一种乙肝病毒双表达质粒及构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种乙肝病毒双表达质粒及其构建方法，首先分别以乙肝病毒前Ｃ－Ｃ基因／自身复制调控元件增强子ＩＩ、乙肝病毒前Ｓ－Ｓ基因／自身复制调控元件增强子Ｉ为目的基因，使用真核表达载体ＶＲ０１２，构建乙肝ＥＮＨ?ＩＩ／前Ｃ－Ｃ基因疫苗重组质粒ＶＥＣ和ＥＮＨ?Ｉ／前Ｓ－Ｓ基因疫苗重组质粒ＶＥＳ；然后采用单引物二次ＰＣＲ法，突变ＶＥＳ重组质粒，在表达调控单元下游插入酶切位点；最后利用插入的酶切位点，ＰＣＲ扩增ＶＥＣ重组质粒的调控和表达单元，酶切重组到突变后的ＶＥＳ质粒中，得到２个启动子分别调控表达乙肝病毒前Ｃ－Ｃ基因和前Ｓ－Ｓ基因的双表达质粒做为ＤＮＡ疫苗。该重组ＨＢＶ?ＤＮＡ疫苗能有效地表达乙肝表面抗原和核心抗原，可用于乙型肝炎的预防和治疗。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种乙肝病毒双表达质粒，其特征在于，其包括真核细胞表达载体ＶＲ１０１２上插入核苷酸序列的乙肝病毒前Ｃ－Ｃ基因和自身复制调控元件增强子Ⅱ以及含调控序列的乙肝病毒前Ｓ－Ｓ基因和自身复制调控元件增强子Ⅰ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：貌盼勇，沈宏辉，辛绍杰，王福生，胡燕，白冰珂，侯俊，张敏，赫兢，栾翔玲，王志杰，
申请(专利权)人：中国人民解放军第三〇二医院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]