一种糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及一种糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物及其制备方法与应用，属于多肽药物的技术领域，所述谷胱甘肽衍生物如式Ⅰ所示：其中，R为糖基。本发明专利技术的谷胱甘肽衍生物可以应用于清除自由基以及抑制炎症方面。本发明专利技术提供的式Ⅰ化合物具有较好的抗氧化性，并且使用半乳糖修饰后的谷胱甘肽的抗氧化性要明显优于谷胱甘肽和白藜芦醇。同时本发明专利技术提供的式Ⅰ化合物还能够有效抑制炎症的发生，对炎症产生的NO生成率有显著抑制。著抑制。著抑制。

【技术实现步骤摘要】
一种糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于多肽药物的
，具体涉及一种糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]抗氧化肽不但具有抗氧化能力，同时还兼具营养性、安全性，因此抗氧化肽的生产、应用方面的拓展已经成为食品品和药业的研究热点。目前抗氧化肽的研究较多集中在各类蛋白水解物中分离纯化抗氧化活性肽，对于抗氧化肽结构与活性之间的相互关系研究相对较少。谷胱氨肽是动植物体内广泛天然存在用以抵御氧化损伤的多能抗氧化肽。谷胱甘肽(glutathione，GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的小分子三肽，分子量为307.3。1921年被诺贝尔奖得主，英国皇家学会会长霍普金斯(Frederick G,Hopkins)发现。GSH是在人体内广泛分布于肝、肾、脾、肺等器官组织和细胞，其主要特点是具有游离的巯基，因此具有很强的供电子或质子氢的能力，参与体内氧化还原过程，组成机体的抗氧化系统，清除各种过氧化和自由基。GSH的结构特点，决定了其可以通过调节细胞增生和基因表达速率等，在生物体内发挥重要的生理功能，因此作为药物被广泛应用于临床医药等相关领域。例如，病毒性肝损伤、化学性肝损伤、肾损伤、各种低氧血症、严重呼吸穷迫综合征等疾病。
[0003]糖类在生物合成、结构和功能上都与核酸以及蛋白质有着本质区别，但是对蛋白质的功能却有着关键影响。蛋白质若要行使其生物学功能，必须在翻译之后进行进一步加工。加工过程涉及多种修饰方式，例如磷酸化、乙酰化、泛素化、甲基化、糖基化等。其中糖基化修饰对蛋白质功能和结构的形成具有重要作用。在机体内，细胞粘附、分子识别以及信号转导等过程均涉及糖基化蛋白质的参与，说明糖基化修饰对蛋白质行使生物学功能起着重要作用。因此，我们尝试在谷胱甘肽结构上进行糖基化修饰，希望能够进一步提高谷胱甘肽的抗氧化性。

技术实现思路

[0004]针对谷胱甘肽抗氧化性抗氧化性不高的问题，本专利技术提供一种糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物及其制备方法与应用，以解决上述问题。本专利技术选择使用单糖对谷胱甘肽的N端进行修饰，通过固态合成方式得到了经糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物。在提高抗氧化性的同时，还能够有效抑制炎症的发生。
[0005]第一方面，本专利技术提供一种糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物，结构如式Ⅰ所示：
[0006][0007]其中，R为糖基。
[0008]优选的，所述R为葡萄糖基、甘露糖基、半乳糖基或果糖基。
[0009]优选的，所述式Ⅰ选自以下化合物：
[0010][0011]第二方面，本专利技术提供一种制备式Ⅰ化合物的方法，包括以下步骤：
[0012](1)合成CTC树脂
[0013]CTC Resin和Fmoc
‑
Gly
‑
OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸，再加入DIPEA，反应3小时后，不抽滤溶液，直接加入甲醇，封端半小时，洗涤后得到Fmoc
‑
Gly
‑
CTC Resin备用；
[0014](2)氨基酸对接
[0015]脱Fmoc：加3倍树脂体积的20％ PIP/DMF溶液，鼓氮气60分钟，然后用DMF洗涤得到H2N
‑
Gly
‑
CTC Resin；
[0016]缩合：取Fmoc
‑
Cys
‑
OH加入到上述树脂里，加DMF溶解Fmoc
‑
Cys
‑
OH，再分别加入IPEA和HBTU；反应60分钟后，用DMF洗涤树脂得到Fmoc
‑
Cys
‑
Gly
‑
CTC Resin；
[0017](3)采用步骤(2)中脱Fmoc的方法获得Cys
‑
Gly
‑
CTC Resin；
[0018](4)糖基化：将步骤(3)获得的Cys
‑
Gly
‑
CTC Resin与发生缩合反应获得式Ⅰ化合物粗品；
[0019](5)用三氟乙酸、三异丙基硅烷、水和二硫苏糖醇的混合溶液从树脂中裂解肽，用冰冷的乙醚沉淀；将多肽溶解在乙腈：水＝1:1的溶液中，并通过反相高压液相色谱进行纯化，得式Ⅰ化合物。
[0020]优选的，步骤(5)中混合溶液比例为三氟乙酸：三异丙基硅烷：水：二硫苏糖醇＝90：5：2.5：2.5。
[0021]优选的，步骤(1)中，CTC Resin和Fmoc
‑
Gly
‑
OH的摩尔比为3:4。
[0022]优选的，步骤(2)中，Cys
‑
Gly
‑
CTC Resin和Fmoc
‑
Cys
‑
OH的摩尔比为1:7。
[0023]第三方面，本专利技术提供一种式Ⅰ化合物在清除自由基方面的应用。
[0024]第四方面，本专利技术提供一种式Ⅰ化合物在抑制炎症方面的应用。。
[0025]本专利技术的有益效果为：
[0026]本专利技术提供的式Ⅰ化合物具有较好的抗氧化性，并且使用半乳糖修饰后的谷胱甘
肽的抗氧化性要明显优于谷胱甘肽和白藜芦醇。同时本专利技术提供的式Ⅰ化合物还能够有效抑制炎症的发生，对炎症产生的NO生成率有显著抑制。
附图说明
[0027]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0028]图1是本专利技术实施例3化合物抗氧化活性测试图。
[0029]图2是本专利技术实施例1制备产物的MS图谱。
[0030]图3是本专利技术实施例2制备产物的MS图谱。
具体实施方式
[0031]为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。
[0032]实施例1
[0033]A1化合物的制备
[0034](1)合成CTC树脂
[0035]称取代度为1.0mmol/g的0.3g CTC Resin和0.4mmol的Fmoc
‑
Gly
‑
OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸，再加入树脂0.9mmol的DIPEA(Mw:129.1,d:0.740g/ml)，反应3小时后，不抽滤溶液，直接加入1ml的HPLC级甲醇，封端半小时。依次用DMF洗涤2次，甲醇洗涤1次，DCM洗涤一次，甲醇洗涤一次，DCM洗涤一次，DMF洗涤2次。得到Fm本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物，其特征在于，如式Ⅰ所示：其中，R为糖基。2.如权利要求1所述的糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物，其特征在于，所述R为葡萄糖基、甘露糖基、半乳糖基或果糖基。3.如权利要求1所述的糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物，其特征在于，所述式Ⅰ选自以下化合物：4.一种制备如权利要求1所述的糖基化修饰的谷胱甘肽衍生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)合成CTC树脂CTC Resin和Fmoc
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Gly
‑
OH于反应器中，加入适量DCM溶解氨基酸，再加入DIPEA，反应3小时后，不抽滤溶液，直接加入甲醇，封端半小时，洗涤后得到Fmoc
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Gly
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CTC Resin备用；(2)氨基酸对接脱Fmoc：加3倍树脂体积的20％PIP/DMF溶液，鼓氮气60分钟，然后用DMF洗涤得到H2N
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Gly
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CTC Resin；缩合：取Fmoc
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Cys
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OH加入到上述树脂里，加DMF溶解Fmoc
‑
Cys
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OH，再分别加入IPEA和HBTU；反应60分钟后，用DMF洗涤树脂得到Fmoc
‑
Cys
‑
Gly<...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭立增，毛龙飞，王恒振，刘晓斐，彭春娥，董晓丹，王斓，占晓广，姬涛，许微，周磊，
申请(专利权)人：山东省农业科学院，
类型：发明
国别省市：