抗新型冠状病毒的抗体、检测新型冠状病毒试剂和试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种抗新型冠状病毒的抗体、检测新型冠状病毒试剂和试剂盒，涉及抗体技术领域。本发明专利技术公开的抗新型冠状病毒的抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体对新型冠状病毒的N蛋白的亲和力较好，使用该抗体检测新型冠状病毒具有较好的灵敏度和特异性。本发明专利技术为新型冠状病毒的检测提供了更为优秀的抗体选择。的抗体选择。的抗体选择。

【技术实现步骤摘要】
抗新型冠状病毒的抗体、检测新型冠状病毒试剂和试剂盒
[0001]本申请是针对申请号为：202111315855.X，(专利技术名称为：抗新型冠状病毒的抗体、检测新型冠状病毒试剂和试剂盒，申请日：2021
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08)提出的分案申请。


[0002]本专利技术涉及抗体
，具体而言，涉及一种抗新型冠状病毒的抗体、检测新型冠状病毒试剂和试剂盒。

技术介绍

[0003]新型冠状病毒SARS
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CoV
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2的结构蛋白分为：刺突糖蛋白(S蛋白)、包膜糖蛋白(E蛋白)、膜糖蛋白(M蛋白)和核衣壳蛋白(N蛋白)，这些蛋白包括多个抗原表位。N蛋白与病毒基因组RNA相互缠绕形成病毒核衣壳，在病毒RNA的合成过程中发挥着重要的作用。同时，N蛋白相对保守，在病毒的结构蛋白中所占比例最大，感染早期机体就能产生抗N蛋白的高水平抗体。最后，N蛋白是新型冠状病毒重要的标志蛋白，利用抗原与抗体特异性结合的原理，可通过N蛋白单克隆抗体检测抗原的存在，从而直接证明样本中含有新型冠状病毒，实现新型冠状病毒的检测。
[0004]检测的抗体主要分为IgM和IgG两类。目前对新型冠状病毒的这两类抗体的产生和持续时间尚缺乏系统性研究。通常情况下，IgM抗体产生早，一经感染，快速产生，维持时间短，消失快，血液中检测阳性可反应机体处于急性感染状态，可作为早期感染的指标。与核酸检测方法相比，抗体检测样本为血清或血浆，受样本采样的影响较小，有利于早期诊断和排除可疑病例，同时检测快速、方便。
[0005]目前主要以核酸检测和病毒基因测序为病原学确诊证据，由于采样、操作以及试剂等多方面因素影响，及核酸检测对仪器设备、检测场地及环境条件要求高，存在检测时间长、通量低等缺点。因此，迫切需要研发出一种快速便捷检测试剂盒用于临床检测。因此，抗体检测试剂盒变得更为重要。
[0006]目前SARS
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CoV
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2N蛋白单克隆抗体产品较少，性能存在差异。
[0007]鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0008]本专利技术旨在提供一种抗新型冠状病毒的抗体、检测新型冠状病毒试剂和试剂盒，该抗体可以特异性结合新型冠状病毒的N蛋白，对其具有较高的亲和力，用该抗体检测新型冠状病毒具有较好的灵敏度和特异性。本专利技术为新型冠状病毒的检测提供了更为丰富的抗体选择。
[0009]为了实现上述目的，根据本专利技术的一个方面，提供了一种抗新型冠状病毒或其N蛋白的抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段具有如下互补决定区：
[0010]HCDR1，其包含SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，或由其组成；
[0011]HCDR2，其包含SEQ ID NO.2或21所示的氨基酸序列，或由其组成；
[0012]HCDR3，其包含SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列，或由其组成；
[0013]LCDR1，其包含SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列，或由其组成；
[0014]LCDR2，其包含SEQ ID NO.5或22所示的氨基酸序列，或由其组成；
[0015]LCDR3，其包含SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列，或由其组成。
[0016]进一步地，所述抗体或其功能性片段还具有以下的框架区：
[0017]HFR1氨基酸序列如SEQ ID NO:7、23任一所示，或与其具有至少80％同源性；
[0018]HFR2氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示或与其具有至少80％同源性；
[0019]HFR3氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示或与其具有至少80％同源性；
[0020]HFR4氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示或与其具有至少80％同源性；
[0021]LFR1氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示或与其具有至少80％同源性；
[0022]LFR2氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示或与其具有至少80％同源性；
[0023]LFR3氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示或与其具有至少80％同源性；
[0024]LFR4氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示或与其具有至少80％同源性。
[0025]为了实现上述目的，根据本专利技术的第二个方面，提供了一种抗新型冠状病毒或其N蛋白的抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有HFR1
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HCDR1
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HFR2
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HCDR2
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HFR3
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HCDR3
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HFR4的序列结构，所述轻链可变区区含有LFR1
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LCDR1
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LFR2
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LCDR2
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LFR3
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LCDR3
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LFR4的序列结构，所述HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR 1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列为上述的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列，所述HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4的氨基酸序列为上述的HFR1、HFR2、HFR3、HFR4、LFR1、LFR2、LFR3、LFR4的氨基酸序列。
[0026]为了实现上述目的，根据本专利技术的第三个方面，提供了一种抗新型冠状病毒或其N蛋白的抗体，包括重链和/或轻链，所述重链包括上述的重链可变区和上述的重链恒定区；所述轻链包括上述的轻链可变区和上述的轻链恒定区。
[0027]为了实现上述目的，根据本专利技术的第四个方面，提供了一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括上述的抗体或其功能性片段。
[0028]为了实现上述目的，根据本专利技术的第五个方面，提供了一种检测新型冠状病毒或其N蛋白的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括上述的抗体或其功能性片段或上述的抗体偶联物。
[0029]为了实现上述目的，本专利技术还提供了一种载体、一种重组细胞及一种制备上述抗体或其功能性片段的方法。
附图说明
[0030]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0031]图1为实施例1的抗新型冠状病毒的抗体的还原性SDS
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PAGE的结果。
具体实施方式
[0032]本专利技术提供了一种抗新型冠状病毒或其N蛋白的抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括如下互补决定区：
[0033]HCDR1，其包含SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，或由其组成；
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗新型冠状病毒或其N蛋白的抗体或其功能性片段，其特征在于，包含如下任意组的重链可变区和轻链可变区：1)抗体1：重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:27所示；2)抗体2：重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:25所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:27所示；3)抗体3：重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:24所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:27所示；4)抗体4：重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:27所示；5)抗体5：重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:26所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示；6)抗体6：重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:25所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示；7)抗体7：重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:24所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示；8)抗体8：重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示，轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示。2.一种抗新型冠状病毒或其N蛋白的抗体或其功能性片段，包括HCDR1、HCDR2、HCDR3和LCDR1、LCDR2、LCDR3，其特征在于，所述HCDR1、HCDR2、HCDR3和LCDR1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列分别与权利要求1所述抗体或其功能性片段的HCDR1、HCDR2、HCDR3和LCDR1、LCDR2、LCDR3的氨基酸序列一致；可选地，所述HCDR1、HCDR2、HCDR3和LCDR1、LCDR2、LCDR3由Kabat、Chothia、IMGT、Lesk、AbM或Contact系统定义；可选地，所述HCDR1、HCDR2、HCDR3和LCDR1、LCDR2、LCDR3由Kabat、Chothia、IMGT或Lesk系统定义。3.一种抗新型冠状病毒或其N蛋白的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括如下互补决定区：HCDR1，其由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成；HCDR2，其由SEQ ID NO.2或21所示的氨基酸序列组成；HCDR3，其由SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列组成；LCDR1，其由SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列组成；LCDR2，其由SEQ ID NO.5或22所示的氨基酸序列组成；LCDR3，其由SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列组成。4.根据权利要求3所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还具有以下的框架区：HFR1氨基酸序列如SEQ ID NO:7、23任一所示；HFR2氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；HFR3氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示；
HFR4氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示；LFR1氨基酸序列如SEQ ID NO:11所示；LFR2氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示；LFR3氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示；LFR4氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示；可选地，所述抗体或其功能性片段以KD≤10
‑9M的亲和力结合新型冠状病毒或其N蛋白；可选地，所述抗体或其功能性片段以KD≤3.11
×
10
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10
M的亲和力结合新型冠状病毒或其N蛋白。5.根据权利要求1
‑
4任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；可选地，所述恒定区包括重链恒定区和/或轻链恒定区；可选地，所述重链恒定区选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgM、IgE或IgD的重链恒定区；所述轻链恒定区选自κ型或λ型轻链恒定区；可选地，所述恒定区的种属来源为牛、马、猪、绵羊、山羊、大鼠、小鼠、狗、猫、兔、驴、鹿、貂、鸡、鸭、鹅或人；可选地，所述恒定区的种属来源为小鼠；可选地，所述重链恒定区序列如SEQ ID NO:17、32任一所示或与其具有至少80％同源性，所述轻链恒定区序列如SEQ ID NO:18所示或与其具有至少80％同源性；可选地，所述功...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔鹏，何志强，孟媛，钟冬梅，娄文娟，范凌云，
申请(专利权)人：东莞市朋志生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：