抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对、核酸分子、胶体金试纸、试剂盒和应用制造技术

本发明专利技术属于免疫学领域和分子病毒学的技术领域，公开了抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对、核酸分子、胶体金试纸、试剂盒和应用。在抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段包括第一抗体和第二抗体；第一抗体的重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1～3所示的互补决定区1～3，轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:4～6所示的互补决定区1～3；第二抗体的重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:7～9所示的互补决定区1～3，轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:10～12所示的互补决定区1～3。本发明专利技术的抗体对特异性识别多种猫杯状病毒的变异毒株，不与引起猫常见临床疾病其他病毒发生阳性反应，表现出优秀的特异性和灵敏度，可用于建立快速、精确检测猫杯状病毒的方法。精确检测猫杯状病毒的方法。精确检测猫杯状病毒的方法。

【技术实现步骤摘要】
抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对、核酸分子、胶体金试纸、试剂盒和应用


[0001]本专利技术属于免疫学领域和分子病毒学的
，尤其涉及一种抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对、核酸分子、胶体金试纸、试剂盒和应用。

技术介绍

[0002]猫杯状病毒属于杯状病毒科水疮性病毒属，是一种线性单股正链RNA病毒，病毒粒子外观呈对称多边型，结构紧凑，具有稳定的理化性质。猫杯状病毒对于猫科动物具有高传染性，病毒感染后可引起猫科动物上呼吸道感染、慢性肠胃炎以及口腔溃疡等疾病，严重的可引起严重、急性、致死性全身性的疾病，死亡率高达50％，对于猫及猫科动物造成了严重的影响。
[0003]目前，用于猫杯状病毒常规的检测方法有病毒分离鉴定、中和试验、RT
‑
PCR以及胶体金试纸法等。但是，病毒分离及中和试验的检测所需时间长；RT
‑
PCR虽然灵敏度高，但是结果容易受到外界因素的影响；而胶体金试纸法受到所使用到的抗体质量的影响，检测灵敏度和特异性较低，检测结果容易出现假阳性和假阴性。

技术实现思路

[0004]为了提高对猫杯状病毒检测的敏感性和特异性，并建立快速检测猫杯状病毒的方法，本专利技术提供了一种抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对、核酸分子、胶体金试纸、试剂盒和应用。
[0005]第一方面，本专利技术提供的一种抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段采用以下的技术方案：
[0006]一种抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段，包括第一抗体和第二抗体；
[0007]所述第一抗体的重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1～3所示的互补决定区1～3，轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:4～6所示的互补决定区1～3；
[0008]所述第二抗体的重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:7～9所示的互补决定区1～3，轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:10～12所示的互补决定区1～3。
[0009]在一些具体的实施方式中，所述第一抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示或者是与SEQ ID NO:13所示序列具有至少80％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示或者是与SEQ ID NO:14所示序列具有至少80％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列；
[0010]所述第二抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示或者是与SEQ ID NO:15所示序列具有至少80％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示或者是与SEQ ID NO:16所示序列具有至少80％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。
[0011]在一些具体的实施方式中，所述第一抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示或者是与SEQ ID NO:17所示序列具有至少70％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:18所示或者是与SEQ ID NO:18所示序列具有至少70％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列；
[0012]所述第二抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:19所示或者是与SEQ ID NO:19所示序列具有至少70％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:20所示或者是与SEQ ID NO:20所示序列具有至少70％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。
[0013]在一些具体的实施方式中，所述第一抗体上还包含有可检测的标记，所述可检测的标记选自放射性同位素、荧光染料、生物素、胶体金和酶中的一种或多种。
[0014]在一些具体的实施方式中，所述第二抗体上还包含有可检测的标记，所述可检测的标记选自放射性同位素、荧光染料、生物素、胶体金和酶中的一种或多种
[0015]第二方面，本专利技术提供的一种核酸分子采用以下的技术方案：
[0016]一种核酸分子，编码上述抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段。
[0017]在一些具体的实施方式中，所述核酸分子包括序列如SEQ ID NO:21～24所示的核苷酸片段中的一段或多段，或者是与SEQ ID NO:21～24所示序列完全互补或在中度至高度严格条件下杂交的核苷酸片段中的一段或多段。
[0018]第三方面，本专利技术提供的一种胶体金试纸采用以下的技术方案：
[0019]一种胶体金试纸，包括上述的抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段。
[0020]在一些具体的实施方式中，所述第一抗体为捕获抗体，所述第二抗体为标记抗体。
[0021]第四方面，本专利技术提供的一种试剂盒采用以下的技术方案：
[0022]一种用于检测猫杯状病毒的试剂盒，包括上述抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段、上述核酸分子和/或上述胶体金试纸。
[0023]第五方面，本专利技术提供了上述抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段、核酸分子、胶体金试纸和/或试剂盒在猫杯状病毒或其衣壳蛋白的定性和定量检测中的应用。
[0024]有益效果：
[0025]本专利技术提供的抗体对与猫杯状病毒具有良好的结合能力，将其应用于猫杯状病毒或其衣壳蛋白的检测中时，该抗体对能特异性识别多种猫杯状病毒的变异毒株，且与引起猫常见临床疾病其他病毒不发生阳性反应，表现出优秀的特异性和灵敏度，可作为胶体金试纸中的检测抗体和捕获抗体使用，从而建立快速检测猫杯状病毒的方法，对于预防和控制猫杯状病毒流行具有重要意义。
附图说明
[0026]图1为本专利技术实施例5中实施例3提供的胶体金试纸的检测敏感度实验结果图；
[0027]图2为本专利技术实施例5中实施例4提供的胶体金试纸的检测敏感度实验结果图；
[0028]图3为本专利技术实施例5中对照组提供的胶体金试纸的检测敏感度实验结果图；
[0029]图4为本专利技术实施例6中实施例3提供的胶体金试纸的检测特异性实验结果图；
[0030]图5为本专利技术实施例6中实施例4提供的胶体金试纸的检测特异性实验结果图；
[0031]图6为本专利技术实施例6中对照组提供的胶体金试纸的检测特异性实验结果图；
[0032]图7为本专利技术实施例7中抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体或其抗原结合片段的稳定性实验结果图(初始)；
[0033]图8为本专利技术实施例7中抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体或其抗原结合片段的稳定性实验结果图(45℃下放置1个月)；
[0034]图9为本专利技术实施例7中抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体或其抗原结合片段的稳定性实验结果图(45℃下放置2个月)；
[0035]图10为本专利技术实施例7中抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体或其抗原结合片段的稳定性实验结果图(45℃下放置3个月)；
[0036]图11为本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段，其特征在于，包括第一抗体和第二抗体；所述第一抗体的重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1～3所示的互补决定区1～3，轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:4～6所示的互补决定区1～3；所述第二抗体的重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:7～9所示的互补决定区1～3，轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:10～12所示的互补决定区1～3。2.根据权利要求1所述的抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段，其特征在于，所述第一抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:13所示或者是与SEQ ID NO:13所示序列具有至少80％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示或者是与SEQ ID NO:14所示序列具有至少80％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列；所述第二抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示或者是与SEQ ID NO:15所示序列具有至少80％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示或者是与SEQ ID NO:16所示序列具有至少80％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列。3.根据权利要求1所述的抗猫杯状病毒衣壳蛋白抗体对或其抗原结合片段，其特征在于，所述第一抗体的重链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:17所示或者是与SEQ ID NO:17所示序列具有至少70％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列，轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:18所示或者是与SEQ ID NO:18所示序列具有至少70％序列同一性且保留相应母体序列生物活性的变体序列；所述第二抗体的重链恒定区的氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：张涛，林奕婷，邹柳，周国栋，盛布恩，张松，
申请(专利权)人：厦门同仁心生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：