本发明专利技术公开了一种纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法。将纤维素酶的酶解技术和超声波提取技术应用于羊肚菌提取物的制备，羊肚菌经纤维素酶酶解后，再经超声波热水提取，提取物的得率显著提高，多糖含量增加，抗氧化活性也显著提高。本发明专利技术提供的纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，较直接采用热水提取法相比，羊肚菌提取物的得率可以提高18.8％，多糖含量增加16.7％，提取物的抗氧化活性也有显著提高。抗氧化活性也有显著提高。
【技术实现步骤摘要】
一种纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法
(一)
[0001]本专利技术属于生物技术应用领域，具体涉及一种纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法。
(二)
技术介绍
[0002]羊肚菌，又称羊肚子、羊肚蘑、羊雀菌、包谷菌等，是羊肚菌科(Morchellaceae)真菌羊肚菌(Morchella esculenta)、小顶羊肚菌(Morchella angusticeps)、尖顶羊肚菌(Morchella conica)、粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)和小羊肚菌(Morchella deliciosa)等的子实体。羊肚菌多生于潮湿的阔叶林地上，菌盖近球形、卵形至椭圆形，因其菌盖表面常有不规则凹陷和褶皱，且形似羊肚而得名。
[0003]羊肚菌是我国四大珍贵食用菌之一，其风味独特，富含蛋白质、多糖、叶酸、氨基酸、多酚、三萜和维生素等多种营养成分，含有的人体必需氨基酸种类齐全。羊肚菌最早收录于《本草纲目》，中医认为其性平，味甘寒，无毒，具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补脑、提神之功能。现代本草专著《中华本草》和《新华本草纲要》对羊肚菌药理作用描述为味甘、性平，和胃消食，化痰理气，可用于消化不良、痰多气短等疾病的治疗。近年的研究表明，羊肚菌表现出显著的抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳、抑菌、降血脂、护肝、促进胃肠蠕动、提高免疫力等功效，具有极高的营养保健价值和药用价值。古代野生羊肚菌稀少，属于珍惜食品，近些年来，由于人工栽培技术逐渐成熟，市场上供应的羊肚菌增多，已成为人们餐桌上的普通菜肴。羊肚菌提取物含有丰富的营养和活性成分，具有良好的营养和保健功效，添加在饮料等食品中，可以增加它们的营养功效，市场已有羊肚菌保健饮料销售。
[0004]目前，有不少关于羊肚菌提取物制备方法的报道，按提取使用的溶剂，方法可以分为两类，即乙醇提取法和水提取法。乙醇提取得到的主要是醇溶性物质，包括多酚、三萜和甾醇等，提取的成分较少，产品适用于化妆品中使用；水提取得到的主要是水溶性物质，主要是多糖，以及多肽、低聚糖和氨基酸等，产品适合使用在食品领域。在这两种方法的基础上，有辅以超声波或微波强化提取，能提高提取物的得率。超声辅助提取的设备要求低，不会显著增加提取成本，但对提高提取得率的效果不够理想；微波辅助提取的耗时短、效率高，但由于内部高温，往往会导致提取的活性成分结构受到破坏。
[0005]近年来，酶解技术在食用菌和植物的活性成分的提取中有广泛应用，它是用纤维素酶、果胶酶或蛋白酶等，在适宜的条件下水解食用菌或植物原料，其细胞壁被水解，从而有利于胞内活性成分在提取时溶出。酶解辅助法不仅能够显著提高提取得率，条件温和，不会破坏提取物中活性成分的结构；而且，酶解作用可以降低多糖的分子量，以及将一些糖苷转化为苷元，提取物的生物活性会更好。
[0006]为了提高羊肚菌提取物的得率和抗氧化活性，本专利技术用纤维素酶酶解羊肚菌后，再使用超声波热水提取，提取物的得率、多糖含量和抗氧化活性可以显著提高。
(三)
技术实现思路
[0007]本专利技术目的是提供一种纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，将纤维素酶的酶解技术和超声波提取技术应用于羊肚菌提取物的制备，羊肚菌经纤维素酶酶解后，再经超声波热水提取，提取物的得率显著提高，多糖含量增加，抗氧化活性也显著提高。
[0008]本专利技术采用的技术方案是：
[0009]本专利技术提供一种纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，所述方法为：(1)羊肚菌经干燥、切片和粉碎，加入去离子水和纤维素酶，搅拌均匀，构成羊肚菌酶解体系；(2)羊肚菌酶解体系于水温为35
–
45℃中，酶解4
–
5h后，转入沸水浴中提取50
–
60min，再于超声波80
–
90℃提取25
–
35min，趁热过滤，收集滤液，得羊肚菌水提液；(3)羊肚菌水提液经减压浓缩，真空干燥，粉碎，获得羊肚菌提取物。
[0010]进一步，步骤(1)所述的羊肚菌是羊肚菌科(Morchellaceae)真菌羊肚菌(Morchella esculenta)、小顶羊肚菌(Morchella angusticeps)、尖顶羊肚菌(Morchella conica)、粗柄羊肚菌(Morchella crassipes)或小羊肚菌(Morchella deliciosa)等的子实体。羊肚菌经85℃烘干后，切成薄片，粉碎过60目筛。
[0011]进一步，步骤(1)所述的去离子水加入体积是按羊肚菌粉质量计的25
–
35mL/g[即料液比为1:25
–
1:35(g:mL)]。
[0012]进一步，步骤(1)所述的纤维素酶加入量是按羊肚菌粉质量计的8％
–
10％；所述的纤维素酶单位酶活为100U/mg。
[0013]进一步，步骤(2)所述超声波频率为40kHz，功率是160
–
200W。
[0014]进一步，步骤(3)从羊肚菌水提液回收羊肚菌提取物的方法为：羊肚菌水提液于55℃、
–
0.1MPa条件下减压浓缩至原去离子水体积的1/20
–
1/25，获得羊肚菌水提浓缩物，浓缩物于60℃、
–
0.1MPa真空干燥，粉碎，得羊肚菌提取物。
[0015]进一步，本专利技术所述的纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，具体按以下步骤操作：
[0016](1)新鲜羊肚菌清洗干净，经85℃烘干后，切成薄片，粉碎后过60目筛，得羊肚菌粉；
[0017](2)羊肚菌粉于烧杯中，加入羊肚菌粉质量计的25
–
35mL/g去离子水[即料液比为1:25
–
1:35(g:mL)]，加入按羊肚菌粉质量计8％
–
10％的纤维素酶，搅拌均匀，构成羊肚菌酶解体系；
[0018](3)羊肚菌酶解体系于水温为35
–
45℃中，酶解4
–
5h，转入沸水浴中提取50
–
60min，再于功率为160
–
200W、温度80
–
90℃超声波(频率为40kHz)中，提取25
–
35min，趁热过滤，收集滤液，得羊肚菌水提液；
[0019](4)羊肚菌水提液于55℃、
–
0.1MPa条件下减压浓缩至原去离子水体积的1/20
–
1/25，获得羊肚菌水提浓缩物；
[0020](5)羊肚菌水提浓缩物于60℃、
–
0.1MPa真空干燥，粉碎，得羊肚菌提取物。
[0021]与现有技术相比，本专利技术的有益效果主要体现在：本专利技术羊肚菌先经过纤维素酶酶解，纤维素酶能够水解羊肚菌细胞壁中的纤维素，使细胞壁破损；再用超声波热水提取，超声波的空穴效应能增强物质分子的运动频率和速度，两者联合作用有助于细胞壁中本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，其特征在于，所述方法为：(1)羊肚菌经干燥、切片和粉碎，加入去离子水和纤维素酶，搅拌均匀，构成羊肚菌酶解体系；(2)羊肚菌酶解体系于水温为35
–
45℃中，酶解4
–
5h后，转入沸水浴中提取50
–
60min，再于超声波80
–
90℃提取25
–
35min，趁热过滤，收集滤液，得羊肚菌水提液；(3)羊肚菌水提液经减压浓缩，真空干燥，粉碎，获得羊肚菌提取物。2.如权利要求1所述纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，其特征在于，步骤(1)羊肚菌经85℃烘干后，切成薄片，粉碎过60目筛。3.如权利要求1所述纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，其特征在于，步骤(1)所述的去离子水加入体积是按羊肚菌粉质量计的25
–
35mL/g。4.如权利要求1所述纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，其特征在于，步骤(1)所述的纤维素酶加入量是按羊肚菌粉质量计的8％
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10％；所述的纤维素酶单位酶活为100U/mg。5.如权利要求1所述纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，其特征在于，步骤(2)所述超声波频率为40kHz，功率是160
–
200W。6.如权利要求1所述纤维素酶协同超声波辅助制备羊肚菌提取物的方法，其特征在于，步骤(3)从羊肚菌水...
【专利技术属性】
技术研发人员：韩彦超，刘裕鑫，唐静，傅一真，邱幸炜，梅建凤，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：
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