一种发芽谷物及其制品中γ-氨基丁酸的测定方法技术

本发明专利技术提供了一种发芽谷物及其制品中γ

【技术实现步骤摘要】
一种发芽谷物及其制品中
γ
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氨基丁酸的测定方法


[0001]本专利技术涉及γ
‑
氨基丁酸测定
，特别是涉及一种发芽谷物及其制品中γ
‑
氨基丁酸的测定方法。

技术介绍

[0002]目前食品中γ
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氨基丁酸的测定方法主要包括比色法、酶标仪法、薄层扫描法、氨基酸分析仪法、离子色谱法、高效液相色谱法、高效液相色谱
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串联质谱法。其中，比色法、酶标仪法、薄层扫描法灵敏度低；氨基酸分析仪及离子色谱法对样品的种类有较大的限制，其分析条件较为严苛；高效液相色谱法需要将样品进行衍生化处理，衍生化试剂有毒且实验步骤较繁琐；高效液相色谱
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质谱联用法(HPLC
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MS/MS)是目前较为先进的检测方法，灵敏度准确度相对高，且简单快捷。
[0003]现有技术中，黎亮星等人利用高效液相色谱
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质谱联用法测定粮食制品中γ
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氨基丁酸的含量，具体方法为：前处理用水提取，用乙腈稀释，采用乙腈(含0.1％甲酸)
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0.5mmol/L乙酸铵溶液(含0.1％甲酸)为流动相，测得的小麦胚芽及胚芽米加标回收率(回收率表征结果准确性，越接近100％，准确性越高)为94.1％～98.3％；苗雪雪等人通过高效液相色谱
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串联质谱法测定稻米和米糠中γ
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氨基丁酸，具体方法为：前处理用乙醇
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水(体积比4:1)提取，采用乙腈
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0.1％甲酸水为流动相，测得糙米加标回收率84.0％～90.2％。
[0004]上述技术方案仅是提供了大致的测定方法，均未公开具体步骤，且目前采用该测定方法检测其他样品，其加标回收率(结果准确性)未达到99％～101％。
[0005]因此，亟需一种发芽谷物及其制品中γ
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氨基丁酸的测定方法，能够解决现有高效液相色谱
‑
质谱联用法具体步骤不清晰，且检测其他样品时结果准确率较低的问题。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种发芽谷物及其制品中γ
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氨基丁酸的测定方法，以解决上述现有高效液相色谱
‑
质谱联用法具体步骤不清晰，且检测其他样品时结果准确率偏低的问题。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0008]本专利技术提供一种发芽谷物及其制品中γ
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氨基丁酸的测定方法，包括以下步骤：
[0009]S1.样品前处理：样品混匀后，研磨至全部通过60目筛，装入密封的容器中，室温下保存；
[0010]S2.提取：称取0.5g样品于50ml离心管中，加入10ml的0.1％甲酸水溶液，超声提取后在漩涡混匀器上涡旋，离心处理后将上清液转入25ml容量瓶中，剩余样品残渣再用10ml的0.1％甲酸水溶液重复上述提取步骤提取一次，合并2次提取液，将提取液用0.1％甲酸水溶液定容至25ml；
[0011]S3.稀释：将提取液用0.1％的甲酸水溶液稀释100倍；
[0012]S4.测定：采用高效液相色谱
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质谱联用法进行γ
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氨基丁酸测定；其中流动相为甲
醇
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0.1％甲酸水。
[0013]优选地，步骤S2中，超声提取的时间为30min。
[0014]优选地，步骤S2中，超声提取的温度为30℃
[0015]优选地，步骤S2中，涡旋的时间为2min。
[0016]优选地，步骤S2中，离心的转速为5000r/min，时间为5min。
[0017]优选地，步骤S4中，色谱柱为C
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柱。
[0018]优选地，步骤S4中，质谱条件是离子源温度550℃，喷雾器GS1和辅助加热器GS2压力50psi，气帘气压力35psi，离子化电压5500V，ESI源，正模式，进样量2μL。
[0019]本专利技术相对于现有技术取得了以下有益技术效果：
[0020]本专利技术提供的一种发芽谷物及其制品中γ
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氨基丁酸的测定方法，该方法能够安全简便快速准确测定发芽谷物及其制品中的γ
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氨基丁酸的含量，采用高效液相色谱
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质谱联用法，前处理采用0.1％甲酸水提取，提取液用0.1％甲酸水稀释100倍，用甲醇
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1％甲酸水作为流动相，该方法可使发芽谷物及其制品中的γ
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氨基丁酸的检测准确性达到99％～101％。
具体实施方式
[0021]下面将结合本专利技术实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0022]本专利技术的目的是提供一种发芽谷物及其制品中γ
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氨基丁酸的测定方法，以解决现有技术存在的问题。
[0023]本专利技术提供一种发芽谷物及其制品中γ
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氨基丁酸的测定方法，包括以下步骤：
[0024]S1.样品前处理：样品混匀后，研磨至全部通过60目(即孔径0.25mm)筛，装入密封的容器中，室温下保存；
[0025]S2.提取：称取0.5g样品于50ml离心管中，加入10ml的0.1％甲酸水溶液，在30℃下，超声提取30min后，在漩涡混匀器上涡旋2min，于5000r/min离心5min后将上清液转入25ml容量瓶中，剩余样品残渣再用10ml的0.1％甲酸水溶液重复上述提取步骤提取一次，合并2次提取液，将提取液用0.1％甲酸水溶液定容至25ml；
[0026]S3.稀释：将提取液用0.1％的甲酸水溶液稀释100倍；
[0027]S4.测定：采用高效液相色谱
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质谱联用法进行γ
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氨基丁酸测定；色谱柱为C
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柱，柱温35℃，进样量为2μL，流速为0.2ml/min，流动相采用甲醇
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0.1％甲酸水(1+9)；质谱选用模式为正离子(ESI+)扫描，离子源为电喷雾电离(ESI)源，扫描方式为多反应监测(MRM)，雾化气为氮气，离子源温度550℃，喷雾器GS1和辅助加热器GS2压力50psi，气帘气压力35psi，离子化电压5500V。
[0028]专利技术人针对上述技术方案进行了多组对照试验，试验结果如下：
[0029][0030]氨基丁酸是水溶性物质，微溶于甲醇/乙腈/乙醇等试剂；因水提取液含有水溶性蛋白，易堵塞色谱柱，故不能直接上机；三氯乙酸提取时，要求的浓度偏高，且无试剂转化过程长期测定时对仪器有影响；水提取简单，甲酸可沉淀蛋白，故甲酸水溶液便于上机操作，流动相是高比例的甲酸水，提取溶剂优先考虑用0.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种发芽谷物及其制品中γ
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氨基丁酸的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：S1.样品前处理：样品混匀后，研磨至全部通过60目筛，装入密封的容器中，室温下保存；S2.提取：称取0.5g样品于50ml离心管中，加入10ml的0.1％甲酸水溶液，超声提取后在漩涡混匀器上涡旋，离心处理后将上清液转入25ml容量瓶中，剩余样品残渣再用10ml的0.1％甲酸水溶液重复上述提取步骤提取一次，合并2次提取液，将提取液用0.1％甲酸水溶液定容至25ml；S3.稀释：将提取液用0.1％的甲酸水溶液稀释100倍；S4.测定：采用高效液相色谱
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质谱联用法进行γ
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氨基丁酸测定；其中流动相为甲醇
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0.1％甲酸水。2.根据权利要求1所述的发芽谷物及其制品中γ
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氨基丁酸的测定方法，其特征在于：步骤S2中，超声提取的时间为30min。3.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈幸莺，钟鹏鹏，陈克明，张瑶，邓晓庆，谭莉，陈旭霞，张明，
申请(专利权)人：湖南振华检测技术有限公司，
类型：发明
国别省市：