人参多糖在制备免疫调节产品中的应用制造技术

本发明专利技术提供人参多糖在制备免疫调节产品中的应用。本发明专利技术尝试将人参多糖作为SARS

【技术实现步骤摘要】
人参多糖在制备免疫调节产品中的应用


[0001]本专利技术涉及免疫调节
，具体涉及人参多糖在制备免疫调节产品中的应用。

技术介绍

[0002]为了帮助免疫系统识别抗原，在疫苗研发和生产过程中，将佐剂加入到抗原中，达到增强免疫反应的作用。佐剂是疫苗核心成分，超过90％的疫苗含有佐剂。在mRNA疫苗中，缺少脂质体佐剂会使疫苗几乎无效。此外，针对不同疫苗采用适宜的佐剂，还可以提高婴幼儿、老年人、免疫功能低下人群疫苗接种效果。
[0003]根据结构和化学组成不同，佐剂可以分为矿物盐类佐剂、乳化剂、脂质体、模式识别受体激动剂和其他类佐剂。
[0004]矿物盐类铝佐剂是最早、应用最广泛的疫苗佐剂，它可以通过形成抗原贮存库和诱导炎症信号来使药效持久，促进抗体的产生。此外，铝佐剂还可以促进Th2型免疫应答，促进APC的抗原摄取，但对Th1型免疫应答的反应不佳，且无法直接激活DC。有关铝盐产生刺激固有免疫的信号仍然存在争议。
[0005]乳化剂，如MF59和AS03已被批准用于人体疫苗，其有优于铝佐剂的佐剂效果，但其免疫刺激潜在分子机制是未知的。
[0006]目前含有脂质体的疫苗，如流感病毒疫苗和甲型肝炎疫苗已被批准。使用脂质体佐剂的流感疫苗Inflexal V在各个年龄组都有较好的免疫原性。但其成本高，高剂量时会产生高毒性，且在静脉给药时因缺乏靶向性会导致手足综合征等不良反应，生产时对工艺、储存要求高，不利于疫苗生产储备。
[0007]但是目前人用佐剂种类很少，除铝佐剂外，目前仅批准了6种人用佐剂。现有佐剂存在成本高、毒副作用大、机制不清晰等问题，且因可选择性低，需要在疫苗佐剂上需要进一步研究更多新型的佐剂来加速其发展。
[0008]SARS
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CoV
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2属于冠状病毒家族，是一种编码包膜和单链RNA的RNA病毒。病毒粒子的结构蛋白包括刺突(S)蛋白、核蛋白(N)、包膜(E)蛋白和细胞膜(M)蛋白。其中，S蛋白作为新型冠状病毒(SARS
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CoV
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2)进入细胞的“钥匙”，主要通过RBD结构域与宿主细胞表面ACE2受体结合，继而感染宿主细胞。结合针对SARS
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CoV相关研究，RBD是一个关键的中和抗体结合区，被证明能够在动物免疫中引起有效的中和抗体反应，因此可以成为重组蛋白疫苗的候选抗原。
[0009]目前针对SARS
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CoV
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2RBD区的核酸成分已经开发出许多疫苗，这些疫苗的设计及制备都相对简单，它们都以结构蛋白为目标，需要特定的佐剂才能有效发挥生物活性，并且随着SARS
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CoV
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2变异的增加和其他冠状病毒的长期威胁，失效风险较高。因此，研发SARS
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CoV
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2下一代疫苗至关重要。

技术实现思路

[0010]人参多糖(Ginseng polysaccharide，GPS)作为中成药已在临床制备成人参多糖注射液、人参多糖口服液，有多年应用基础，毒副作用少见，主要用于肺系疾病慢性阻塞性肺疾病、非小细胞肺癌、慢性心力衰竭、乳腺癌、胃癌等。具有良好的免疫调节功能，并适用于多种肺部相关疾病。本专利技术尝试将人参多糖作为SARS
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CoV
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2RBD抗原的佐剂，进行免疫调节作用研究，进而提供SARS
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CoV
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2疫苗佐剂及其应用，以刺激机体相关免疫细胞的活化并产生抵抗SARS
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CoV
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2的抗体，尽量提升抗体滴度以及延长免疫记忆维持时间。
[0011]为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：
[0012]第一方面，本专利技术提供人参多糖在制备免疫调节产品中的应用。
[0013]优选地，所述免疫调节产品包括免疫调节药品、免疫调节化妆品或免疫调节食品。
[0014]第二方面，本专利技术提供人参多糖作为免疫佐剂在制备疫苗上的应用。
[0015]第三方面，本专利技术提供一种疫苗，包括人参多糖佐剂和蛋白。
[0016]进一步地，所述蛋白选自SARS
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CoV
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2RBD蛋白、SARS
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CoV
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2RBD
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Ferritin蛋白、SARS
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CoV
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2M蛋白、SARS
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CoV
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2E蛋白、SARS
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CoV
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2N蛋白、SARS
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CoV
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2N
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Ferritin蛋白中的至少一种。
[0017]优选地，所述蛋白为SARS
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CoV
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2RBD重组蛋白，具有以下T细胞表位：Peptide 1：VGYQPYRVVVLSFEL，Peptide 2：VRQIAPGQTGKIAD。
[0018]优选地，所述SARS
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CoV
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2RBD重组蛋白的表达载体选自以下质粒中的一种：pET28a、pcDNA3.1、pfastbac、pSecTag、pET22b(+)、PGEX
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6p
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1、pSG5；
[0019]和/或，所述SARS
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CoV
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2RBD重组蛋白通过以下表达系统中的一种表达：大肠杆菌表达系统、昆虫表达系统、酵母表达系统。
[0020]更加优选地，所述SARS
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CoV
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2RBD重组蛋白的表达载体为pET28a；
[0021]和/或，所述表达系统为大肠杆菌；进一步优选地，所述大肠杆菌为E.coli BL21(DE3)菌株。
[0022]优选地，所述SARS
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CoV
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2RBD重组蛋白的纯化方法包括：将SARS
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CoV
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2RBD重组蛋白包涵体通过预装重力柱预纯化后，采用20mM咪唑洗脱液对SARS
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CoV
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2RBD重组蛋白粗品进行多次洗脱，再采用Elution洗脱液进一步进行多次洗脱。
[0023]优选地，所述疫苗给药方式包括口服和皮下注射；更为优选地，所述疫苗的给药方式为皮下注射。
[0024]本专利技术提供一种SARS
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CoV
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2疫苗佐剂，该疫苗佐剂具有毒副作用小、性价比高、可扩大中草药效用价值的优势。该佐剂和SARS
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2RBD重组蛋白共同作用下，有望刺激机体相关免疫细胞的活化并产生抵抗SARS
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CoV
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2的抗体，且抗体的滴度本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.人参多糖在制备免疫调节产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述免疫调节产品包括免疫调节药品、免疫调节化妆品或免疫调节食品。3.人参多糖作为免疫佐剂在制备疫苗上的应用。4.一种疫苗，其特征在于：包括人参多糖和蛋白。5.根据权利要求4所述的疫苗，其特征在于：所述蛋白选自SARS
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CoV
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2RBD蛋白、SARS
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CoV
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2RBD
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Ferritin蛋白、SARS
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2M蛋白、SARS
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CoV
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2E蛋白、SARS
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CoV
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2N蛋白、SARS
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CoV
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2N
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Ferritin蛋白中的至少一种。6.根据权利要求5所述的疫苗，其特征在于：所述蛋白为SARS
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CoV
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2RBD重组蛋白，具有以下T细胞表位：Peptide 1：VGYQPYRVVVLSFEL，Peptide 2：VRQIAPGQTGKIAD。7.根据权利要求6所述的疫苗，其特征在于：所述SARS
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CoV

【专利技术属性】
技术研发人员：张荣信，李冰，张晶，黄垟，冯景，李岩，唐久人，张浩，庾兆安，吴泳棋，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：