【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种牛隐性遗传疾病脊椎畸形综合征的鉴定方法，其步骤如下： （１）从被检牛样本中提取牛基因组ＤＮＡ； （２）根据牛ＳＬＣ３５Ａ３基因序列，设计引入酶切位点的ＰＣＲ扩增引物对，所述引物对的核苷酸序列如下： 正向：５’ＧＣＴＣＴ ＣＣＴＣＴＧＴＡＡＴＣＣＣＣＡ３’， 反向：５’ＣＣＡＣＴＧＧＡＡＡＡＡＣＡＴＧＣＴＧＴＧＡＧＴＡ３’； （３）ＰＣＲ反应扩增程序为：９４℃变性３ｍｉｎ，３５次循环（９４℃ １ｍｉｎ，６５℃ １ｍｉｎ，７２℃ １ｍｉｎ），７２ ℃延伸１０ｍｉｎ，得到ＰＣＲ扩增产物； （４）用２．５％琼脂糖凝胶电泳对步骤（３）的扩增产物进行检测，所述电泳条件为电压１００Ｖ，时间为２０ｍｉｎ，染色，在凝胶成像系统中观察条带； （５）取１６μＬ ＰＣＲ扩增产物，加入５ＵＲｓ ａＩ限制内切酶和２μＬ １０×酶切缓冲液，加水至２０μＬ，３７℃，反应５ｈ； （６）反应完成后，在１０％聚丙烯酰胺凝胶电泳，电泳条件为稳压１００Ｖ，时间为４ｈ，银染，根据扩增产物的大小判定结果。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：陈世林，胡修忠，李翔，刘文举，宋利军，童勤，杨利国，张淑君，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。