶内以保持叶片活力。叶片被带入显微实验室内，从植物叶片的中间段位选取大约4 cm2的叶片切割下来放置在清洁的废弃载玻片上，用单面刀片斜着从叶片上表皮开始刮擦，刮去叶表层的叶肉细胞，注意下刀时观察叶片下表皮的叶肉组织是否全部清理干净，厚重的叶肉组织既影响显微镜视野内的观测又容易造成载玻片内下表皮层的不平整而产生气泡。将刮出的苹果和山苹果植物的下表皮放入无水
乙醇中浸泡约1分钟，无水乙醇浸泡过的下表皮极易发生卷曲，如果立即放入载玻片观察表皮细胞，此时表皮彼此重叠使视镜内的气孔数目难以分辨，所以用镊子将其夹出再放入蒸馏水中浸泡约30秒直到下表皮细胞在蒸馏水中舒展。利用移液枪移取适当地蒸馏水滴在载玻片中央，将经过无水乙醇处理的植物下表皮细胞用育种夹夹进蒸馏水中，防止使用正置荧光显微镜时待测的下表皮脱水卷曲，影响观察的效果。表皮细胞层摆放要端正、整齐、无重叠，之后盖上盖玻片，用擦镜纸吸取玻片上多余的蒸馏水，使用10倍镜观察待测细胞，观察时注意玻片内有无气泡影响目镜视野。
[0020]无水乙醇可溶解下表皮细胞层中的叶绿素，短时间的浸泡不会溶解气孔保卫细胞中的叶绿素，方便后续在荧光显微镜中观察各个不同品种的苹果植物的气孔的数目和气孔形状以及气孔与叶脉之间的分布规律。
[0021]如图1和图2显示本专利技术的制作的果树的气孔窝叶表皮在荧光显微镜下气孔清晰。
实施例
[0022]将被测试的苹果叶片用剪刀齐根部剪断，每枝苹果选择3
‑
5枚叶片发育良好的叶片，剪断的叶片切口处放进盛满蒸馏水的玻璃瓶内以保持叶片活力。叶片被带入显微实验室内，从植物叶片的中间段位选取大约3 cm2的叶片切割下来放置在清洁的废弃载玻片上，用单面刀片斜着从叶片上表皮开始刮擦，刮去叶表层的叶肉细胞，注意下刀时观察叶片下表皮的叶肉组织是否全部清理干净，厚重的叶肉组织既影响显微镜视野本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种适用于果树的气孔窝叶表皮的制作方法，其特征在于，该制作方法包括如下步骤：S1，制作果树叶片下表皮的切片样本；S2，将所述切片样本放入无水乙醇中浸泡50
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70秒；S3，将所述切片样本放入蒸馏水中浸泡至下表皮细胞舒展；S4，完成果树气孔窝叶表皮观察样本的制作。2.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，果树叶片按如下方法带回：从每枝果树上选择3
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5枚发育良好的叶片从根部剪断，剪断的叶片切口浸泡在蒸馏水中带回。3.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述S1中，从果树叶片中段选...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡玉净，吴昊凡，赵雪，肖蓉，陈丽，杨冰，张也，姚允聪，
申请(专利权)人：北京农学院，
类型：发明
国别省市：