一种朱砂根-山豆根药对指纹图谱及多指标含量测定方法技术

本发明专利技术提供了一种朱砂根

【技术实现步骤摘要】
一种朱砂根
‑
山豆根药对指纹图谱及多指标含量测定方法


[0001]本专利技术属于中药质量控制
，涉及一种朱砂根
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山豆根药对指纹图谱及多指标含量测定方法。

技术介绍

[0002]朱砂根(Ardisiae Crenatae Radix)为紫金牛科植物朱砂根Ardisia crenata Sims的干燥根，味微苦、辛，性平，长于解毒消肿，活血止痛，祛风除湿，临床上主要用于咽喉肿痛，风湿痹痛，跌打损伤；山豆根(Sophorae Tonkinensis Radix et Rhizoma)为豆科植物越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根和根茎，味苦，性寒，长于清热解毒，消肿利咽，临床上主要用于火毒蕴结，乳蛾喉痹，咽喉肿痛，齿龈肿痛，口舌生疮。朱砂根、山豆根在云香祛风止痛酊、开喉剑喷雾剂等制剂中均有应用，朱砂根被苗族人民奉为喉科圣药；山豆根解咽喉肿痛之要药，两者合用，以增强利咽之效。在现代药理研究表明，朱砂根中主要含有香豆素类、皂苷类、黄酮类、挥发油等多种化学成分，具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、保肝、抗生育等药理作用；山豆根中主要含有生物碱、黄酮、木脂素等化学成分，具有抗肿瘤、抗病毒等多方面药理活性。
[0003]中药指纹图谱作为一种综合的可量化的鉴定手段，其信息量大、特征性强、整体性、模糊性等特点能全面地反映中药所含化学成分的种类和数量，目前已成为符合中药特点的质量控制模式之一，并在中药质量控制上的应用愈加广泛。因此本专利技术对朱砂根、山豆根药材单煎液和合煎液的指纹图谱变化进行定性分析及指标成分含量变化研究，探讨配伍前后化学成分的变化，可用于朱砂根
‑
山豆根药对的质量控制及为后续相关研究奠定基础。因此，有必要建立一种朱砂根
‑
山豆根药对的质量质控方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种朱砂根
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山豆根药对指纹图谱的建立方法。
[0005]本专利技术的另一目的在于提供一种朱砂根
‑
山豆根药对的多指标含量测定方法，以提升质量控制水平。
[0006]为了实现本专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案和步骤实现：
[0007]一种朱砂根
‑
山豆根药对指纹图谱的建立方法，所述方法HPLC
‑
DAD指纹图谱检测法，具体步骤如下：
[0008](1)对照品溶液的制备：精密称取没食子酸、苦参碱、氧化苦参碱、岩白菜素、三叶豆紫檀苷适量，分别置于10mL量瓶中，加入溶剂充分溶解后定容，制成质量浓度1
‑
2mg
·
mL
‑1的各对照品贮备溶液；精密量取各对照品贮备溶液，精密量取各对照品贮备溶液适量，用溶剂稀释制成混合对照品溶液；
[0009](2)供试品溶液的制备：
[0010]单煎冻干粉制备：分别精密称取10批朱砂根、山豆根饮片粉末各10g，分别置圆底烧瓶内，加入6
‑
10倍量水浸泡3
‑
5h，煎煮2次，第一次煎煮2
‑
3h，第2次煎煮1
‑
2h，合并两次煎
煮液，用纱布滤过，浓缩，冷冻干燥，即得朱砂根、山豆根冻干粉；
[0011]合煎冻干粉制备：分别精密称取10批朱砂根、山豆根饮片粉末各10g，混合，按单煎冻干粉制备方法操作，即得朱砂根、山豆根合煎冻干粉；
[0012]取单煎冻干粉0.05g(相当于生药量0.325g)、合煎冻干粉约0.1g(相当于生药量0.75g)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液20mL，密塞，称定质量，超声处理30min，放冷，用甲醇溶液补足减失的质量，摇匀，取上清液过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，即得供试品溶液；
[0013](3)指纹图谱的建立：采用高效液相色谱仪对对照品溶液和供试品溶液进行检测，记录色谱图，建立朱砂根
‑
山豆根药对指纹图谱；其色谱条件如下：
[0014]色谱柱：采用Agilent InfinityLab Poroshell HPH C18色谱柱，规格为250nm
×
4.6nm，4μm；流动相A乙腈，流动相B为0.2％磷酸溶液；梯度洗脱；柱温：30℃；流速：0.7mL
·
min
‑1；检测波长为210nm；柱温为30℃；进样量为10μL。
[0015]本专利技术步骤(1)和步骤(2)中所述甲醇溶液为10％甲醇。
[0016]优选的，本专利技术步骤(2)中所述加入8倍量水浸泡4h，煎煮2次，第一次煎煮2h，第2次煎煮1h。
[0017]本专利技术步骤(2)中所述粉末为饮片粉碎过二号筛；所述纱布为8层纱布。
[0018]本专利技术步骤(2)中所述浓缩为：将浓缩液置70℃水浴中浓缩至近干，得浓缩液。
[0019]本专利技术步骤(2)中所述冷冻干燥的条件为：将浓缩近干的浓缩液置
‑
80℃环境下预冻8h后进行冷冻干燥，即得朱砂根、山豆根冻干粉。
[0020]本专利技术步骤(2)中所述超声处理的条件为：功率500W，频率40kHz。
[0021]本专利技术步骤(3)中所述梯度洗脱的程序为：0～14min，5％A；14～35min，5％～30％A；35～40min，30％～50％A；40～50min，50％～60％A。
[0022]一种朱砂根
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山豆根药对的多指标含量测定方法，包括如下步骤：
[0023](1)对照品溶液的制备：精密称取没食子酸、苦参碱、氧化苦参碱、岩白菜素、三叶豆紫檀苷适量，分别置于10mL量瓶中，加入溶剂充分溶解后定容，制成质量浓度1
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2mg
·
mL
‑1的各对照品贮备溶液；精密量取各对照品贮备溶液，精密量取各对照品贮备溶液适量，用溶剂稀释制成混合对照品溶液；
[0024](2)供试品溶液的制备：
[0025]单煎冻干粉制备：分别精密称取10批朱砂根、山豆根饮片粉末各10g，分别置圆底烧瓶内，加入6
‑
10倍量水浸泡3
‑
5h，煎煮2次，第一次煎煮2
‑
3h，第2次煎煮1
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2h，合并两次煎煮液，用纱布滤过，浓缩，冷冻干燥，即得朱砂根、山豆根冻干粉；
[0026]合煎冻干粉制备：分别精密称取10批朱砂根、山豆根饮片粉末各10g，混合，按单煎冻干粉制备方法操作，即得朱砂根、山豆根合煎冻干粉；
[0027](3)含量测定：采用高效液相色谱仪对对照品溶液和供试品溶液进行检测，计算含量；其色谱条件如下：
[0028]色谱柱：采用Agilent InfinityLab Poroshell HPH C18色谱柱，规格为250nm
×
4.6nm，4μm；流动相A乙腈，流动相B为0.2％磷酸溶液；梯度洗脱；柱温：30℃本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种朱砂根
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山豆根药对指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述方法采用HPLC
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DAD指纹图谱检测法，包括如下步骤：(1)对照品溶液的制备：精密称取没食子酸、苦参碱、氧化苦参碱、岩白菜素、三叶豆紫檀苷适量，分别置于容量瓶中，加入甲醇溶液充分溶解后定容，得各对照品贮备溶液；精密量取各对照品贮备溶液适量，用甲醇溶液稀释制成混合对照品溶液；(2)供试品溶液的制备：单煎冻干粉制备：分别精密称取10批朱砂根、山豆根饮片粉末各10g，分别置圆底烧瓶内，加入6
‑
10倍量水浸泡3
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5h，煎煮2次，第一次煎煮2
‑
3h，第2次煎煮1
‑
2h，合并两次煎煮液，用纱布滤过，浓缩，冷冻干燥，即得朱砂根、山豆根冻干粉；合煎冻干粉制备：分别精密称取10批朱砂根、山豆根饮片粉末各10g，混合，按单煎冻干粉制备方法操作，即得朱砂根、山豆根合煎冻干粉；取单煎冻干粉0.05g、合煎冻干粉0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液20mL，密塞，称定质量，超声处理30min，放冷，用甲醇溶液补足减失的质量，摇匀，取上清液过0.22μm微孔滤膜，取续滤液，即得供试品溶液；(3)指纹图谱的建立：采用高效液相色谱仪对对照品溶液和供试品溶液进行检测，记录色谱图，建立朱砂根
‑
山豆根药对指纹图谱；其色谱条件如下：色谱柱：采用Agilent InfinityLab Poroshell HPH C18色谱柱，规格为250nm
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4.6nm，4μm；流动相A乙腈，流动相B为0.2％磷酸溶液；梯度洗脱；柱温：30℃；流速：0.7mL
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‑1；检测波长为210nm；柱温为30℃；进样量为10μL。2.根据权利要求1所述的朱砂根
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山豆根药对指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中所述甲醇溶液为10％甲醇。3.根据权利要求1所述的朱砂根
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山豆根药对指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(2)中所述加入8倍量水浸泡4h，煎煮2次，第一次煎煮2h，第2次煎煮1h。4.根据权利要求1所述的朱砂根
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山豆根药对指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(2)中粉末为饮片粉碎过二号筛；所述纱布过滤为用8层纱布过滤。5.根据权利要求1所述的朱砂根
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山豆根药对指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤(2)中所述浓缩的条件为：将浓缩液置70℃水浴中浓缩至近干，得浓缩液。6.根据权利要求1所述的朱砂根
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【专利技术属性】
技术研发人员：俸婷婷，陈贇，石慧，周英，张丽艳，刘雄伟，刘畅，张金鹤，
申请(专利权)人：贵州中医药大学，
类型：发明
国别省市：