本发明专利技术提供了一株蜡样芽孢杆菌MG1及应用，属于微生物应用技术领域，具体提供了一株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MG1，于2022年5月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山武汉大学，保藏号CCTCC NO：M 2022620；本发明专利技术提供的蜡样芽孢杆菌MG1能够只以糖渣为营养物质生产PHA，具有一定的耐盐性，可以处理一些含盐量高的工业废弃物，比如糖渣等，用于生产高附加值化合物PHA，避免工业废弃物因处理不当造成资源浪费和环境污染。源浪费和环境污染。源浪费和环境污染。
【技术实现步骤摘要】
一株蜡样芽孢杆菌MG1及应用
[0001]本专利技术属于微生物应用
，具体涉及一株蜡样芽孢杆菌MG1及应用。
技术介绍
[0002]随着社会发展和生活水平提高，由不可再生化石资源生产的聚乙烯(PE)等传统塑料已广泛应用于国民生产生活的各个方面，但塑料的大量使用导致了严重的“白色污染”问题。PHA是微生物体内的一类3
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羟基脂肪酸组成的线性聚酯，其在某些性能上可以媲美传统的热塑性塑料，它还具有一些独特的生物可降解性、生物相容性、光学异构性、提高微生物的抗逆性等性能，被认为是最具发展潜力的“绿色塑料”。在自然界中，许多微生物被证实可合成聚羟基脂肪酸酯(ployhydroxyalkanoates，PHA)并储存在体内。虽然PHA在生物降解和生物相容性上要比传统塑料具有优势，但是PHA的生产成本高于传统塑料，限制了PHA的工业化生产和应用。目前，PHA的商业化生产价格高达每千克2.2
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5.0欧元，而聚丙烯塑料的价格仅为每千克1.0欧元。为了降低PHA生产成本，研究人员试图探索新的发酵模式(混合菌发酵、极端微生物发酵)以降低发酵原料和发酵过程的成本。同时，基因工程和代谢工程技术也用于提高细菌的PHAs合成能力和积累效率以降低生产成本。
[0003]目前报道的PHA合成菌株多为革兰氏阴性菌，以葡萄糖、果糖等为底物，PHA积累量可达细胞干重的50％
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80％。然而，利用革兰氏阴性菌生产PHA也存在着一定的缺陷。革兰氏阴性菌含有脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)，因而会干扰PHA的纯化，增加提取工艺的复杂性和成本；其次，革兰氏阴性菌产生的LPS可以诱导人体产生强烈的免疫反应，因而含有LPS的PHA不能应用于生物医药领域。与此相比，利用以芽孢杆菌为代表的革兰氏阳性菌生产PHA具有原料来源广、抗逆性强、提取工艺简单等优势，但是还未见只利用糖渣为营养物质用于生产PHA的相关报道，尤其是利用在生产柠檬酸时，由玉米淀粉糖化反应产生的废渣(即糖渣)作为营养物质，用于生产PHA未见相关报道。
[0004]中国专利文献CN102119220A(申请号：200880130671.2)公开了使用柠檬残渣的PHA(聚羟基链烷酸酯)的制备，该专利文献中公开的是使用柑橘加工残渣(命名为柠檬残渣)，通过对柠檬残渣进行研磨方法、用氧化钙处理和压榨而获得榨出液和/或柠檬糖蜜；并加入微量元素营养液，然后用于微生物培养生产PHA。
[0005]现有技术中，在生产柠檬酸时，由玉米淀粉糖化反应产生的废渣(即糖渣)，有的用于售卖饲料，有的不做处理任意堆放，由于处理不当，会对环境造成一定的污染、产生资源浪费。因此，也急需将废渣转化为高附加值化合物的相关研究。
[0006]由于糖渣中含有的营养物质有限，其糖类总含量超过200g/kg，但蛋白质含量低，低于0.05g/kg，因此糖渣的碳氮比远高于微生物细胞自身的碳氮比，只利用糖渣作为营养成分培养微生物菌种，对微生物菌种的生长和代谢影响比较大，有的菌种可能无法正常生长，也影响代谢物质的产生。
技术实现思路
[0007]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株蜡样芽孢杆菌MG1及应用。
[0008]本专利技术中所述的糖渣是指双酶法玉米淀粉糖化反应后产生的废渣。
[0009]本专利技术的技术方案如下：
[0010]一株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MG1，于2022年5月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山武汉大学，保藏号CCTCC NO：M2022620。
[0011]上述蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MG1的培养方法，包括如下步骤：
[0012](1)取蜡样芽孢杆菌MG1接种于固体培养基上，30
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37℃活化培养12
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14h，制得活化后的菌体；
[0013](2)取制得活化后的菌体接种于液体培养基中，30
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37℃、180
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200rpm培养12
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14h，制得种子液；
[0014](3)取制得的种子液，按体积百分比1
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3％接种于液体培养基中，30
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37℃、180
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200rpm培养12h
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24h，得到蜡样芽孢杆菌MG1菌液。
[0015]根据本专利技术优选的，步骤(1)中，37℃活化培养12h。
[0016]根据本专利技术优选的，步骤(2)中，37℃、200rpm培养12h。
[0017]根据本专利技术优选的，步骤(3)中，37℃、200rpm培养24h。
[0018]根据本专利技术优选的，步骤(1)中的固体培养基为LB固体培养基；步骤(2)、步骤(3)中的液体培养基为LB液体培养基。
[0019]上述蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MG1在生产PHA中的应用。
[0020]根据本专利技术优选的，上述蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MG1利用糖渣在生产PHA中的应用。
[0021]进一步优选的，所述糖渣为双酶法玉米淀粉糖化反应后产生的废渣。
[0022]本专利技术的有益效果如下：
[0023]1.蜡样芽孢杆菌MG1具有易培养、生长迅速、对环境营养要求简单的特点。
[0024]2.蜡样芽孢杆菌MG1能够利用糖渣生产PHA，原料便宜，在糖渣浓度40g/L时可以得到17.5mg/L的PHA，在额外使用葡萄糖作为碳源可以得到25.5mg/L的PHA，当额外使用甘油作为碳源时可以得到27.5mg/L的PHA。
附图说明
[0025]图1为蜡样芽孢杆菌MG1革兰氏染色图。
[0026]图2为蜡样芽孢杆菌MG1系统进化树图。
[0027]图3为不同浓度碳源对PHA产量的影响；
[0028]图中：A为不同浓度的葡萄糖对PHA产量的影响；B为不同浓度甘油对PHA产量的影响。
[0029]图4为蜡样芽孢杆菌MG1利用不同碳源发酵得到PHA的核磁共振氢谱图；
[0030]图中：A为蜡样芽孢杆菌MG1利用葡萄糖发酵得到PHA的核磁共振氢谱；B为蜡样芽孢杆菌MG1利用甘油发酵得到PHA的核磁共振氢谱。
[0031]图5为蜡样芽孢杆菌MG1在不同盐浓度下PHA生产情况图。
具体实施方式
[0032]下面结合实施例对本专利技术的技术方案做进一步阐述，但本专利技术所保护的范围不限于此。
[0033]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为常规市售生化试剂。
[0034]主要材料来源
[0035]本专利技术中所用的糖渣来源于日照金禾博源生化有限公司；所用糖渣为生产柠檬酸时，由双酶法玉米淀粉糖化反应后产生的废渣。
[0036]实施例1
[0037]本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MG1，于2022年5月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山武汉大学，保藏号CCTCC NO：M2022620。2.权利要求1所述蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MG1的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取蜡样芽孢杆菌MG1接种于固体培养基上，30
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37℃活化培养12
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14h，制得活化后的菌体；(2)取制得活化后的菌体接种于液体培养基中，30
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37℃、180
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200rpm培养12
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14h，制得种子液；(3)取制得的种子液，按体积百分比1
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3％接种于液体培养基中，30
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37℃、180
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【专利技术属性】
技术研发人员：古鹏飞，马倩倩，徐晓美，高晓彤，周昊，潘月富，连明科，
申请(专利权)人：日照金禾博源生化有限公司，
类型：发明
国别省市：
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