评估肝脏手术后肝衰竭风险或再生状况的预测模型及其应用制造技术

本发明专利技术提供了评估肝脏手术后肝衰竭风险或再生状况的预测模型及其应用。首次揭示一组用于肝脏手术后肝功能衰竭风险预后或肝脏再生状态预后的标志物组合及其应用。所述标志物包括VEGFA(血管内皮生长因子A)和PEDF(人色素上皮衍生因子)。本发明专利技术也建立了以所述基因为核心的风险模型，进而获得风险评分，为肝脏手术的预后提供了可靠的方法。本发明专利技术还公开了用于所述预后的试剂盒。于所述预后的试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
评估肝脏手术后肝衰竭风险或再生状况的预测模型及其应用


[0001]本专利技术属于疾病预测模型领域；更具体地，本专利技术涉及血清VEGFA和PEDF在评估肝脏手术后肝衰风险或再生状态中的应用。

技术介绍

[0002]大部肝切除术是多发或大型肝脏病灶(包括各种原发或者继发性的肝脏良恶性肿瘤以及造成胆汁引流不畅的肝内胆管结石等)患者的主要选择，是除肝移植外，最有可能获得疾病治愈的治疗方式。尽管近年来围手术期处理技术的创新和进步极大提高了手术安全性，但肝切除术后的死亡率依然高达2
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10％，其中，切除4个肝段以上的扩大肝切除术死亡率甚至达到30％。肝切除术后肝功能衰竭(PHLF)是导致肝切除术患者治疗成本增加、住院时间延长和预后不良的主要原因。一项纳入了1170例接受肝切除术病人的回顾性研究发现，70％的死亡病人满足PHLF的诊断，其中53％的死亡由PHLF直接引起。这说明，PHLF是肝切除术后死亡的最主要原因，降低PHLF的发生率对于提高肝切除术的安全性至关重要。
[0003]对于PHLF的诊断，目前最常用的标准包括：1)50
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50标准，即肝切除术后第5天凝血酶原指数<50％(INR>1.7)且血清总胆红素>50μmol/L(3mg/dL)则诊断为PHLF；2)峰值胆红素>7mg/dL标准，即术后5天内，血清总胆红素峰值>7mg/dL则诊断为PHLF，以及3)ISGLS标准，即在排除胆道梗阻的情况下，术后5天或5天以后总胆红素和凝血酶原指数大于术前则诊断为PHLF。然而，以上标准都是基于手术后第5天或5天后的临床变量进行评估。而术后早期干预可以极大地减轻PHLF的严重程度，降低PHLF的发生率，一旦错过干预的窗口期，PHLF的治疗难度和严重程度都会大大增加。这些“迟到”的标准既不能在术前对肝衰的高风险人群进行准确识别和预警，也不能在术后及时判定是否需要对肝功能进行保护性干预，这使得这些临床诊断标准的应用价值大打折扣。因此，如果在术前或者术后早期就能对患者PHLF的发生风险进行准确的评估预测，就可以帮助临床医生谨慎选择手术人群，及时改进临床决策并最终改善患者肝切除术的预后，具有非常现实的临床意义。
[0004]对PHLF发生风险进行预测的关键环节是找出PHLF的危险因素。此处要注意区分肝功能评估与PHLF预测的区别，以应用最为广泛的肝功能评估模型Child
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Pugh评分为例，它可以反映检查时当前肝脏生理功能水平，但并不能对之后PHLF是否发生做出预判，因此，不具有PHLF的预测价值。但是，以反映当前肝功能状态的评估系统为基础，将其作为一个变量，结合其它病理生理因素，可以对之后一段时间内PHLF发生风险作出预测。本处所说的预测模型即指上述预测系统，其中应用最为广泛的为以下几种：
[0005](1)终末期肝病(MELD)评分模型：MELD评分是以术前肌酐(Cr)、国际标准化比值(INR，反映凝血功能)和总胆红素(TBIL)来评价慢性肝病患者肝功能储备及预后的评分系统，之后其应用范围进一步扩展至肝脏手术后肝衰风险的预测(Rahnemai
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Azar AA等；J Clin Transl Hepatol 2018；6:97
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104)。MELD评分的计算公式为：MELD＝3.78
×
ln[TBIL(mg/dl)]+11.2
×
ln[INR]+9.57
×
ln[Cr(mg/dl)]+6.43。
[0006](2)白蛋白
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胆红素(ALBI)分级：ALBI分级是通过白蛋白和胆红素来评估肝癌患者
Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy，ALPPS)、射频消融术、微波消融术、冰冻消融术、肝动脉介入栓塞化疗、肝动脉介入栓塞放疗、立体定向放疗。
[0015]在一种或多种优选实施方式中，测定VEGFA和PEDF含量的人体组织包括肝组织、全血和血浆。
[0016]在一种或多种优选实施方式中，所述的表达包括核酸(DNA如gDNA或cDNA，RNA)水平的表达，转录本水平的表达，蛋白水平的表达。还包括：蛋白翻译后各种修饰对其活性影响的水平以及对其配受体结合传递相关信号的任何调控。
[0017]在一种或多种优选实施方式中，所述标志物包括蛋白水平的VEGFA和PEDF蛋白，或它们的片段；所述片段是特异性的，其足以将VEGFA和PEDF蛋白与其它分子进行区分。
[0018]在一种或多种优选实施方式中，所述检测系统包括(但不限于)：检测试剂、试剂盒或检测装置，用于检测VEGFA和PEDF的表达水平或存在量；较佳地还包括用于检测总胆红素存在量的检测试剂、试剂盒或检测装置。
[0019]在一种或多种优选实施方式中，所述检测试剂包括(但不限于)：免疫检测试剂(如ELISA试剂，抗体)、测序试剂、PCR检测试剂。
[0020]在一种或多种优选实施方式中，所述试剂盒中包括所述的检测试剂。
[0021]在一种或多种优选实施方式中，所述检测装置包括(但不限于)：免疫检测试剂盒(如ELISA试剂盒，携带抗体的杂交板等)、测序仪器、芯片、探针组(模块)、引物探针组(模块)或电泳装置。
[0022]在一种或多种优选实施方式中，所述VEGFA和PEDF的表达水平/存在量为血清中的表达水平/存在量；较佳地，根据血清中VEGFA和PEDF的数学变形变量SPVI＝log(血清PEDF/血清VEGFA)进行分析。
[0023]在一种或多种优选实施方式中，将所述数学变形变量SPVI结合总胆红素(Total bilirubin)指标、肝硬化(Cirrhosis)指标、年龄(Age)指标和术中出血(Blood Loss)指标进行分析。
[0024]在一种或多种优选实施方式中，所述的VEGFA和PEDF水平，除了其自身的绝对水平或上述数学变形变量SPVI以外，还包括这两者的其它类型的数学变形，包括但不限于加减法变换，比值变换，对数变换，平方/开方变换以及以上方法的联合变换。
[0025]在一种或多种优选实施方式中，所述分析方法包括：
[0026](a)对于待测样本，测定其VEGFA和PEDF的表达，利用如下风险评分公式进行风险分析或评分：
[0027]PHLF风险得分＝41.7*log((血清PEDF/血清VEGFA)
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4)+36*肝硬化(yes＝1,no＝0)+71*术中出血(<400＝0,≥400＝1)+32*总胆红素(<17.1＝0,≥17.1＝1)+29.7*年龄(<60＝0,≥60＝1)；
[0028](b)提供阈值；
[0029](c)将(a)的结果与(b)的阈值进行比较，获得检测结果；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.标志物组合在制备肝脏手术后肝功能衰竭风险预后或肝脏再生状态预后的检测系统中的应用，所述标志物组合包括：VEGFA和PEDF。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，根据所述标志物组合的表达水平或存在量，进行选自下组的应用：预测或评估肝功能衰竭的发生风险；和/或预测或评估肝功能衰竭的严重程度；和/或预测或评估肝再生状态；和/或预测或评估肝功能恢复程度。3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，根据VEGFA和PEDF的表达水平/存在量：若VEGFA表达水平/存在量显著高且PEDF表达水平/存在量显著低、则表明该肝脏手术后肝功能衰竭风险预后或肝脏再生状态预后好；若VEGFA表达水平显著低且PEDF表达水平/存在量显著高、则表明该肝脏手术后肝功能衰竭风险预后或肝脏再生状态预后预后差。4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，在应用时，所述标志物组合与临床总胆红素指标、肝硬化指标、年龄指标和术中出血指标组合分析。5.如权利要求1
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4任一所述的应用，其特征在于，所述检测系统包括：检测试剂、试剂盒或检测装置，用于检测VEGFA和PEDF的表达水平或存在量；较佳地还包括用于检测总胆红素存在量的检测试剂、试剂盒或检测装置；较佳地，所述检测试剂包括：免疫检测试剂、测序试剂、PCR检测试剂；较佳地，所述试剂盒中包括所述的检测试剂；较佳地，所述检测装置包括：免疫检测试剂盒、测序仪器、芯片、探针组、引物探针组或电泳装置。6.如权利要求1
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4任一所述的应用，其特征在于，所述VEGFA和PEDF的表达水平/存在量为血清中的表达水平/存在量；较佳地，根据血清中VEGFA和PEDF的数学变形变量SPVI＝log(血清PEDF/血清VEGFA)进行分析；更佳地，将所述数学变形变量SPVI结合总胆红素指标、肝硬化指标、年指标和术中出血指标进行分析。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，分析方法包括：(a)对于待测样本，测定其VEGFA和PEDF的表达，利用如下风险评分公式进行风险分析或评分：PHLF风险得分＝41.7*log((血清PEDF/血清VEGFA)
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4)+36*肝硬化(ye...

【专利技术属性】
技术研发人员：王红阳，陈瑶，沈皓，徐莹，魏雅婷，刘怡恬，邢茂迎，
申请(专利权)人：中国人民解放军海军军医大学第三附属医院，
类型：发明
国别省市：