一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸及其制备方法技术

技术编号:38434674 阅读:21 留言:0更新日期:2023-08-11 14:20
本发明专利技术公开了一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸及其制备方法,属于HPV检测技术领域,所述试纸由空白试纸经测试液浸泡5~10分钟后烘干得到;所述测试液包括磷钨酸钠试剂液、酸性缓冲溶液、屏蔽试剂液和HPVC1蛋白培养基;本发明专利技术的基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸,通过试纸可以对HPV病毒的感染情况进行检测,个人可以通过个体的持续性检测,判断尿液中还原物的梯度变化。由于尿液中还原物梯度的变化与患者病情有高度的吻合性,为HPV病毒感染的自愈性、治疗必要性和治疗后的恢复情况提供科学准确的判断依据。断依据。断依据。

【技术实现步骤摘要】
一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸及其制备方法


[0001]本专利技术涉及HPV检测
,具体说是一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸及其制备方法。

技术介绍

[0002]HPV(人乳头瘤病毒)是一种球形DNA病毒,属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属,能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖。HPV检测一般是通过染色镜检法、TCT检查或血清学试验来检查是否感染了HPV病毒,检测时间长,需要3

7天时间才能出结果。
[0003]HPV早期感染可以通过宫颈样的图片细胞形态学检查或HPV的DNA检测,但是该上述方法属于创伤性采样,易导致出血和恢复期感染,并且由于宫颈和宫颈管口形态的特殊性,刮片采样对病人容易造成伤害;并且采样和检测必须在医院或其他专业机构进行,检测不方便,私密性差,不适用于人群的大规模自检。
[0004]尿液HPV病毒感染细胞病变代谢物快速检测是目前国际上前沿性的方法,对200多种HPV病毒所造成的细胞病变的代谢还原物均产生了梯度性的染色反应,感染HPV病毒后不必过度恐慌,根据世界卫生组织的报告,适龄人群有80~90%的曾有过一次性HPV病毒感染,但是大多数人群免疫力较好,感染HPV病毒后可以自愈,但是一部分人群因免疫力造成持续性感染或反复感染,因此,通过简单有效的方法检测HPV病毒是十分必要的。
[0005]中国专利技术专利CN115290904A一种原位杂交HPV检测试纸条、试剂盒及其制备方法,将含HPV病毒的尿液滴定在检测试纸条上,通过C1蛋白弱酸钨酸钠染色而显色,从而可判断尿液中HPV病毒量的多少,进而推算人体是否感染HPV及携带量多少,打开了试纸可以检测HPV病毒感染的新思路;但是在推广应用过程中发现该检测试纸条在保存过程中稳定性差,在保存或使用过程中容易与空气中的碱性物质过度或者过早发生染色反应;在使用过程中尿液中宫颈脱落HPV表象C1蛋白与试剂条产生静电而出现特异性的差异化,造成检测结果有偏差。

技术实现思路

[0006]为解决传统检测方法检测时间长、检查不方便、私密性差,现有检测试纸条稳定性差、检测结果有偏差的问题,本专利技术的目的是提供一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸及其制备方法。
[0007]本专利技术为实现上述目的,通过以下技术方案实现:一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸,所述试纸由空白试纸经测试液浸泡5~10分钟后烘干得到;以重量份计,所述测试液包括磷钨酸钠试剂液6~10份、酸性缓冲溶液3~5份、屏蔽试剂液1~3份和HPVC1蛋白培养基1份;所述磷钨酸钠试剂液通过以下步骤制备得到:称取4.5~5.5g钨酸钠,溶解于35~45ml去离子水中,向其中加入沸石和质量浓度85
±
0.5%浓磷酸3.5~4.5ml,加热至回流1.5~2.5小时,停止加热,冷却至20~30℃,然后用去离
子水定容至100ml,即为磷钨酸钠试剂液,保存至棕色试剂瓶中,备用;所述酸性缓冲溶液的pH为5.4~5.8;所述屏蔽试剂液为碘酸钠或高碘酸钠水溶液,所述屏蔽试剂液的质量体积浓度为0.4~0.6g/L;所述HPVC1蛋白培养基按照以下步骤制备得到:将HPVC1蛋白加入到无血清培养基中,混合均匀,静置8

12小时,得到蛋白混合液,利用8~10KG剂量的β射线电离辐照蛋白混合液,得到HPVC1蛋白培养基。
[0008]优选的,所述酸性缓冲溶液为pH=5.4的醋酸钠

醋酸缓冲溶液或pH=5.7~5.8的磷酸盐缓冲溶液。
[0009]优选的,所述HPVC1蛋白和无血清培养基的添加比例为1~5个HPVC1蛋白:30ml无血清培养基。
[0010]优选的,以重量份计,所述测试液还包括无水乙醇0.7~0.8份和蔗糖0.4~0.5份,在测试液中加入无水乙醇和蔗糖,可以提高试纸的晕染均匀性和亲水性。
[0011]本专利技术还包括一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸的制备方法,包括以下步骤:

以重量份计,将磷钨酸钠试剂液6~10份、酸性缓冲溶液3~5份、屏蔽试剂液1~3份和HPVC1蛋白培养基1份混合均匀,利用1~3KG剂量的β射线电离辐照,得到测试液;所述磷钨酸钠试剂液通过以下步骤制备得到:称取4.5~5.5g钨酸钠,溶解于35~45ml去离子水中,向其中加入沸石和质量浓度85
±
0.5%浓磷酸3.5~4.5ml,加热至回流1.5~2.5小时,停止加热,冷却至20~30℃,然后用去离子水定容至100ml,即为磷钨酸钠试剂液,保存至棕色试剂瓶中,备用;所述酸性缓冲溶液的pH为5.4~5.8;所述屏蔽试剂液为碘酸钠或高碘酸钠水溶液,所述屏蔽试剂液的质量体积浓度为0.4~0.6g/L;所述HPVC1蛋白培养基按照以下步骤制备得到:将HPVC1蛋白加入到无血清培养基中,混合均匀,得到蛋白混合液,利用8~10KG剂量的β射线电离辐照蛋白混合液,得到HPVC1蛋白培养基;

将空白试纸浸泡到步骤

所得测试液中5~10分钟,真空干燥1.5~2.5小时,得到基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸。
[0012]优选的,一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸的制备方法,包括以下步骤:

以重量份计,将磷钨酸钠试剂液6~10份、酸性缓冲溶液3~5份、屏蔽试剂液1~3份和HPVC1蛋白培养基1份混合均匀,利用1~3KG剂量的β射线电离辐照,向其中加入无水乙醇0.7~0.8份和蔗糖0.4~0.5份,得到测试液;所述磷钨酸钠试剂液通过以下步骤制备得到:称取4.5~5.5g钨酸钠,溶解于35~45ml去离子水中,向其中加入沸石和质量浓度85
±
0.5%浓磷酸3.5~4.5ml,加热至回流1.5~2.5小时,停止加热,冷却至20~30℃,然后用去离子水定容至100ml,即为磷钨酸钠试剂液,保存至棕色试剂瓶中,备用;所述酸性缓冲溶液的pH为5.4~5.8;所述屏蔽试剂液为碘酸钠或高碘酸钠水溶液,所述屏蔽试剂液的质量体积浓度为0.4~0.6g/L;
所述HPVC1蛋白培养基按照以下步骤制备得到:将HPVC1蛋白加入到无血清培养基中,混合均匀,得到蛋白混合液,利用8~10KG剂量的β射线电离辐照蛋白混合液,得到HPVC1蛋白培养基;

将空白试纸浸泡到步骤

所得测试液中5~10分钟,真空干燥1.5~2.5小时,得到基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸。
[0013]优选的,步骤

中的真空干燥温度为50~60℃。
[0014]本专利技术相比现有技术具有以下优点:本专利技术的基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸,通过试纸可以对HPV病毒的感染情况进行检测,个人可以通过个体的持续性检测,判断尿液中还原物的梯度变化。由于尿液中还原物梯度的变化与患者病情有高度的吻合性,为HPV病毒感染的自愈性、治疗必要性和治疗后的恢复情况提供科学准确的判断依据。
[0015]本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸,其特征在于:所述试纸由空白试纸经测试液浸泡5~10分钟后烘干得到;以重量份计,所述测试液包括磷钨酸钠试剂液6~10份、酸性缓冲溶液3~5份、屏蔽试剂液1~3份和HPVC1蛋白培养基1份;所述磷钨酸钠试剂液通过以下步骤制备得到:称取4.5~5.5g钨酸钠,溶解于35~45ml去离子水中,向其中加入沸石和质量浓度85
±
0.5%浓磷酸3.5~4.5ml,加热至回流1.5~2.5小时,停止加热,冷却至20~30℃,然后用去离子水定容至100ml,即为磷钨酸钠试剂液,保存至棕色试剂瓶中,备用;所述酸性缓冲溶液的pH为5.4~5.8;所述屏蔽试剂液为碘酸钠或高碘酸钠水溶液,所述屏蔽试剂液的质量体积浓度为0.4~0.6g/L;所述HPVC1蛋白培养基按照以下步骤制备得到:将HPVC1蛋白加入到无血清培养基中,混合均匀,静置8

12小时,得到蛋白混合液,利用8~10KG剂量的β射线电离辐照蛋白混合液,得到HPVC1蛋白培养基。2.根据权利要求1所述的一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸,其特征在于:所述酸性缓冲溶液为pH=5.4的醋酸钠

醋酸缓冲溶液或pH=5.7~5.8的磷酸盐缓冲溶液。3.根据权利要求1所述的一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸,其特征在于:所述HPVC1蛋白和无血清培养基的添加比例为1~5个HPVC1蛋白:30ml无血清培养基。4.根据权利要求1所述的一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸,其特征在于:以重量份计,所述测试液还包括无水乙醇0.7~0.8份和蔗糖0.4~0.5份。5.权利要求1所述的一种基于HPVC1蛋白检测HPV的试纸的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:

以重量份计,将磷钨酸钠试剂液6~10份、酸性缓冲溶液3~5份、屏蔽试剂液1~3份和HPVC1蛋白培养基1份混合均匀,利用1~3KG剂量的β射线电离辐照,得到测试液;所述磷钨酸钠试剂液通过以下步骤制备得到:称取4.5~5.5g钨酸钠,溶解于35~45ml去离子水中,向其中加入沸石和质量浓度85
±
0.5%浓磷酸3.5~4.5ml,加热至回流1.5~2.5小时,停...

【专利技术属性】
技术研发人员:石琦
申请(专利权)人:山东三医生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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