【技术实现步骤摘要】
产苏氨酸工程菌的构建方法
[0001]本专利技术属于微生物工程
,具体地说,涉及一种产苏氨酸工程菌的构建方法。
技术介绍
[0002]L
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苏氨酸(L
‑
Threonin),化学名称β
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羟基
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α
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氨基丁酸,分子式C4H9NO3,相对分子质量119.12。L
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苏氨酸是一种必需的氨基酸,苏氨酸主要用于医药、化学试剂、食品强化剂、饲料添加剂等方面。
[0003]谷氨酸棒杆菌中,由草酰乙酸生成苏氨酸需五步催化反应,分别为天冬氨酸激酶(lysC编码)、天冬氨酸半醛脱氢酶(asd编码)、高丝氨酸脱氢酶(hom编码)、高丝氨酸激酶(thrB)及苏氨酸合酶(thrC)编码。Hermann Sahm等人一直致力于高产苏氨酸的谷棒菌株的开发,并取得一定突破,获得了抗反馈抑制的hom基因(Reinscheid D J,Eikmanns B J,Sahm H.Analysis of a Corynebacterium glutamicum hom gene coding for a feedback
‑
resistant homoserine dehydrogenase.[J].Journal of Bacteriology,1991,173(10):3228
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3230)、lysC基因(Eikmanns B J,Eggeling L,Sahm H.Molecular aspe ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种修饰的棒状杆菌属微生物,其特征在于,所述微生物相比于未修饰的微生物,其2
‑
甲酰
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柠檬酸合酶1的活性降低或丧失,且所述微生物相比于未修饰的微生物具有增强的苏氨酸生产能力。2.根据权利要求1所述的微生物,其特征在于,所述微生物体内2
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甲酰
‑
柠檬酸合酶1的活性降低或丧失是通过降低编码2
‑
甲酰
‑
柠檬酸合酶1基因的表达或敲除内源的编码2
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甲酰
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柠檬酸合酶1的基因来实现的。3.根据权利要求2所述的微生物,其特征在于,采用诱变、定点突变或同源重组的方法来降低编码2
‑
甲酰
‑
柠檬酸合酶1基因的表达或敲除内源的编码2
‑
甲酰
‑
柠檬酸合酶1的基因。4.根据权利要求1所述的微生物,其特征在于,所述微生物与未修饰的微生物相比,其体内苏氨酸合成途径相关的酶的活性增强;其中,所述与苏氨酸合成途径相关的酶选自天冬氨酸氨基转移酶、天冬氨酸激酶、高丝氨酸脱氢酶、苏氨酸合酶、NAD激酶、果糖
‑
1,6
‑
二磷酸酶2中的至少一种。5.根据权利要求4所述的微生物,其特征在于,所述微生物为如下
①
~
⑤
中的任一种:
①2‑
甲酰
‑
柠檬酸合酶1活性降低或丧失且天冬氨酸激酶和/或高丝氨酸脱氢酶活性增强的微生物;
②2‑
甲酰
‑
柠檬酸合酶1活性降低或丧失且天冬氨酸激酶、高丝氨酸脱氢酶和/或苏氨酸合酶活性增强的微生物;
③2‑
甲酰
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柠檬酸合酶1活性降低或丧失且天冬氨酸激酶、高丝氨酸脱氢酶和/或NAD激酶活性增强的微生物;
④2‑
甲酰
‑
柠檬酸合酶1活性降低或丧失且天冬氨酸激酶、高丝氨酸脱氢酶、NAD激酶和/或果糖
‑
1,6
‑
二磷酸酶2活...
【专利技术属性】
技术研发人员:康培,宫卫波,何君,李岩,
申请(专利权)人:廊坊梅花生物技术开发有限公司,
类型:发明
国别省市:
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