靶向EGFR的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术公开了具有可以配对以形成靶向细胞上EGFR的抗原结合位点的抗体重链和轻链可变结构域的蛋白质，包含此类蛋白质的药物组合物，以及使用此类蛋白质和药物组合物的治疗方法，包括用于治疗癌症的方法。包括用于治疗癌症的方法。包括用于治疗癌症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】靶向EGFR的抗体及其用途
[0001]与相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年8月5日提交的美国临时专利申请号63/061,507的利益和优先权，所述临时申请的公开内容为所有目的整体通过参考并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请含有以ASCII格式电子提交并整体通过参考并入本文的序列表。在2021年8月4日生成的所述ASCII副本被命名为DFY
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083WO_SL.txt，大小为61,970字节。

技术介绍

[0005]尽管在文献中已报道了治疗癌症的大量研究尝试和科学进展，但这种疾病依然是重要的健康问题。一些在成年人中最频繁被诊断到的癌症包括前列腺癌、乳腺癌和肺癌。血液恶性肿瘤尽管比实体肿瘤少见，但存活率低。当前用于这些癌症的治疗方案不对所有患者有效和/或可能具有实质性不良副作用。其他类型的癌症对于使用现有治疗方案治疗来说也仍然具有挑战性。
[0006]表皮生长因子受体(EGFR；ErbB
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1；HER1)是一种跨膜蛋白，是细胞外蛋白配体的表皮生长因子家族(EGF家族)成员的受体。在与其特异性配体包括表皮生长因子和转化生长因子α(TGFα)结合后，EGFR经历从无活性单体形式向有活性的同二聚体或与其他ErbB家族受体的异二聚体的转变。所述二聚化刺激其固有的细胞内蛋白酪氨酸激酶活性并引发下游信号传导级联，导致DNA合成和细胞增殖。EGFR参与诸如细胞迁移、黏附和增殖的表型的调节。
[0007]导致EGFR过表达或过度活跃的突变与许多癌症相关，包括非小细胞肺癌、肛门癌、成胶质细胞瘤和头颈部上皮肿瘤。这些涉及EGFR的体细胞突变导致其持续激活，产生不受控制的细胞分裂。在成胶质细胞瘤中，经常观察到EGFR或多或少的特异性突变，被称为EGFRvIII。EGFR或家族成员的突变、扩增或失调与其他实体肿瘤有关，包括结肠直肠癌、肾细胞癌、膀胱癌、宫颈癌、卵巢癌、胰腺癌和肝癌。
[0008]已开发了抗EGFR单克隆抗体例如西妥昔单抗、帕尼单抗、耐昔妥珠单抗和扎芦木单抗。然而，对用于治疗癌症、具有更高疗效和更低副作用的新的有用的抗体和相关疗法，仍存在着需求。

技术实现思路

[0009]本申请提供了结合人EGFR的抗原结合位点。这些抗原结合位点结合EGFR的细胞外结构域中的各种表位。含有此类抗原结合位点的蛋白质和蛋白质偶联物例如抗体、抗体
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药物偶联物、双特异性T
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细胞衔接物(BiTE)和免疫细胞因子以及表达含有此类抗原结合位点的蛋白质(例如嵌合抗原受体(CAR))的免疫效应细胞(例如T细胞)，可用于治疗EGFR相关疾病例如癌症。
[0010]因此，本申请的一个方面提供了一种结合EGFR的抗原结合位点，其包含：(i)包含分别为SEQ ID NO：2、23和4的互补决定区1(CDR1)、互补决定区2(CDR2)和互补决定区3
(CDR3)序列的重链可变结构域(VH)，和包含分别为SEQ ID NO：6、7和17的CDR1、CDR2和CDR3序列的轻链可变结构域(VL)；或(ii)包含分别为SEQ ID NO：2、12和4的CDR1、CDR2和CDR3序列的VH，和包含分别为SEQ ID NO：6、7和8的CDR1、CDR2和CDR3序列的VL。
[0011]在某些实施方式中，所述VH包含分别为SEQ ID NO：2、23和4的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别为SEQ ID NO：6、7和17的CDR1、CDR2和CDR3序列。在某些实施方式中，所述VH包含分别为SEQ ID NO：2、12和4的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别为SEQ ID NO：6、7和17的CDR1、CDR2和CDR3序列。在某些实施方式中，所述VH包含分别为SEQ ID NO：2、3和4的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别为SEQ ID NO：6、7和17的CDR1、CDR2和CDR3序列。在某些实施方式中，所述VH包含分别为SEQ ID NO：2、12和4的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别为SEQ ID NO：6、7和8的CDR1、CDR2和CDR3序列。
[0012]在某些实施方式中，所述VH包含与SEQ ID NO：11具有至少90％同一性的氨基酸序列，并且所述VL包含与SEQ ID NO：16具有至少90％同一性的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述VH包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO：16的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述VH包含SEQ ID NO：32的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO：33的氨基酸序列。
[0013]在某些实施方式中，所述VH包含与SEQ ID NO：1具有至少90％同一性的氨基酸序列，并且所述VL包含与SEQ ID NO：16具有至少90％同一性的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述VH包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO：16的氨基酸序列。
[0014]在某些实施方式中，所述VH包含与SEQ ID NO：11具有至少90％同一性的氨基酸序列，并且所述VL包含与SEQ ID NO：13具有至少90％同一性的氨基酸序列。在某些实施方式中，所述VH包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列，并且所述VL包含SEQ ID NO：13的氨基酸序列。
[0015]本申请的另一方面提供了一种抗原结合位点，其包含：包含与SEQ ID NO：1具有至少90％同一性的氨基酸序列的VH，和包含与SEQ ID NO：5具有至少90％同一性的氨基酸序列的VL，其中所述VH相对于SEQ ID NO：1包含S62R取代，和/或所述VL相对于SEQ ID NO：5包含D92R取代和/或F87Y取代，根据Chothia编号方案编号。
[0016]在任一上述方面的某些实施方式中，所述VH相对于SEQ ID NO：1包含S62R取代，根据Chothia编号方案编号。在某些实施方式中，所述VL相对于SEQ ID NO：5包含D92R取代，根据Chothia编号方案编号。在某些实施方式中，所述VH相对于SEQ ID NO：1包含S62R取代并且所述VL相对于SEQ ID NO：5包含D92R取代，根据Chothia编号方案编号。在某些实施方式中，所述VL相对于SEQ ID NO：5包含F87Y取代，根据Chothia编号方案编号。
[0017]在某些实施方式中，所述抗原结合位点作为单链可变片段(scFv)存在，并且其中所述scFv包含选自SEQ ID NO：14、18、20和24的序列。
[0018]在某些实施方式中，当通过表面等离子体共振(SPR)测量时，所述抗原结合位点以小于或等于5nM的解离常数(K
D
)结合人EGFR。在某些实施方式中，当通过表面等离子体共振(SPR)测量时，所述抗原本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种结合EGFR的抗原结合位点，其包含：(i)包含分别为SEQ ID NO：2、23和4的互补决定区1(CDR1)、互补决定区2(CDR2)和互补决定区3(CDR3)序列的重链可变结构域(VH)，和包含分别为SEQ ID NO：6、7和17的CDR1、CDR2和CDR3序列的轻链可变结构域(VL)；或(ii)包含分别为SEQ ID NO：2、12和4的CDR1、CDR2和CDR3序列的VH，和包含分别为SEQ ID NO：6、7和8的CDR1、CDR2和CDR3序列的VL。2.根据权利要求1所述的抗原结合位点，其中所述VH包含分别为SEQ ID NO：2、23和4的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别为SEQ ID NO：6、7和17的CDR1、CDR2和CDR3序列。3.根据权利要求2所述的抗原结合位点，其中所述VH包含分别为SEQ ID NO：2、12和4的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别为SEQ ID NO：6、7和17的CDR1、CDR2和CDR3序列。4.根据权利要求2所述的抗原结合位点，其中所述VH包含分别为SEQ ID NO：2、3和4的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别为SEQ ID NO：6、7和17的CDR1、CDR2和CDR3序列。5.根据权利要求1所述的抗原结合位点，其中所述VH包含分别为SEQ ID NO：2、12和4的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且所述VL包含分别为SEQ ID NO：6、7和8的CDR1、CDR2和CDR3序列。6.一种抗原结合位点，其包含：包含与SEQ ID NO：1具有至少90％同一性的氨基酸序列的VH，和包含与SEQ ID NO：5具有至少90％同一性的氨基酸序列的VL，其中所述VH相对于SEQ ID NO：1包含S62R取代，和/或所述VL相对于SEQ ID NO：5包含D92R取代和/或F87Y取代，根据Chothia编号方案编号。7.根据权利要求6所述的抗原结合位点，其中所述VH相对于SEQ ID NO：1包含S62R取代，根据Chothia编号方案编号。8.根据权利要求6所述的抗原结合位点，其中所述VL相对于SEQ ID NO：5包含D92R取代，根据Chothia编号方案编号。9.根据权利要求6所述的抗原结合位点，其中所述VH相对于SEQ ID NO：1包含S62R取代并且所述VL相对于SEQ ID NO：5包含D92R取代，根据Chothia编号方案编号。10.根据权利要求1
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9中的任一项所述的抗原结合位点，其中所述VL相对于SEQ ID NO：5包含F87Y取代，根据Chothia编号方案编号。11.根据权利要求1
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3和6
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10中的任一项所述的抗原结合位点，其中所述VH包含与SEQ ID NO：11具有至少90％同一性的氨基酸序列，并且所述VL包含与SEQ ID NO：16具有至少90％同一性的氨基酸序列。12.根据权利要求1
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3和6
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11中的任一项所述的抗原结合位点，其中所述VH包含SEQ ID NO：11的氨基酸序列并且所述VL包含SEQ ID NO：16的氨基酸序列，或者所述VH包含SEQ ID NO：32的氨基酸序列并且所述VL包含SEQ ID NO：33的氨基酸序列。13.根据权利要求1、2、4、6、8和10中的任一项所述的抗原结合位点，其中所述VH包含与SEQ ID NO：1具有至少90％同一性的氨基酸序列，并且所述VL包含与SEQ ID NO：16具有至少90％同一性的氨基酸序列。
NO：26包含Q347R、D399V和F405T取代，根据EU编号系统编号。29.根据权利要求27或28所述的蛋白质，其中所述抗体重链恒定区的一条多肽链相对于SEQ ID NO：26包含Y349C取代，并且所述抗体重链恒定区的另一条多肽链相对于SEQ ID NO：26包含S354C取代，根据EU编号系统编号。30.一种抗体
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药物偶联物，其包含权利要求20
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29中的任一项所述的蛋白质和药物部分。31.权利要求30所述的抗体
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药物偶联物，其中所述药物部分选自由澳瑞他汀、N
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乙酰
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γ
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卡奇霉素(N
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acetyl
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γcalicheamicin)、美登素类(maytansinoid)、吡咯并苯二氮卓类和SN
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38组成的组。32.一种免疫细胞因子，其包含权利要求1
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19中的任一项所述的抗原结合位点和细胞因子。33.根据权利要求32所述的免疫细胞因子，其中所述细胞因子选自由IL
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2、IL
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4、IL
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10、IL
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12、I...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿斯亚，
申请(专利权)人：蜻蜓疗法股份有限公司，
类型：发明
国别省市：