一种改善焦虑和短期记忆力的核桃肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于食品加工技术领域，具体地涉及一种改善焦虑和短期记忆力的核桃肽及其制备方法和应用。本发明专利技术提供一种改善焦虑和短期记忆力的核桃肽，其特征在于，所述核桃肽的分子量小于3000Da，其氨基氮含量≥2mmol Leu/g，所述核桃肽为二肽基肽酶IV抑制肽。本发明专利技术提供的核桃肽对DPP

【技术实现步骤摘要】
一种改善焦虑和短期记忆力的核桃肽及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于食品加工
，具体地涉及一种改善焦虑和短期记忆力的核桃肽及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]胰高血糖素样肽
‑
1(Glucagon
‑
like peptide 1，GLP
‑
1)可以通过GLP
‑
1受体(GLP
‑
1receptor，GLP
‑
1R)发挥作用，目前GLP
‑
1/GLP
‑
1R被作为改善认知损伤，治疗阿尔茨海默病、帕金森病、焦虑和抑郁等神经退行性疾病的重要靶点得到广泛应用，但是，GLP
‑
1在体内极易被二肽基肽酶
‑
IV(Dipeptidyl peptidase
‑
IV，DPP
‑
IV)降解成非活性形式，从而失去其应有的多种生理功能，因此DPP
‑
IV抑制剂可以通过抑制DPP
‑
IV对活性GLP
‑
1的降解，调节活性GLP
‑
1水平，起到保护神经和改善认知功能的作用。目前临床应用的DPP
‑
IV抑制剂和GLP
‑
1R激动剂均是化学合成药物，存在多种副作用，而来源于天然食物的生物活性肽无毒副作用，能更好地作用于机体发挥作用。
[0003]核桃蛋白是制备食源性生物活性肽的良好原料，包括抗氧化肽、神经保护活性肽、改善学习记忆活性肽、抗疲劳活性肽、降血压活性肽等。核桃中含量较高的精氨酸、天冬氨酸和谷氨酸能够增强核桃肽的改善记忆活性。此外，核桃中的强抗氧化肽也可以通过对抗氧化应激反应和减轻炎症反应改善记忆。现有核桃改善记忆活性肽多聚焦于其抗氧化活性，而对于DPP
‑
IV抑制活性研究较少。

技术实现思路

[0004]针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种改善焦虑和短期记忆力的核桃肽。
[0005]为了实现此目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]本专利技术第一方面提供了一种核桃源DPP
‑
IV抑制肽，所述DPP
‑
IV抑制肽的分子量小于3000Da，其氨基氮含量≥2mmol Leu/g，所述核桃肽为二肽基肽酶IV抑制肽。
[0007]在一些实施方式中，所述核桃肽的氨基氮含量为2
‑
6mmol Leu/g；
[0008]和/或，所述核桃肽的IC
50
小于4mg/mL。
[0009]本专利技术第二方面提供一种制备第一方面所述的核桃源DPP
‑
IV抑制肽的方法，所述方法包括以下步骤：
[0010](1)酶解核桃蛋白粉，得到核桃蛋白水解物；
[0011](2)对所述核桃蛋白水解物超滤处理，得到核桃蛋白肽。
[0012]在一些实施方式中，所述核桃为含有核桃蛋白的原料，例如核桃粕、核桃蛋白粉。
[0013]在一些实施方式中，所述酶选自碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶以及胃蛋白酶和胰蛋白酶中的至少一种。
[0014]在一些具体的实施方式中，所述酶为木瓜蛋白酶。
[0015]在一些具体的实施方式中，所述酶为胃蛋白酶和胰蛋白酶。
[0016]核桃粕为核桃榨油后的饼粕，一般作为废弃物或饲料，具有丰富的活性成分，富含精氨酸、谷氨酸和天冬氨酸。本专利技术可采用粗蛋白核桃粕作为核桃蛋白原料，其蛋白纯度约40％。
[0017]不同的蛋白酶具有不同的酶活力及特异性酶切位点，在底物浓度和酶浓度相同的条件下，蛋白酶水解蛋白质的能力及酶解所得的多肽生物活性存在差异。本专利技术人意外发现，在众多水解蛋白酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、以及胃蛋白酶与胰酶的组合中，由木瓜蛋白酶对核桃蛋白的水解所得的核桃蛋白水解物，在后续超滤后其DPP
‑
IV抑制活性最佳。
[0018]在一些实施方式中，所述蛋白酶水解包括以下步骤：
[0019]1)将含有核桃蛋白的蛋白溶液煮沸以使溶液中的酶失活，调节温度和pH；
[0020]2)向1)的溶液中加入蛋白酶进行酶解反应；
[0021]3)所述酶解反应结束后煮沸灭酶，弃去杂质以得到核桃蛋白水解物。
[0022]在一些实施方式中，所述蛋白溶液中溶质与溶剂的质量体积比可以为1
‑
5：20，其中质量为g，体积为mL。
[0023]在一些具体的实施方式中，所述酶解反应包括以下条件：
[0024]碱性蛋白酶和核桃蛋白的质量比为2
‑
5：100，酶解温度45
‑
55℃，酶解pH 7.5
‑
10，酶解时间3
‑
4h；
[0025]和/或，中性蛋白酶和核桃蛋白的质量比为2
‑
5：100，酶解温度40
‑
50℃，酶解pH 6.5
‑
9，酶解时间3
‑
4h；
[0026]和/或，木瓜蛋白酶和核桃蛋白的质量比为2
‑
5：100，酶解温度50
‑
60℃，酶解pH 6.5
‑
9，酶解时间3
‑
4h；
[0027]和/或，风味蛋白酶和核桃蛋白的质量比为2
‑
5：100，酶解温度45
‑
55℃，酶解pH 6.5
‑
9，酶解时间3
‑
4h；
[0028]和/或，胃蛋白酶和核桃蛋白的质量比为0.1
‑
1：100，酶解温度35
‑
39℃，酶解pH 1.5
‑
2.0，酶解时间1
‑
2h；
[0029]和/或，胰蛋白酶和核桃蛋白的质量比为0.1
‑
1：100，酶解温度35
‑
39℃，酶解pH 6.5
‑
7.5，酶解时间5
‑
7h。
[0030]在一些实施方式中，所述超滤包括以下步骤：
[0031](
ⅰ
)使核桃蛋白水解物透过3000Da孔径的滤膜，得到第一超滤组分；
[0032](ii)使第一超滤组分透过1000Da孔径的滤膜，得到第二超滤组分和第三超滤组分，其中第二超滤组分为1000Da
‑
3000Da的组分，第三超滤组分为小于1000Da的组分。
[0033]超滤作为压力驱动的膜分离技术广泛应用于研究和工业领域，利用多孔膜的拦截能力，以物理截留的方式，将溶液中的大小不同的物质颗粒分开，从而达到纯化和浓缩、筛分溶液中不同组分的目的。
[0034]本专利技术第三方面提供根据第一方面所述的核桃肽和/或根据第二方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种改善焦虑和短期记忆力的核桃肽，其特征在于，所述核桃肽的分子量小于3000Da，其氨基氮含量≥2mmol Leu/g，所述核桃肽为二肽基肽酶IV抑制肽。2.根据权利要求1所述的核桃肽，其特征在于，所述核桃肽的氨基氮含量为2
‑
6mmol Leu/g；和/或，所述核桃肽的IC
50
小于4mg/mL。3.一种制备根据权利要求1所述的核桃肽的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)酶解核桃蛋白粉和/或核桃粕，得到核桃蛋白水解物；(2)对所述核桃蛋白水解物超滤处理，得到核桃肽。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述酶选自碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶以及胃蛋白酶和胰蛋白酶中的至少一种。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述酶为木瓜蛋白酶。6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述酶解包括以下步骤：1)将含有核桃蛋白的蛋白溶液煮沸，以使溶液中的蛋白质变性，调节温度和pH；2)向1)的溶液中加入蛋白酶进行酶解反应；3)所述酶解反应结束后，煮沸灭酶，得到核桃蛋白水解物。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述酶解反应包括以下条件：碱性蛋白酶和核桃蛋白的质量比为2
‑
5：100，酶解温度45
‑
55℃，酶解pH 7.5
‑
10，酶解时间3
‑
4h；和/或，中性蛋白酶和核桃蛋白的质量比为2
‑
5：100，酶解温度40
‑
50℃，酶解pH 6.5
‑
9，酶解时间...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁龙，海楠，冯治，李一举，王丽英，马爱进，夏君霞，
申请(专利权)人：北京工商大学河北养元智汇饮品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：