一种免疫调节肽BugaCATH及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种免疫调节肽BugaCATH及其应用。属于生物医学领域。该免疫调节肽BugaCATH是中国两栖类中华蟾蜍皮肤修复肽基因编码的一种第六位半胱氨酸和第十三位半胱氨酸组成一对分子内二硫键的环状多肽，分子量3156.67道尔顿，等电点8.76，其氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。编码免疫调节肽BugaCATH前体的基因(GenBank accession:OQ870533)由663个核苷酸序列组成，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示；其中第322

【技术实现步骤摘要】
一种免疫调节肽BugaCATH及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种免疫调节肽BugaCATH及其应用。

技术介绍

[0002]两栖动物作为水生到陆生脊椎动物的过渡类型，其生活环境复杂多样。两栖动物的皮肤裸露、光滑、没有毛发、鳞片覆盖，面临着较多的威胁和挑战。为了适应陆生和水生中复杂的生活环境，两栖动物进化出一套独特而强大的皮肤防御系统。皮肤作为一个重要的物理屏障，具有防止微生物入侵，以及保持机体温度和液体稳态的功能。皮肤创伤会瞬间破坏这一屏障，对健康构成巨大威胁。因此皮肤损伤愈合对机体维持外界屏障至关重要。皮肤伤口愈合是组织损伤后的自我修复与重建完整皮肤的动态过程，其过程由多种细胞类型和众多因素严格调控。
[0003]两栖动物的皮肤对维持其自身生存和适应栖息地多样化的生态环境起着非常重要的作用，必须为其生存提供必要的保障。两栖动物的皮肤能够分泌大量生物活性分子，用以抵御环境中的生物和非生物侵袭。中华蟾蜍（Bufo gargarizans）是我国药用价值很高的经济动物，对它们的研究主要集中在其皮肤产物蟾酥和蟾衣上，而对于其促皮肤修复的活性成分鉴定和机制研究未见报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的第一目的在于提供一种免疫调节肽BugaCATH；第二目的在于提供所述的免疫调节肽BugaCATH的应用。
[0005]本专利技术的第一目的是这样实现的，所述的免疫调节肽BugaCATH的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。
[0006]本专利技术所述的免疫调节肽BugaCATH是中国两栖动物中华蟾蜍防御肽基因编码的一种第六位半胱氨酸和第十三位半胱氨酸组成一对分子内二硫键的环状多肽，由29个氨基酸残基构成，分子量3156.67道尔顿，等电点8.76，其氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示：Asn Gly Lys Lys Lys Cys Lys Glu Pro Glu Lys Leu Cys Leu Lys Pro Gly Gly His SerVal Ile Phe Asp Ala Ser Val Asn Glu。
[0007]该免疫调节肽前体的编码基因由663个核苷酸组成，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示，其自5
’
端至3
’
端序列为：atgaggagctggtggctgtctctgctgctcgtctctgctgtcacattacatggctgtctctctgacactgcagaacctgaggtccaagatggaagatctataggagacgtcattgacctctacaaccagagggagggggtcacatacttatataaatccctggaccagctgctccctgtcccactggaggaagatgaaaatccgaacagaagacgctttatcattaaagagacagtgtgcctcaaatccgagaatcctgatttatcgcagtgtgatttcaagcacgacggagatgtgaagatctgttctctggatctggttgaggaggatccagaggatataatgtgcaccagtctgaacaagaatgtccgtatcaaaaggaatgggaaaaagaaatgtaaggagcctgaaaaattgtgtctgaaaccaggaggacatagtgtcatctttgatgcatccgtcaatgagtgaaaccatctggcctgtttgtagcaaagtcagagacgtagcagagctagagatgt
agagcgacaacatcatgtaaattctgtttaaataatgattcggcctgatatccataaataaaatgctcagctcaaacggagctggccctgcgctgtataataaacagtagtcgtacataagaaaaaaaaaaaaaaaaaa。
[0008]其中，第322
–
448位核苷酸为免疫调节肽BugaCATH的编码基因。
[0009]本专利技术的的第二目的是这样实现的，所述的免疫调节肽BugaCATH在制备促进皮肤创伤修复治疗药物中的应用。
[0010]本专利技术的有益效果在于：提供一种新的免疫调节肽BugaCATH，该免疫调节肽具有显著的促进皮肤创伤修复的功能，能够在制备促皮肤创伤修复治疗药物中应用。
附图说明
[0011]图1为本专利技术免疫调节肽BugaCATH促进小鼠伤口愈合对比示意图；其中，A为免疫调节肽BugaCATH促进小鼠伤口愈合模型，每天局部给BugaCATH、EGF、无菌水（vehicle阴性对照组）治疗后的图片对比；B为用2mg/mLBugaCATH多肽（样品治疗组）、100mg/mL的Epidermal Growth Factor（EGF，阳性对照组）、无菌水（Vehicle，阴性对照组）各20
µ
L涂于小鼠创口对比图；与vehicle阴性对照组相比，BugaCATH和EGF治疗的小鼠皮肤伤口面积明显缩小，数值为平均值
±
标准差，ns，p>0.05，*p<0.05，**p<0.01。
具体实施方式
[0012]下面结合实施例和附图对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或替换，均属于本专利技术的保护范围。
[0013]本专利技术所述的免疫调节肽BugaCATH的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。
[0014]所述的免疫调节肽BugaCATH编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
[0015]本专利技术所述的免疫调节肽BugaCATH的的应用为所述的免疫调节肽BugaCATH在制备促皮肤创伤修复治疗药物中的应用。
[0016]下面以具体实施案例对本专利技术做进一步说明：实施例1免疫调节肽BugaCATH的化学合成方法（1）采用自动多肽合成仪（433A，Applied Biosystems，美国）合成BugaCATH的氨基酸全序列，通过高效液相色谱HPLC（Waters，美国）的C
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反相柱层析脱盐纯化合成的样品（2）采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI
‑
TOF）法测定该合成样品的分子量（3）采用高效液相色谱HPLC鉴定该合成样品的纯度。MALDI
‑
TOF测定化学合成的多肽分子量为3156.67Da，等电聚焦电泳测定该合成的多肽等电点为8.76，HPLC测定该合成的样品纯度>95%。用自动氨基酸测序仪确定该合成的BugaCATH氨基酸序列结构与天然BugaCATH一致。
[0017]实施例2免疫调节肽BugaCATH的基因克隆（1）中华蟾蜍皮肤总RNA提取：用去离子水冲洗蟾蜍背部皮肤，放入液氮中速冻10小时，取100mg皮肤组织，加入1ml Trizol溶液，于20ml玻璃匀浆器中匀浆30分钟。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫调节肽BugaCATH，其特征在于所述的免疫调节肽BugaCATH的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。2.根据权利要求1所述的免疫调节肽BugaCATH，其特征在于所述的免疫调节肽Bug...

【专利技术属性】
技术研发人员：武静，杨海龙，木丽仙，申欢，何艳梅，冯晓丽，沈艳，毛榕榕，米鍇，黄宁，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：