本发明专利技术公开了一种盐酸多柔比星脂质体注射剂及其制备工艺，其中各组分的重量百分含量为：盐酸多柔比星０．０５～０．５％、氢化大豆卵磷脂０．０２５～３％、胆固醇０．００１～１．５％、聚乙二醇化脂０．０１～１％、有机酸或硫酸铵０．００２５～２．５％、糖２．８～２０％、缓冲剂０．１～１０％，其余为注射用水。其制备工艺包括以下步骤：１）脂相冻干；２）脂相水化；３）脂质体整粒；４）制造磷脂膜内外跨膜梯度；５）脂质体载药；６）除菌、分装、保存。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种盐酸多柔比星脂质体注射剂及其制备工艺。
技术介绍
多柔比星(doxorubicin，adriamycin，又称阿霉素)为蒽环类抗生素，结构类似柔 红霉素，属广谱抗肿瘤药。临床上可适用于急性白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、肺癌、 乳腺癌、膀胱癌、睾丸癌、甲状腺癌、软组织肿瘤、骨肉瘤等。虽然盐酸多柔比星抗肿瘤谱广， 疗效高，但其具有较强的细胞毒效应，并且选择性较差，既可以杀伤肿瘤细胞，又可以杀伤 正常细胞，限制了其临床应用。台湾东洋药品工业股份有限公司的专利CN100376249C和CN100431525C中采用的 盐酸多柔比星脂质体制备方法相似，将脂质组分溶于醇溶剂内形成混合物，将该混合物与 硫酸铵水溶液混合，对所形成的混合物进行孔挤压处理，得到脂质体悬浮液。此方法中，脂 相溶解步骤使用了大量有机溶剂，靠透析仅能去除部分有机溶剂，有机溶剂残留较多。专利CN1133436C、CN1290511C和CN1256091C公开了薄膜分散法制备盐酸多柔比 星脂质体的方法，这些方法中采用氯仿或氯仿_甲醇混合溶剂溶解磷脂和胆固醇，有机溶 剂残留较多，毒性大，且薄膜分散法得到的脂相混合物致密，不易水化，生产批量小，难以产 业化。Journal of Liposome Research, 3 (3), 517-528 (1993)公开了一种 PEG 化阿霉素 脂质体的制备工艺，将磷脂、聚乙二醇化脂、胆固醇和维生素E溶解于叔丁醇中，通过冷冻 干燥除去溶剂，疏松的脂质块用含硫酸铵和去铁铵的水溶液在60°C下强烈涡旋振摇水化 60min，脂质体混悬液通过聚碳酸酯膜挤出整粒。叔丁醇的凝固点是25. 5°C，操作时容易凝 固，不利于脂相成分的溶解。专利技术人于2007年申请了 W02008080367A1，该专利方法适用于如米托蒽醌这样具 有两个或两个以上可解离基团的药物，且脂质体粒度为30-80nm。该专利也公开了阿霉素脂质体的一种制备工艺(参见W02008080367A1实施例8)， 将氢化大豆卵磷脂、胆固醇和聚乙二醇_ 二硬脂酸磷脂酰乙醇胺溶解于95%叔丁醇水溶液 中得澄明溶液，冷冻干燥得冻干粉末，以硫酸铵溶液水化，再以微射流进行整粒，粒子的平 均粒度为60nm。采用超滤装置移去空白脂质体外相的硫酸铵，将外相置换成250mM蔗糖及 50mM甘氨酸以形成梯度，加入盐酸阿霉素溶液，孵育Ih后得到阿霉素脂质体混悬液。与具有两个生pH下可解离基团的米托蒽醌相比，具有一个可解离基团的阿霉素 制成小粒度(60nm)脂质体后，体外释放过快，会导致体内毒性大(参见W02008080367A1实 施例9)。另外该专利方法中采用水/叔丁醇混合溶剂溶解脂相成分，得到的溶液有一定的 黏度，升华速度慢，冻干需要的时间长。
技术实现思路
专利技术人在专利W02008080367A1公开的脂质体制备工艺基础上进行了改进，提供4了一种盐酸多柔比星脂质体注射剂及其制备工艺。本专利技术的技术方案如下该脂质体注射剂含有1)盐酸多柔比星；2)脂相成分氢化大豆卵磷脂/胆固醇/聚乙二.醇化脂；3)其他用于制备脂质体药物的辅料。其中各组分的重量百分含量为盐酸多柔比星0. 05 -0. 5%氢化大豆卵磷脂0. 025 3%胆固醇0. 001 1. 5%聚乙二醇化脂0. 01 -1%硫酸铵0. 0025 2. 5%糖2. 8 20%缓冲剂0. 1 10%其余为注射用水。同时满足盐酸多柔比星L和氢化大豆卵磷脂的·i量比为0.1 2 1，胆固醇和氢化大豆卵磷脂的重量比为0.1 1 2，聚乙二醇化脂和氢化大豆卵磷脂的重量比为 0. 07 7 2。 上述盐酸多柔比星脂质体注射剂，其优选方案中各组分的重量百分含量为盐酸多柔比星0.1 0. 3%氢化大豆卵磷脂0.5 1. 5%胆固醇0.2 0. 5%聚乙二醇化脂0.2 0. 5%硫酸铵0.005 2%糖2.8 15%缓冲剂0.1 10%其余为注射用水。其中，聚乙二醇化脂选自甲氧基PEG2000- 二硬脂酸酰脂酰乙醇胺 (MPEG2000-DSPE)、胆固醇-PEG(cholesterol-PEG)、甘油二酯-PEG(diacylglycerol-PEG)、 DSPE 多臂 PEG (DSPE-Multi-armPEG)或 DSPE 树状 PEG (DSPE-Comb-shapedPEG)。糖选自乳糖、麦芽糖、蔗糖、葡萄糖或海藻糖。缓冲剂选自组氨酸或甘氨酸。该脂质体注射剂的制备工艺包含以下步骤1)脂相冻干将氢化大豆卵磷脂/胆固醇/聚乙二醇化脂溶于乙醇/叔丁醇混合 溶剂中，冻干，除去有机溶剂，得到疏松的脂相混合物a ；乙醇与叔丁醇的体积比大于0，小 于等于1:9;2)脂相水化配制0. 01 IM的硫酸铵水溶液，加到冻干后的脂相混合物a中，在 40 70°C的水浴中保温振荡进行水化，得到粒度不均勻的脂质体b ；3)脂质体整粒将b用微射流进行整粒，控制整粒遍数和操作压力在7000 20000psi，得到平均粒度为80 150nm的脂质体c ；4)制造脂质体内外跨膜梯度以柱层析方法，用250 300mM的糖溶液，加入缓冲5剂调节PH为5 8，作为外相溶液，置换原脂质体外相的硫酸铵溶液，得到空白脂质体d ；5)脂质体载药将盐酸多柔比星溶于注射水或脂质体外相溶液中，配制浓度为 5 20%的溶液，将该溶液和空白脂质体d混合，在40 70°C保温一定时间，得盐酸多柔比 星脂质体混悬液e ；6)除菌、分装、保存将e于室温下采用0.22 μ m微孔滤膜过滤除菌，分装，即可得 到盐酸多柔比星脂质体注射剂。成品可在2 8°C条件下保存。本专利技术中，采用乙醇/叔丁醇混合溶剂溶解脂相成分叔丁醇是冻干法中的常用 溶剂，其凝固点高(25. 5°C )容易冻结，蒸气压高(24. 5°C时为5. 33kPa)有利于升华，能够 节省冻干时间，冻干周期短，适合产业化；且叔丁醇毒性和乙醇相似，不会引起安全性问题。 但其凝固点低所带来的问题是操作时容易发生凝固，一旦凝固则无法溶解脂相成分。乙醇 对脂相成分具有良好的溶解性，但其凝固点低(-114. 1°C )，若以乙醇做冻干溶剂，需要的 预冻温度低，对设备要求高且能源消耗大。专利技术人采用乙醇/叔丁醇做混合溶剂(乙醇与叔丁醇的体积比大于0，小于等于 1 9)，一方面可以使混合溶剂的凝固点下降，操作时保持液体状态，有利于脂相成分的溶 解；另一方面乙醇/叔丁醇溶解脂相成分时，所得溶液澄明，与水/叔丁醇混合溶剂溶解脂 相成分所得溶液相比，基本无黏性，有利于后续操作。将盐酸多柔比星脂质体粒度控制在80 150nm间，与小粒度(比如60nm)的该药 脂质体相比，释放减慢(见实施例1和对比例1)。本专利技术的优点采用乙醇/叔丁醇混合溶剂(乙醇与叔丁醇的体积比大于0，小于等于1 9)溶 解脂相成分，操作时混合溶剂保持液体状态，有利于脂相成分的溶解；所得溶液澄明，基本 无黏性，有利于后续操作。采用微射流对脂质体进行整粒，通过控制操作压力和整粒遍数得到所需粒度的脂 质体，均勻度好。且微射流整粒在整粒过程中物料暴露点少，时间短，有利于无菌保证，适合 产业化。将盐酸多柔比星脂质体粒度控制在80 150nm间，解决了 W0本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种盐酸多柔比星脂质体注射剂，其特征在于其中各组分的重量百分含量为：盐酸多柔比星０．０５～０．５％氢化大豆卵磷脂０．０２５～３％胆固醇０．００１～１．５％聚乙二醇化脂０．０１～１％硫酸铵０．００２５～２．５％糖２．８～２０％缓冲剂０．１～１０％其余为注射用水，同时满足：盐酸多柔比星和氢化大豆卵磷脂的重量比为０．１～２∶１，胆固醇和氢化大豆卵磷脂的重量比为０．１～１∶２，聚乙二醇化脂和氢化大豆卵磷脂的重量比为０．０７～７∶２。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李春雷，王金戌，张莉，李彦辉，张兰，郭文敏，申东民，王世霞，王彩霞，梁敏，
申请(专利权)人：石药集团中奇制药技术石家庄有限公司，
类型：发明
国别省市：13
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