毛脉酸模提取物及其有效部位在制备抗肿瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及毛脉酸模提取物及毛脉酸模有效部位在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明专利技术确定了毛脉酸模有效部位的分离与富集工艺，应用动物移植性肿瘤模型和人肿瘤细胞体外筛选为筛选手段，对毛脉酸模的提取物及毛脉酸模中二苯乙烯类部位、多糖类部位进行了研究，证实它们能显著抑制小鼠移植性肿瘤Ｓ１８０、Ｈ２２及Ｕ１４的生长，并具有抑制人肿瘤细胞ＨｅｐＧ－２、ＭＣＦ－７、Ａ５４９等生长的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药
具体涉及毛脉酸模提取物及其有效部位在制备抗肿瘤 药物中的应用。
技术介绍
恶性肿瘤是危害人类健康的主要疾病，据WHO统计，在全世界50多亿人口中平均 每年死于恶性肿瘤者达690万人，新发病例为870万例，且数字还在逐年增加，已成为继心 血管疾病之后居各类疾病死亡率的第二致死病因。恶性肿瘤的治疗虽然取得了很大进展， 但是目前还是缺乏理想的治疗药物，无法满足临床需要，为此恶性肿瘤被视为难治疾病，科 学工作者仍在不断寻找安全有效的抗肿瘤药物。毛脉酸模Rumex gmelini Turcz. ex Ledeb.为蓼科酸模属多年生草本植物，民间 以根入药。该植物广泛分布于黑龙江省大小兴安岭及张广才岭东部山区，资源十分丰富。临 床上对淋病、上呼吸道感染、癣和疮毒有确切疗效。经专利技术人研究，毛脉酸模中含有白藜芦 醇及白藜芦醇苷等二苯乙烯类成分，大黄酚、大黄酚苷、酸模素、大黄素、大黄素甲醚等蒽醌 类成分及黄铜类化合物，通过药效学研究表明毛脉酸模提取物和毛脉酸模有效部位对治疗 恶性肿瘤非常有效。但在文献中未见关于毛脉酸模提取物和其有效部位与恶性肿瘤有关的 治疗活性的药理学研究。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是研究毛脉酸模提取物的药效，设计毛脉酸模提取物在 制药中的应用。本专利技术的技术方案如下一、本专利技术提供了毛脉酸模提取物及其有效部位，该有效部位包括二苯乙烯类和 多糖类成分。1、毛脉酸模50%乙醇提取物的制备工艺将干燥的毛脉酸模根粉碎成最粗粉，称取一定的重量加入到索氏提取器中；用 70ml50%的乙醇在保持液体微沸的温度下连续回流提取4小时；待提取液冷却后过滤，在 常压下50 60°C蒸干；将得 的干膏按常规方法将其粉碎成粉状，得到毛脉酸模50%乙醇 提取物。2、毛脉酸模水提取物的制备工艺取毛脉酸模药材干燥根50g，粉碎后加入8倍量的水，热回流提取2次，每次lh，趁 热过滤，合并滤液。在60°C水浴上蒸干，得到毛脉酸模水提取物。3、毛脉酸模中二苯乙烯类成分的制备工艺取毛脉酸模干燥根粗粉，加70%乙醇加热回流提取3次，分别为3h、2h、lh，抽滤， 合并滤液，60°C水浴上蒸干，得到粗提物。将所得粗提物利用hpd450大孔吸附树脂富集二苯乙烯类成分上样浓度0. 4g/ml，树脂柱径高比为1 10，上清以2BV/h通过树脂。收集30%乙醇洗脱物，减压回收溶剂至干，得二苯乙烯类粗品。以80 100目的聚酰胺柱层析纯化所得粗品，工艺条件为上样浓度0. 2g/ml，最 佳上样量为药材与干树脂重量比为1 1，用30%乙醇以2BV/h流速洗脱，收集2BV 7BV 的洗脱液减压回收溶剂至干，得毛脉酸模二苯乙烯类成分提取物。所制备样品中二苯乙烯 类成分的含量达50%以上。4、毛脉酸模中多糖类成分的制备工艺取毛脉酸模干燥根粗粉500g，加入8倍量的75%的乙醇，加热回流提取3次，分别 为？！！二！^让，趁热抽滤，合并滤液。在60°C水浴上蒸干，通过AB-8大孔树脂，收集水洗脱部 位减压干燥得毛脉酸模多糖，通过含量计算多糖含量为60%以上。二、本专利技术涉及的毛脉酸模提取物及其有效部位的药效学实验结果如下(一 )毛脉酸模提取物体内抑制S180肿瘤药效学实验实验材料1、动物和瘤株昆明种小鼠，体重(20士2)g，雄性，由黑龙江中医药大学实验动物 中心提供；S180细胞株由哈尔滨医科大学肿瘤防治研究所提供。2、实验用药毛脉酸模50%乙醇提取物(按实施例一方法制备)和毛脉酸模水提 取物(按实施例二方法制备)，用时以0. 9%的生理盐水配制为所需浓度。3、阳性对照药环磷酰胺(CTX)山西普德药业有限公司生产，200mg/支，批号国 药准字H14023686。用时以0. 9%生理盐水溶解，配成3mg/ml的溶液。方法与结果小鼠80只，于接种肿瘤细胞后次日分为生理盐水组，阳性对照组，毛脉酸模50% 乙醇提取物高(25%)、中(12. 5%)、低(6. 25%)剂量组，毛脉酸模水提取物高(30%)、中 (15%)、低(7. 25% )剂量组，每组10只，连续灌胃给药10天，于停药次日处死小鼠，解剖 皮下瘤块并称重，分别计算各组的平均瘤重，并记录结果，计算毛脉酸模乙醇提取物的抑瘤 率。结果见表1。给药组平均瘤重抑瘤率二 (1 - - ) X100%空白对照组平均瘤重表1毛脉酸模提取物对S180移植性肿瘤生长的影响(ris)权利要求一种毛脉酸模提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。2.如权利要求1所述的毛脉酸模提取物，其特征在于该提取物包括水提取物和50%乙 醇提取物。3.如权利要求2所述的毛脉酸模50%乙醇提取物，其特征在于该提取物通过以下方法 制备得到将干燥的毛脉酸模根粉碎成最粗粉，称取一定的重量加入到索氏提取器中；用 70ml 50%的乙醇在保持液体微沸的温度下连续回流提取4小时；待提取液冷却后过滤，在 常压下50-60°C蒸干；将得到的干膏按常规方法将其粉碎成粉状，得到毛脉酸模50%乙醇 提取物。4.如权利要求2所述的毛脉酸模水提取物，其特征在于该提取物通过以下方法制备得 到取毛脉酸模药材干燥根50g，粉碎后加入8倍量的水，加热回流提取2次，每次lh，趁热 过滤，合并滤液。在60°C水浴上蒸干，得到毛脉酸模水提取物。5.一种毛脉酸模有效部位在制备抗肿瘤药物中的应用。6.如权利要求5所述一种毛脉酸模有效部位在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于 所述的毛脉酸模有效部位，包括从毛脉酸模中提取分离得到的二苯乙烯类成分和多糖类成 分。7.如权利要求6所述的一种毛脉酸模有效部位在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在 于二苯乙烯类成分通过以下方法制备得到以二苯乙烯类成分含量为指标，将毛脉酸模干 燥根粗粉经70%乙醇溶液回流提取后，用hpd450大孔吸附树脂富集二苯乙烯类成分上 样浓度0.4g/ml，树脂柱径高比为1 10，上清以2BV/h通过树脂，收集30%乙醇洗脱物蒸 干，得二苯乙烯类粗品。将所得粗品用80-100目的聚酰胺柱层析纯化，工艺条件上样浓度 0.2g/ml，最佳上样量为药材与干树脂重量比为1 1，用30%乙醇以2BV/h流速洗脱。研 究结果表明聚酰胺柱层析可用于毛脉酸模中二苯乙烯类成分的分离纯化，所制备样品中二 苯乙烯类成分的含量达50%以上。8.如权利要求6所述的一种毛脉酸模有效部位在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在 于多糖类成分通过以下方法制备得到取毛脉酸模干燥根粗粉500g，加入8倍量的75%的 乙醇，加热回流提取3次，分别为2h，2h，lh，趁热抽滤，合并滤液，在60°C水浴上蒸干，通过 AB-8大孔树脂，收集水洗脱部位减压干燥得毛脉酸模多糖，通过含量计算多糖含量为60% 以上。9.如权利要求2所述的毛脉酸模提取物，其特征在于该提取物包括白藜芦醇、白藜芦 醇苷、大黄酚、大黄酚苷、酸模素、大黄素、大黄素甲醚。10.一种权利要求1-9任一项所述的毛脉酸模提取物及其有效部位在制备抗肿瘤药物 中的应用。全文摘要本专利技术涉及毛脉酸模提取物及毛脉酸模有效部位在制备抗肿瘤药物中的应用。本专利技术确定了毛脉酸模有效部位的分离与富集工艺，应用动物移植性肿瘤模型和人肿瘤细胞体外筛选为筛选手段，对毛脉酸模的提取物及毛脉酸模中二苯乙烯类部位、本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种毛脉酸模提取物在制备抗肿瘤药物中的应用。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王振月，侯素云，王谦博，唐先明，高宁，陈智岩，
申请(专利权)人：王振月，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]