一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法及其应用，所述荧光探针由甲基单羟基葫芦[6]脲(OMeCB[6](OH))与吡啶染料分子(G5)制成，其中OMeCB[6](OH)与G5的摩尔比为1：1，应用于对溶液中的谷氨酸和赖氨酸进行高灵敏检测，体现了探针的特异性、选择性，本发明专利技术检测氨基酸不仅利于复杂微观系统的分析，并且有灵敏性高、检测效率高、便携性好和检测成本低等优点；其次相较于传统仪器检测，样品处理简单方便，可以实时检测出结果，因此检测效率更高、检测成本更低。检测成本更低。检测成本更低。

【技术实现步骤摘要】
一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法及其应用


[0001]本专利技术涉及荧光探针
，尤其涉及一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]氨基酸是蛋白质/肽键的关键成分，也是生命系统的重要组成部分，一直备受关注。目前自然界中存在300多种氨基酸，其中天然氨基酸有20种，它们被应用在食品、医药和化妆品等行业。谷氨酸是增强风味最强的氨基酸，不但具有鲜味，而且也具有提高并改善风味的特点；谷氨酸可以作为人体神经系统内突触的重要神经递质，涉及脑内很多重要生理功能。而赖氨酸可以刺激胃蛋白酶和胃酸的分泌，有利于提高人们的食欲，同时，赖氨酸也能提高人体对钙的吸收，从而促进生长发育。
[0003]因此实现对谷氨酸和赖氨酸的高灵敏检测显得尤为重要，而荧光检测方法作为一种新型检测方法，具有灵敏度高、选择性好、操作方便以及实时检测的优点而备受青睐。研究新型的用于检测溶液中谷氨酸或赖氨酸的荧光探针及荧光探针检测方法很有必要。此外，具有扭曲的分子内电荷转移(Twisted Intramolecular Charge Transfer(TICT))特性的荧光探针在低粘度的溶剂或者聚集状态会发生荧光淬灭现象，大幅降低了探针光稳定性，而抑制TICT的发生则能够显著提高荧光强度和光稳定性。利用这种特性研发了许多荧光检测器，为荧光分析检测提供了新的思路和方案。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于解决现有技术中存在的技术问题，提供一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法及其应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供的技术方案是：一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法，该荧光探针由甲基单羟基葫芦[6]脲与吡啶染料G5分子制成，具体包括以下步骤：
[0006](1)取OMeCB[6](OH)加蒸馏水溶解，得溶液A；
[0007](2)取G5加蒸馏水溶解，得溶液B；
[0008](3)将溶液A和溶液B混合后，在常温下反应1min，加蒸馏水稀释，即得目标荧光探针。
[0009]优选的，所述溶液A中OMeCB[6](OH)的浓度为2.0
×
10
‑3mol/L；所述溶液B中G5的浓度为2.0
×
10
‑3mol/L。
[0010]优选的，所述步骤(3)中将溶液A和溶液B按照甲基单羟基葫芦[6]脲与吡啶染料G5分子的摩尔比为1：1的比例进行混合，加蒸馏水稀释至总浓度为1
×
10
‑5mol/L。
[0011]本专利技术还公开了一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针的应用，其特征在于：包括上述任意一项所述的一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法制备的目标荧光探针在检测溶液中谷氨酸和赖氨酸的应用。
[0012]优选的，所述目标荧光探针应用在溶液中谷氨酸和赖氨酸的检测方法包括以下步骤：
[0013]1)向目标荧光探针溶液中加入不同摩尔比的谷氨酸标准溶液或赖氨酸标准溶液，放置搅拌10s；
[0014]2)以固定激发波长450nm，进行荧光发射光谱测定，分别测定加入不同摩尔比的谷氨酸或赖氨酸的探针溶液的荧光发射光谱；
[0015]3)根据荧光发射强度的变化特征检测谷氨酸或赖氨酸。
[0016]优选的，所述谷氨酸和赖氨酸标准溶液的浓度均为1
×
10
‑2mol/L。
[0017]优选的，所述谷氨酸检和赖氨酸的检测限计算方法包括以下步骤：
[0018]<1>向目标荧光探针溶液中加入不同浓度的谷氨酸标准溶液或赖氨酸标准溶液，放置搅拌10s；
[0019]<2>以固定激发波长450nm，进行荧光发射光谱测定，分别测定加入不同浓度的谷氨酸或赖氨酸的探针溶液的荧光发射光谱；
[0020]<3>取荧光发射谱620nm处荧光发射强度拟合计算检测限
[0021]优选的，所述的荧光探针检测谷氨酸的检测限为4.20
×
10
‑7mol/L，所述的荧光探针检测赖氨酸的检测限为2.98391
×
10
‑5mol/L。
[0022]本专利技术有益效果：
[0023]1.本专利技术是通过利用OMeCB[6](OH)和G5分子形成超分子络合物，当检测到谷氨酸时，谷氨酸与荧光探针分子中的OMeCB[6](OH)络合，从而形成新的络合物，使部分客体分子G5从葫芦脲空腔脱离，导致探针的荧光减弱；当检测到赖氨酸时，碱性赖氨酸进入到OMeCB[6](OH)的疏水空腔后，OMeCB[6](OH)与G5之间的化学环境发生变化，荧光基团G5周围环境疏水性降低，极性减小，导致探针的荧光发生增强作用。因此，可以简单、快速、灵敏的对溶液中的谷氨酸和赖氨酸进行检测。
[0024]2.本专利技术与传统的仪器分析检测方法如高效液相色谱和氨基酸分析仪等方法相比，样品处理简单，检测方便，可以实时检测，检测的成本大大降低。本专利技术探针能对溶液中的谷氨酸或赖氨酸进行检测，能实现单探针对氨基酸高度选择的检测，能够达到检测快速测定和实时检测的有益效果。
附图说明
[0025]此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本专利技术的一部分，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。
[0026]图1实施例1中摩尔比法得到的紫外吸收光谱图；
[0027]图2实施例1中等摩尔连续变换法得到的紫外吸收光谱图；
[0028]图3实施例2中测定不同摩尔比的谷氨酸标准溶液的荧光光谱图；
[0029]图4实施例3中测定不同摩尔比的赖氨酸标准溶液的荧光光谱图；
[0030]图5实施例4中荧光探针溶液对谷氨酸的检测限；
[0031]图6实施例5中荧光探针溶液对赖氨酸的检测限。
具体实施方式
[0032]本部分将详细描述本专利技术的具体实施例，本专利技术之较佳实施例在附图中示出，附图的作用在于用图形补充说明书文字部分的描述，使人能够直观地、形象地理解本专利技术的每个技术特征和整体技术方案，但其不能理解为对本专利技术保护范围的限制。
[0033]在本专利技术的描述中，需要理解的是，涉及到方位描述，例如上、下、前、后、左、右等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本专利技术和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本专利技术的限制。
[0034]在本专利技术的描述中，若干的含义是一个或者多个，多个的含义是两个以上，大于、小于、超过等理解为不包括本数，以上、以下、以内等理解为包括本数。如果有描述到第一、第二只是用于区分技术特征为目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法，其特征在于：该荧光探针由甲基单羟基葫芦[6]脲与吡啶染料G5分子制成，具体包括以下步骤：(1)取OMeCB[6](OH)加蒸馏水溶解，得溶液A；(2)取吡啶染料G5加蒸馏水溶解，得溶液B；(3)将溶液A和溶液B混合后，在常温下反应1min，加蒸馏水稀释，即得目标荧光探针。2.根据权利要求1所述的一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法，其特征在于：所述溶液A中OMeCB[6](OH)的浓度为2.0
×
10
‑3mol/L；所述溶液B中G5的浓度为2.0
×
10
‑3mol/L。3.根据权利要求1所述的一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中将溶液A和溶液B按照OMeCB[6](OH)与G5分子的摩尔比为1：1的比例进行混合，加蒸馏水稀释至总浓度为1
×
10
‑5mol/L。4.一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针的应用，其特征在于：包括权利要求1
‑
3任意一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针制备方法制备的目标荧光探针在检测溶液中谷氨酸和赖氨酸的应用。5.根据权利要求4所述的一种基于OMeCB[6](OH)/G5的荧光探针的应用，其特征在于：所述目标荧光探针应用在溶液中谷氨酸和赖氨酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：申芳芳，林鑫，李佳玉，陈建涛，程启远，吴昀，
申请(专利权)人：南昌航空大学，
类型：发明
国别省市：