一株ParageobacillustoebiiPMBT002及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一株Parageobacillus toebii PMBT002及其应用，其保藏编号为GDMCC.No：63295；保藏单位为广东省科学院微生物研究所(广东省微生物菌种保藏中心)，保藏单位地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为2022年3月27日。本发明专利技术一株Parageobacillus toebii PMBT002是以熊猫粪便为分离源，分离筛选出的具有双重酶活用于好氧堆肥发酵的高温菌。它具有较高纤维素酶活与蛋白酶活，在好氧堆肥中加入Parageobacillus toebii PMBT002细菌制剂，堆肥温度最高可达近70℃，可以加速粪便堆肥进入嗜热阶段，加速粪便堆肥过程，并有有利于堆肥物料中养分的保持。有有利于堆肥物料中养分的保持。有有利于堆肥物料中养分的保持。

【技术实现步骤摘要】
一株Parageobacillus toebii PMBT002及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一株Parageobacillus toebii PMBT002及其应用。

技术介绍

[0002]近年来，我国畜牧产业发展迅速，畜禽养殖规模化不断提高，所产生的粪污已成为环境污染的主要来源。粪便中含有多种可引起寄生感染的(从动物到人)微生物，包括大肠杆菌、沙门氏菌、贾第虫(鞭毛虫)、弯曲菌(Campylobacter)及原虫(Cryptosporidiumparoum)，此外，还含有一些病毒等。因此，对规模化畜禽养殖业粪污处理必须采取有效技术措施，使粪污处理达到无害化、减量化和资源化，从而促进畜牧业可持续健康发展。
[0003]目前，高温好氧堆肥化处理是解决固体废物问题的一个重要途径，具有保护环境，节约原材料和能源、投资少、运行费用低等优点。但是，农业固体废物，尤其是畜禽粪便等中含有大量的纤维素、蛋白质等，其成分复杂，难以被充分利用或被大多数微生物直接作为碳源物质而转化利用。为使堆肥产物达到无害化要求，美国环保署(USEPA)要求露天堆肥必须保持55℃以上高温至少15d，且至少翻堆5次；另一个值得关注的事实是，一些病原微生物，如沙门氏菌及大肠杆菌在离开寄主(人或动物)后，可以在堆肥中再度繁殖。因此，当堆肥翻堆不彻底，使部分物料未经受高温或高温时间太短，或腐熟堆肥又与生粪接触，使腐熟堆肥重新受到病原菌的污染，这些病原菌就会繁殖起来。
[0004]国内外学者研究表明，在堆肥过程中接种高效的微生物可以使堆肥物料快速达到高温，杀灭其中的病原微生物，控制堆肥过程中臭气的产生，缩短堆肥腐熟进程。现今关于高温菌株好氧堆肥的研究非常活跃，但以往关于高温菌株的研究主要集中于其淀粉酶活与产抗生素等方面，而关于具有纤维素酶和蛋白酶降解能力的高温菌株的研究还极少。因此筛选耐高温的高效纤维素、蛋白降解菌，将其接种至堆肥中可以促进堆肥腐熟、对于提高堆肥产品品质具有重要意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是提供一株Parageobacillus toebii PMBT002及其应用，该菌株具有双重酶活，可以用于好氧堆肥发酵。
[0006]为了解决现有技术存在的问题，本专利技术采用的技术方案如下：
[0007]第一个方面，本专利技术提供一株Parageobacillus toebii PMBT002，其保藏编号为GDMCC.No：63295；保藏单位为广东省科学院微生物研究所(广东省微生物菌种保藏中心)，保藏单位地址：(广州市先烈中路100号大院59号楼)，保藏日期为2023年3月27日。
[0008]进一步地，所述Parageobacillus toebii PMBT002的基因序列如SEQ ID NO.1所示。
[0009]第二个方面，本专利技术提供Parageobacillus toebii PMBT002在制备微生物菌剂上
的应用。
[0010]第三个方面，本专利技术提供一种微生物菌剂，含有上述第一个方面所述的Parageobacillus toebii PMBT002。
[0011]进一步地，所述Parageobacillus toebii PMBT002在所述微生物菌剂中的活菌数为1.0
×
108‑
5.0
×
108CFU/g。
[0012]第四个方面，本专利技术提供上述第四个方面所述的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：
[0013]S1：将Parageobacillus toebii PMBT002接种于TSA培养基；
[0014]S2：并挑取单菌落于TSB培养基中，于50
‑
60℃、160
‑
200r/min培养1天，得到种子液；将所述种子液按照5％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于50
‑
60℃、160
‑
200r/min振荡培养1
‑
2天，得到微生物菌剂，其有效活菌数为1.0
×
108‑
5.0
×
108CFU/g，pH值为6.0
‑
8.0；所述发酵培养基成分为：蛋白脉7g，牛肉膏1g，氯化钠5g，葡萄糖10g，蒸馏水1000mL。
[0015]第五个方面，本专利技术提供上述第一个方面所述的Parageobacillus toebii PMBT002或上述第三个方面所述的微生物菌剂在制备微生物肥上的应用。
[0016]第六个方面，本专利技术提供一种微生物肥，含有上述第一个方面所述的Parageobacillus toebii PMBT002或上述第三个方面所述的微生物菌剂。
[0017]第七个方面，本专利技术提供上述第一个方面所述的Parageobacillus toebii PMBT002或上述第三个方面所述的微生物菌剂或上述第五个方面所述的微生物肥在粪便高温好氧堆肥化处理上的应用。
[0018]第八个方面，本专利技术提供一种高温好氧堆肥化处理方法，包括以下步骤：
[0019]S1：将新鲜粪肥与尿素、木屑和刨花均匀混合形成混合粪便，混合粪便最终含有质量分数为0.05
‑
0.4％尿素、20
‑
30％的木屑和刨花；
[0020]S2：按照混合粪便体积的0.3
‑
1.0％添加上述第三个方面所述的微生物菌剂采用堆垛法发酵10
‑
30天。
[0021]本专利技术所具有的优点和有益效果是：
[0022]本专利技术提供了一株Parageobacillus toebii PMBT002，该菌株是以熊猫粪便为分离源，分离筛选出的具有双重酶活用于好氧堆肥发酵的高温菌。属于副土芽孢杆菌属(Parageobacillus)，它适宜生长的温度范围为40
‑
78℃，具有较高纤维素酶活与蛋白酶活，纤维素相对酶活性56.9μmol/mL，蛋白酶相对酶活性1.69μmol/mL。无分解脂肪的酶活性。采用本专利技术的方法，在好氧堆肥中加入Parageobacillus toebii PMBT002细菌制剂，堆肥温度最高可达近70℃，可以加速粪便堆肥进入嗜热阶段，加速粪便堆肥过程，并有利于堆肥物料中养分的保持。
[0023]Parageobacillus toebii PMBT002保藏信息如下：
[0024]Parageobacillus toebii PMBT002，保藏编号为GDMCC.No：63295；保藏单位为广东省科学院微生物研究所(广东省微生物菌种保藏中心)，保藏单位地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为2022年3月27日。
附图说明
[0025]图1为Parageobacillus toebii PMBT002在TSA平板上形态；
[0026]图2为基于16S rRNA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株Parageobacillus toebii PMBT002，其特征在于，其保藏编号为GDMCC.No：63295；保藏单位为广东省科学院微生物研究所(广东省微生物菌种保藏中心)，保藏单位地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏日期为2022年3月27日。2.根据权利要求1所述的Parageobacillus toebii PMBT002，其特征在于，其基因序列如SEQ ID NO.1所示。3.权利要求1或2所述的Parageobacillus toebii PMBT002在制备微生物菌剂上的应用。4.一种微生物菌剂，其特征在于：含有权利要求1或2所述的Parageobacillus toebii PMBT002。5.根据权利要求4所述的微生物菌剂，其特征在于：所述Parageobacillus toebii PMBT002在所述微生物菌剂中的活菌数为1.0
×
108‑
5.0
×
108CFU/g。6.权利要求4或5所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：将Parageobacillus toebii PMBT002接种于TSA培养基；S2：并挑取单菌落于TSB培养基中，于50
‑
60℃、160
‑
200r/min培养1天，得到种子液；将所述种子液按照5％(v/v)接种量接种于发酵培养基中，于50
...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹立扣，付静霞，赵珂，曲静雯，李果，戢林，巫嘉伟，白林，沈飞，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：