一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法，属于化学分析及检测技术领域，包括如下步骤：S1、对照品制备：取萝卜硫苷标准品适量，甲醇溶解，配置成一定浓度的对照品溶液；S2、供试品前处理：西兰花种子粉碎，立即加入沸水提取，并定容至一定体积；S3、色谱检测：流动相：甲醇：0.1％磷酸梯度洗脱，0

【技术实现步骤摘要】
一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法


[0001]本专利技术属于化学分析及检测
，具体涉及一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法。

技术介绍

[0002]近年来，研究人员发现食用西兰花具有防癌功效，大量研究表明硫代葡萄糖苷(GLS，简称硫苷)是西兰花发挥防癌效果的主要物质。它是一类含有硫和氮的具有多功能生物活性的植物次生代谢产物，主要分布于十字花科植物中。萝卜硫苷属于硫代葡萄糖苷中的一种，目前检测萝卜硫苷大多数以高效液相色谱仪为主，然而萝卜硫苷在常规C18色谱柱中不保留，这也给液相色谱定量带来了一定的困难。
[0003]高荣凯等人建立了一种同时测定莱菔子中萝卜硫苷和4
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甲基亚磺酰基
‑3‑
丁烯基硫代葡萄糖苷含量的方法(高荣凯,关亮俊,任海东,王敏,李琦,张宏桂.HPLC法同时测定莱菔子中萝卜硫苷和4
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甲基亚磺酰基
‑3‑
丁烯基硫代葡萄糖苷的含量[J].中国药房,2018,29(21):2898
‑
2901.)，但萝卜硫苷和4
‑
甲基亚磺酰基
‑3‑
丁烯基硫代葡萄糖苷分离度低，且流动相用到缓冲盐，增加了设备维护成本。
[0004]石林娟等人建立了萝卜硫苷的液相色谱定量方法(石林娟,潘见,谢慧明,王园.高效液相色谱法测定西兰花籽提取物中萝卜硫苷含量[J].食品科技,2013,38(06):231
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236.DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2013.06.020.)，但色谱柱要求专属性强，且萝卜硫苷出峰早，对于杂质多的供试品，容易存在干扰。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法，以解决萝卜硫苷定量精准检测效果较差的问题。
[0006]本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
[0007]一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法，包括如下步骤：
[0008]S1、对照品制备：取萝卜硫苷标准品适量，甲醇溶解，配置成一定浓度的对照品溶液；萝卜硫苷，分子式为：C12H23NO10S3，分子量437.5，CAS号为：21414
‑
41
‑
5；
[0009]S2、供试品前处理：西兰花种子粉碎，立即加入沸水提取，并定容至一定体积；
[0010]S3、色谱检测：色谱柱：C18
‑
PAQ，4.6mm
×
250mm，5μm；流动相：甲醇：0.1％磷酸梯度洗脱，0
‑
8min保持5％甲醇，8.1
‑
13min由5％
‑
95％甲醇，13.1
‑
22min95％
‑
5％甲醇；进样量：10μL；柱温：30℃；流速：1mL/min；运用标准曲线进行定量。
[0011]进一步地，西兰花粉碎后要求立即投入沸水中煮沸，煮沸时间为30min。
[0012]进一步地，西兰花种子称样量为200mg，定容体积为250mL。
[0013]进一步地，色谱柱为C18
‑
PAQ，4.6mm
×
250mm，5μm。
[0014]进一步地，萝卜硫苷线性溶液浓度范围为：4.56μg/mL
‑
228μg/mL，浓度分别为：
4.56μg/mL、9.12μg/mL、22.8μg/mL、45.6μg/mL、114μg/mL、228μg/mL。
[0015]进一步地，萝卜硫苷重复性溶液浓度为：28.5μg/mL。
[0016]进一步地，萝卜硫苷检出限溶液浓度为：0.02μg/mL。
[0017]本专利技术的有益效果：
[0018]本专利技术采用高效液相色谱技术检测西兰花种子中的萝卜硫苷，前处理简单，环保，在本专利技术的高效液相色谱法检测条件下，萝卜硫苷呈现单峰，无杂质干扰。具有操作简单且环保、精密度高和灵敏度高等优点，适合于萝卜硫苷的分析检测。
附图说明
[0019]下面结合附图对本专利技术作进一步的说明。
[0020]图1是本专利技术中萝卜硫苷标准曲线的示意图；
[0021]图2是本专利技术中萝卜硫苷对照品，浓度9.12μg/mL的色谱图；
[0022]图3是本专利技术中萝卜硫苷对照品，浓度22.8μg/mL的色谱图；
[0023]图4是本专利技术中萝卜硫苷对照品，浓度45.6μg/mL的色谱图；
[0024]图5是本专利技术中萝卜硫苷对照品，浓度114μg/mL的色谱图；
[0025]图6是本专利技术中萝卜硫苷对照品，浓度228μg/mL的色谱图；
[0026]图7是本专利技术中萝卜硫苷对照品，浓度4.56μg/mL的色谱图；
[0027]图8是本专利技术实施例2中供试品溶液
‑
1的色谱图；
[0028]图9是本专利技术实施例2中供试品溶液
‑
2的色谱图；
[0029]图10是本专利技术实施例2中供试品溶液
‑
3的色谱图；
[0030]图11是本专利技术实施例2中供试品溶液
‑
4的色谱图；
[0031]图12是本专利技术实施例2供供试品溶液
‑
5的色谱图；
[0032]图13是本专利技术实施例2中供试品溶液
‑
6的色谱图；
[0033]图14是本专利技术实施例3中检出限供试品溶液
‑
1的色谱图；
[0034]图15是本专利技术实施例3中检出限供试品溶液
‑
2的色谱图。
具体实施方式
[0035]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0036]实施例1
[0037]对照品溶液的制备：精密称取适量萝卜硫苷对照品，用甲醇配制萝卜硫苷标准溶液浓度为228μg/m，摇匀；精密移取1mL，置50mL容量瓶，作为工作溶液。精密移取工作溶液1mL，置25mL容量瓶中、精密移取工作溶液1mL置10mL容量瓶中、精密移取2mL工作溶液置10mL容量瓶中、精密移取5mL工作溶液置10mL容量瓶中，分别加入纯甲醇溶解并定容，摇匀，制备成萝卜硫苷标准溶液浓度为：4.56μg/mL、9.12μg/mL、22.8μg/mL、45.6μg/mL、114μg/mL、228μg/mL。
[0038]测定法：精密吸取供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪测定，以标准工作溶液浓
度为横坐标，以峰面积为纵坐标，以线性方程绘制标准曲线。
[0039]高效液相色谱条本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、对照品制备：取萝卜硫苷标准品适量，甲醇溶解，配置成对照品溶液；S2、供试品前处理：西兰花种子粉碎，立即加入沸水提取，定容；S3、色谱检测：流动相：甲醇：0.1％磷酸梯度洗脱，0
‑
8min保持5％甲醇，8.1
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13min由5％
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95％甲醇，13.1
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22min95％
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5％甲醇；进样量：10μL；柱温：30℃；流速：1mL/min；运用标准曲线进行定量。2.根据权利要求1所述的一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法，其特征在于，西兰花粉碎后立即投入沸水中煮沸，煮沸时间为30min。3.根据权利要求1所述的一种利用高效液相色谱技术检测西兰花种子中萝卜硫苷的方法，其特征在于，西兰花种子称样量为...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈君子，冯宝军，王亚，储浩侠，刘芳，李慧，
申请(专利权)人：安徽本森堂生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：