VDAC1抑制剂在制备治疗/预防阿尔茨海默症的药物中的用途制造技术

本发明专利技术属于药物研究技术领域，具体涉及一种VDAC1抑制剂在制备治疗/预防阿尔茨海默症的药物中的用途。构建AD细胞模型，结果显示VDAC1在Aβ1

【技术实现步骤摘要】
VDAC1抑制剂在制备治疗/预防阿尔茨海默症的药物中的用途


[0001]本专利技术属于药物研究
，具体涉及一种VDAC1抑制剂在制备治疗/预防阿尔茨海默症的药物中的用途。

技术介绍

[0002]阿尔茨海默病(AD)，又译为阿兹海默病、老人失智症、老年痴呆症、脑退化症，是一种持续性神经功能障碍，也是失智症中最普遍的成因。阿尔茨海默症常起病于老年或老年前期，多缓慢发病，逐渐进展，以痴呆为主要表现，多有同病家族史、病情发展较快。阿尔茨海默病的症状表现为逐渐严重的认知障碍(记忆障碍、学习障碍、注意障碍、空间认知机能、问题解决能力的障碍)，逐渐不能适应社会。据中国阿尔茨海默病协会2011年的公布调查结果显示，全球有约3650万人患有痴呆症，每7秒就有一个人患上此病，平均生存期只有5.9年，是威胁老人健康的“四大杀手”之一。严重的情况下无法理解会话内容，无法解决如摄食、穿衣等简单的问题，最终瘫痪在床，病情恶化的途中有的患者会伴有被害妄想幻觉等现象出现。通常还能见到诸如行为语言粗暴、举止下流等周边症状，所以在护理上有很大的困难。
[0003]电压依赖性阴离子通道蛋白(Voltage
‑
dependent anion channel protein，VDAC)普遍存在于线粒体外膜，通常被认为是代谢物扩散进出线粒体的主要方式。在哺乳动物线粒体中发现了三种VDAC同种型：VDAC1、VDAC2和VDAC3，其中VDAC1表达最为广泛，同时也是影响线粒体功能的主要蛋白。但VDAC1是否影响AD的发展尚未有报道。

技术实现思路

[0004]鉴于以上技术问题，本专利技术提供以下技术方案：
[0005]本专利技术第一方面，提供一种VDAC1抑制剂在制备治疗/预防阿尔茨海默症的药物中的用途。
[0006]优选地，所述VDAC1抑制剂用于制备抑制铁死亡的药物。
[0007]优选地，所述VDAC1抑制剂用于制备缓解线粒体功能障碍的药物。
[0008]优选地，所述VDAC1抑制剂用于制备AMPK/mTOR通路激活剂。
[0009]优选地，所述VDAC1抑制剂为VBIT
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12、VBIT
‑
4或NSC 15364。
[0010]本专利技术第二方面，提供一种治疗/预防阿尔茨海默症的药物制剂，包括所述VDAC1抑制剂。
[0011]对比现有技术，本专利技术的有益效果为：
[0012]本专利技术提供了VDAC1抑制剂在制备治疗/预防阿尔茨海默症的药物中的用途。构建AD细胞模型，结果显示VDAC1在Aβ1
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42诱导后上调，并进一步促进细胞线粒体功能障碍和铁死亡，介导AD的发展。
附图说明
[0013]图1是不同处理对SH
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SY5Y细胞活力的影响；
[0014]图2是不同处理对GPX4及FTH1的影响；A、蛋白印迹图；B、蛋白相对表达水平；
[0015]图3是不用处理对SH
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SY5Y细胞中complex I活性的影响；
[0016]图4是抑制铁死亡可减少Aβ1
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42处理后SH
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SY5Y细胞中VDAC1的上调；A、蛋白印迹图；B、VDAC1的相对表达水平；
[0017]图5是敲降VDAC1可抑制Aβ1
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42处理后SH
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SY5Y细胞活力的降低；A、蛋白印迹图；B、VDAC1的相对表达水平；C、细胞活力统计。
具体实施方式
[0018]为了使本领域技术人员更好地理解本专利技术的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明，但所举实施例不作为对本专利技术的限定。
[0019]VDAC1通过促进细胞线粒体功能障碍和铁死亡介导AD的发展
[0020]1、细胞培养
[0021]将SH
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SY5Y细胞复苏后，在37℃和5％的CO2下，含有10％胎牛血清和1％青霉素或链霉素的Dulbecco
‑
改良的Eagle培养基(DMEM)中培养。Aβ1
‑
42组为用Aβ1
‑
42(5μM)处理SH
‑
SY5Y细胞；Fer
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1组为用Ferrostatin
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1(5μM，30min)对SH
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SY5细胞进行处理后单独培养；Fer
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1+Aβ1
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42组为先用Ferrostatin
‑
1(5μM，30min)对SH
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SY5细胞进行预处理后加入Aβ1
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42(5μM)刺激细胞。
[0022]2、Aβ1
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42对细胞活力和GPX4、FTH1在SH
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SY5Y细胞中的表达的影响
[0023]分别对Aβ1
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42、Fer
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1、Aβ1
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42+Fer
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1组检测GPX4、FTH
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1的水平，用RIPA缓冲液提取SH
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SY5Y的总蛋白，并用BCA法测定蛋白浓度。等量的蛋白通过12.5％的SDS PAGE进行分析，并转移到PVD上。SDS PAGE并转移到PVDF膜上。然后用5％BSA封锁PVDF膜，用1:1000的GPX4、FTH
‑
1和β
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actin的一抗在4℃下孵育过夜。第二天，将PVDF膜与1:10000马萝卜过氧化物酶(HRP)共轭二抗在室温下孵育1h，然后用ECL检测图像，并用Gel Imaging系统进行拍照，β
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肌动蛋白作为内部参照物，目标蛋白的相对表达水平表示为目标蛋白与β
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肌动蛋白的灰度值之比，肌动蛋白的相对表达水平被表示为目标蛋白与β
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肌动蛋白的灰度值之比。
[0024]3、Aβ1
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42对线粒体功能障碍的影响
[0025]对Aβ1
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42、Fer
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1和Aβ1
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42+Fer
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1组SH
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SY5Y细胞用复合物I酶活性测定试剂盒和细胞色素c氧化酶测定试剂盒检测线粒体呼吸链复合体I的水平。
[0026]4、抑制VDAC1对Aβ1
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42诱导的SH
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SY5Y细胞的细胞活力、铁死亡相关蛋白和线粒体功能障碍的影响
[0027]转染si
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VDAC1至SH
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SY5Y细胞，用Western blotting检测Aβ1
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42、Fer
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1和Aβ1
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42+Fer
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1组中SH
‑
SY5Y细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.VDAC1抑制剂在制备治疗/预防阿尔茨海默症的药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述VDAC1抑制剂用于制备抑制铁死亡的药物。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述VDAC1抑制剂用于制备缓解线粒体功能障碍的药物。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述VDAC1抑制剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：张本斯，李庄，张秀君，唐洗敏，龚志婷，李艳娇，刘建婷，石纯，张丽梅，马诺杰，陈国强，
申请(专利权)人：大理大学，
类型：发明
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