靶向肽、复合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于纳米生物制剂技术领域，具体涉及一种靶向肽、复合物及其制备方法和应用。本发明专利技术所提供的靶向肽包括多肽SA

【技术实现步骤摘要】
靶向肽、复合物及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于纳米生物制剂
，具体涉及一种靶向肽、复合物及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]唾液酸在多种肿瘤细胞表面具有较高的含量，可作为肿瘤识别的标志物；同时，唾液酸含量升高可增强肿瘤细胞的迁移和浸润能力，降低其粘附能力，因而唾液酸可作为恶性肿瘤诊断、治疗的靶标。目前靶向唾液酸的配体主要有凝集素、抗体、小分子苯硼酸等，但它们存在免疫原性强、专一性不高等缺点，如苯硼酸可与其他糖类、糖蛋白、多巴胺等物质反应生成酯，因而限制了它们在体内的应用。因此，筛选靶向性好且能直接应用于活体内的新的唾液酸配体有较高的应用价值。
[0003]光学诊疗指光与光敏剂之间的相互作用，实现肿瘤诊断与治疗，光疗法可分为光热治疗(PTT)与光动力治疗(PDT)。PTT是指在激光照射后，光敏剂可以产生高温杀死细胞；PDT指在激光照射后，光敏剂与氧分子相互作用产生活性氧或者自由基，使细胞死亡。但是由于光敏剂肿瘤选择性差，体内稳定性差，溶解性差等缺陷，使得在肿瘤治疗中存在局限性。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的主要目的在于提供一种靶向肽和复合物，使其能够特异性靶向异常表达唾液酸的肿瘤细胞。本专利技术的另一目的在于提供靶向肽和复合物的制备方法，及其医疗用途。
[0005]为实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0006]第一方面，本专利技术提供了一种靶向肽，所述靶向肽用于靶向肿瘤细胞，所述肿瘤细胞异常表达唾液酸，所述靶向肽包括以下多肽中的至少一种：
[0007]多肽SA
‑
7，其氨基酸序列为AMDPRQSNRLYS；
[0008]多肽SA
‑
8，其氨基酸序列为TPHGYQPMQGKT；
[0009]多肽SA
‑
1，其氨基酸序列为VTITHCNQRSHC；
[0010]多肽SA
‑
2，其氨基酸序列为DIARTAKPSHWP；
[0011]多肽SA
‑
4，其氨基酸序列为KTPHWDWGHPYW；
[0012]多肽SA
‑
6，其氨基酸序列为YTTSAHGKLRHA。
[0013]可以理解的是，本专利技术所指的肿瘤细胞指表面过表达唾液酸的肿瘤细胞。
[0014]在一些实施例中，所述肿瘤细胞包括胶质细胞瘤、黑色素瘤、小细胞肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌、白血病、神经母细胞瘤、卵巢癌中的至少一种。
[0015]第二方面，本专利技术还提供了一种复合物，所述复合物包括光敏剂和上述靶向肽，所述光敏剂与所述靶向肽偶联。
[0016]在一些实施例中，所述光敏剂选自卟啉衍生物、酞青类、亚甲苯兰、苯卟啉衍生物、
卟酚衍生物中的至少一种。
[0017]在一些实施例中，所述光敏剂与所述靶向肽的N端偶联；和/或
[0018]所述光敏剂选自5
‑
(4
‑
羧苯基)
‑
10,15,2
‑
三苯基卟吩、间
‑
四羟基苯基二氢卟酚、5
‑
氨基酮戊酸、n
‑
天门冬酰基二氢卟酚中的至少一种。
[0019]可以理解的是，上述复合物可以肿瘤诊断试剂，或用于制备肿瘤诊断试剂；也可以为抗肿瘤纳米制剂，或用于制备抗肿瘤纳米制剂。优选地，肿瘤为胶质细胞瘤、黑色素瘤、小细胞肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌、白血病、神经母细胞瘤、卵巢癌中的至少一种。
[0020]第三方面，本专利技术还提供了一种上述复合物的制备方法，包括：将所述光敏剂偶联于所述靶向肽的步骤。
[0021]在一些实施例中，将所述光敏剂偶联于所述靶向肽的步骤包括：将所述光敏剂和所述靶向肽在偶联剂的催化作用下进行反应，获得偶联复合物。
[0022]可以理解的是，偶联剂包括但不限于硅烷偶联剂、钛酸酯偶联剂、铝酸酯偶联剂、磷酸酯偶联剂、双金属偶联剂等。在实际的反应过程中，可根据偶联剂的种类以及偶联位置，灵活调整具体的反应条件。
[0023]在一些实施例中，所述复合物的制备方法还包括：将所述偶联复合物溶解在有机溶剂中，在超声的条件下将水滴加到所述有机溶剂中，然后进行超滤以去除所述有机溶剂；
[0024]其中，所述有机溶剂为DMSO、二氯甲烷、THF、丙酮中的至少一种；
[0025]将所述偶联复合物以0.1
ꢀ‑
1mg/mL的浓度溶解在所述有机溶剂中。
[0026]第四方面，本专利技术还提供了前述靶向肽或上述复合物或上述制备方法在制备肿瘤诊断试剂和/或抗肿瘤纳米制剂中的应用。
[0027]在一些实施例中，所述肿瘤诊断试剂为黑色素瘤诊断试剂；和/或
[0028]所述抗肿瘤纳米制剂为抗黑色素瘤纳米制剂。
[0029]本专利技术提供的前述靶向肽，通过荧光滴定实验证实了多肽SA
‑
7、多肽SA
‑
8、多肽SA
‑
1、多肽SA
‑
2、多肽SA
‑
4和多肽SA
‑
6均能够和唾液酸相互作用，其中，SA
‑
7、SA
‑
8对唾液酸的结合能力比较强。而且，通过采用表面过表达唾液酸的肿瘤细胞作了进一步的验证，SA
‑
7等靶向肽可特异性靶向该些肿瘤细胞，表明对唾液酸具有高选择性和高靶向性。
[0030]本专利技术提供的上述复合物，通过靶向肽与卟啉进行偶联得到的，通过不同类型的细胞实验证明该复合物能够特异性靶向细胞膜表面上的唾液酸，通过建立黑色素瘤荷瘤模型，通过活体成像仪验证了本专利技术所述的复合物可以在体内靶向到肿瘤部位。
[0031]本专利技术提供的上述复合物的制备方法，工艺流程清楚，产品质量稳定。通过上述方法制备的复合物通过RP
‑
HPLC验证，纯度较高，无干扰峰，通过质谱检测其分子量为2076Da，通过透射电镜观察不同条件下组装的纳米颗粒水化粒径一致，溶液澄清透明，通过不同溶液进行稀释，稳定性强，通过连续的光照冷却循环研究，证明具有良好的光热转化稳定性。通过本专利技术制备方法制备的复合物，纯度高，稳定性强，具有良好的光热转化稳定性。
[0032]本专利技术提供的上述应用，通过激光照射实验，证实了该复合物可以明显抑制体内肿瘤细胞的生长，通过对小鼠体重及主要组织的病理切片分析，证实了该复合物具有良好的生物体相容性，无明显的生物毒性，在肿瘤诊断和抗肿瘤制剂中有较好的应用前景。
附图说明
[0033]图1为唾液酸偶联磁珠红外光谱图，A表示磁珠红外光谱图，B表示唾液酸偶联后磁珠红外光谱图；
[0034]图2为ER2738菌生长曲线图，横坐标为时间(小时)；
[0035]图3为噬菌体展示筛选后测序结果；
[0036]图4为多肽竞争性筛选结果；
[0037]图5为SA...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向肽，其特征在于，所述靶向肽用于靶向肿瘤细胞，所述肿瘤细胞异常表达唾液酸，所述靶向肽包括以下多肽中的至少一种：多肽SA
‑
7，其氨基酸序列为AMDPRQSNRLYS；多肽SA
‑
8，其氨基酸序列为TPHGYQPMQGKT；多肽SA
‑
1，其氨基酸序列为VTITHCNQRSHC；多肽SA
‑
2，其氨基酸序列为DIARTAKPSHWP；多肽SA
‑
4，其氨基酸序列为KTPHWDWGHPYW；多肽SA
‑
6，其氨基酸序列为YTTSAHGKLRHA。2.根据权利要求1所述的靶向肽，其特征在于，所述肿瘤细胞包括胶质细胞瘤、黑色素瘤、小细胞肺癌、肝癌、胃癌、乳腺癌、结肠癌、白血病、神经母细胞瘤、卵巢癌中的至少一种。3.一种复合物，其特征在于，所述复合物包括光敏剂和权利要求1或2所述的靶向肽，所述光敏剂与所述靶向肽偶联。4.根据权利要求3所述的复合物，其特征在于，所述光敏剂选自卟啉衍生物、酞青类、亚甲苯兰、苯卟啉衍生物、卟酚衍生物中的至少一种。5.根据权利要求3所述的复合物，其特征在于，所述光敏剂与所述靶向肽的N端偶联；和/或所述光敏剂选自5
‑
(4
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：何询，程易，张水华，张梦琪，李振伟，刘昙梅，刘中华，
申请(专利权)人：深圳市小分子新药创新中心有限公司，
类型：发明
国别省市：