本发明专利技术属于保健药物技术领域，公开了一种辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中的应用，辣木叶提取物的最佳浓度为300mg/kg。本发明专利技术以自发型肥胖型糖尿病db/db小鼠为自发的NAFLD模型，分别给予辣木叶粉末水溶液和辣木浸提液进行干预，通过血脂、肝脏病理切片、肝脏氧化指标等，观察辣木叶对NAFLD的作用。与db/m对照组对比，本发明专利技术的db/db小鼠表现出显著的高血糖等2型糖尿病特征，肝脏出现明显的脂肪性肝炎症状，辣木叶可显著减缓db/db小鼠血糖增加趋势，通过降低肝脏脂质堆积和增强抗氧化能力改善糖尿病导致的肝细胞损伤，降低肝脏的炎症反应，为辣木在临床上治疗NAFLD疾病提供理论依据。疾病提供理论依据。疾病提供理论依据。
【技术实现步骤摘要】
辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中的应用
[0001]本专利技术属于保健药物
，尤其涉及一种辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中的应用。
技术介绍
[0002]目前，非酒精性脂肪性肝病(non
‑
alcoholicfattyliverdisease，NAFLD)是最常见的肝病，全球患病率约为25％。NAFLD是一种与胰岛素抵抗和遗传相关的代谢应激性肝损伤，高达70％的2型糖尿病患者可能同时患有NAFLD，而糖尿病合并肥胖的患者中，NAFLD的患病率可高达100％，合并糖尿病的NAFLD患者发展为NASH和晚期纤维化的风险更高。NAFLD与代谢综合征也关系密切，研究表明代谢综合征患者超声脂肪肝检出率为48％。此外，NAFLD增加心血管疾病的风险独立于传统的危险因素。目前西医没有针对这种疾病状态的特异性治疗药物，中医药在改善肝脏脂肪代谢方面有一定优势。
[0003]辣木叶因其具有降糖、降压、降脂、保肝、抗癌、抗炎等药用价值而被国内外研究学者重视。辣木(Moringa)为多年生的热带落叶乔木，原产于印度，现广泛分布于非洲、阿拉伯、东南亚等热带海洋气候区，因为其根具有辛辣味而得此名。辣木的根、茎、叶、花、种子都含有丰富的药用和营养成分，是优质的保健食品原料。辣木种子部分叫作辣木籽，研究表明，辣木具有降血糖、抗肿瘤、抗菌、清除自由基等功能，但是对于其在改善NAFLD方面的研究还未有报道。因此，亟需设计一种新的辣木在改善NAFLD方面的验证实验。
[0004]通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：
[0005](1)目前西医没有针对非酒精性脂肪性肝病状态的特异性治疗药物。
[0006](2)目前针对低温分离浓缩辣木叶活性成分在改善NAFLD方面的技术方案尚未见报道。
技术实现思路
[0007]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中的应用。
[0008]本专利技术是这样实现的，一种辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中的应用；其中，辣木叶提取物的最佳浓度为300mg/kg。
[0009]本专利技术的另一目的在于提供一种实施所述的辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中的应用的鉴定辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中应用的方法，鉴定辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中效果的应用的方法包括以下步骤：
[0010]步骤一，根据体重和血糖数据对实验动物进行分组；
[0011]步骤二，利用全自动血生化分析仪进行血清生化指标的检测；
[0012]步骤三，将肝脏组织破碎并匀浆后进行抗氧化指标的检测；
[0013]步骤四，计算脏器系数并在光镜下进行脏器组织病理学分析；
[0014]步骤五，采用Image
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Pro plus 6.0图像分析系统进行油红O染色；
[0015]步骤六，采用默克Milliplex多重检测技术检测多种细胞因子；
[0016]步骤七，利用spss22.0统计软件进行数据的统计学处理。
[0017]进一步，步骤一中的实验动物分组包括：将db/db和对照db/m小鼠适应性喂养1周后，根据体重和血糖随机分成空白对照组、辣木叶组，每组C57BKS db/db和db/m小鼠各10只；空白对照、辣木粉分别口饲去离子水，辣木叶粉末水溶液200mg/kg
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BW；每天口饲1次，连续给药8周；观察并记录各组小鼠状态，每2周检测1次动物体重，眼底静脉采血检测一次随机血糖、血脂。
[0018]进一步，小鼠状态包括饮食、饮水、排尿量、毛色变化、行为异常和其他特殊变化。
[0019]进一步，步骤二中的血清生化指标的检测包括：采用腹腔静脉采血的方法收集小鼠血液于2mL EDTA抗凝管，全自动血细胞计数仪计数血细胞后，3500rpm常温离心5min，收集血浆，用全自动血生化分析仪检测小鼠肝功能指标以及代谢指标，指标包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、肌酐、血清尿素氮和血清葡萄糖。
[0020]进一步，步骤三中的抗氧化指标的检测包括：利用电动组织研磨仪将肝脏组织破碎并匀浆，15000r/min离心15min后取上清，测定过氧化氢酶CAT、超氧化物歧化酶T
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SOD和谷胱甘肽过氧化物酶、总抗氧化能力和丙二醛。
[0021]进一步，步骤四中的脏器系数与组织病理学分析包括：分离小鼠心、肝、脾、肺、肾和脑，PBS清洗后，滤纸吸干、称重记录；脏器系数＝脏器重量/小鼠体重。将脏器置于4％的多聚甲醛溶液固定48h后，脱水，石蜡包埋切片，切片厚度为5μm；经二甲苯脱蜡，乙醇水化后，苏木素
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伊红染色15min，1％盐酸酒精分化1s，氨水返蓝2s，梯度乙醇脱水，二甲苯透明后中性树胶封片，光镜下观察各组织病理改变并拍照保存。
[0022]进一步，步骤五中的油红O染色包括：肝脏冰冻组织制作冰冻切片，蒸馏水充分洗涤，油红稀释液染10～15min，避光、密封；60％乙醇镜下分化至间质清晰，水洗，Marry氏苏木素复染核，水洗，甘油或甘油明胶封片，观察肝脏脂肪含量；采用Image
‑
Pro plus 6.0图像分析系统进行半定量分析，计算每个视野下红色脂滴光密度，每张切片5个视野下红色脂滴光密度相加后取平均值，用每组平均光密度表示红色脂滴的数量。
[0023]进一步，步骤六中的采用默克Milliplex多重检测技术检测多种细胞因子包括：选择肝素作为抗凝剂全血，收集抗凝全血后30min内，在4℃下10000g离心10min，分离收集血浆；检测因子包括白介素
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2、白介素
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4、白介素
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6、白介素
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10和白介素
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17，采用MAGPIX Multiplexing仪器和MILLIPLEX Analyst.V5.1软件分析数据，所有样本重复3次，结果使用GraphPad Prism9进行方差分析和相关分析。
[0024]进一步，步骤七中的统计学处理包括：所有数据以表示，用spss22.0统计软件分析，组间显著性差异用方差分析，P<0.05说明差异有显著性意义；如果方差分析结果显示组间有差异，则用LSD法做两两比较，P<0.05说明两组差异有显著性意义。
[0025]结合上述的技术方案和解决的技术问题，本专利技术所要保护的技术方案所具备的优点及积极效果为：
[0026]第一，针对上述现有技术存在的技术问题以及解决该问题的难度，紧密结合本专利技术的所要保护的技术方案以及研发过程中结果和数据等，详细、深刻地分析本专利技术技术方
案如何解决的技术问题，解决问题之后带来的一些具备创造性的技术效果。具体描述如下：
[0027]本专利技术主要观察辣木叶降低db/db小鼠血糖和改善非酒精性脂肪本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中的应用，其特征在于，辣木叶提取物的最佳浓度为300mg/kg。2.一种实施如权利要求1所述辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中的应用的鉴定辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中应用的方法，其特征在于，鉴定辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中应用的方法包括以下步骤：步骤一，根据体重和血糖数据对实验动物进行分组；步骤二，利用全自动血生化分析仪进行血清生化指标的检测；步骤三，将肝脏组织破碎并匀浆后进行抗氧化指标的检测；步骤四，计算脏器系数并在光镜下进行脏器组织病理学分析；步骤五，采用Image
‑
Pro plus 6.0图像分析系统进行油红O染色；步骤六，采用默克Milliplex多重检测技术检测多种细胞因子；步骤七，利用spss22.0统计软件进行数据的统计学处理。3.如权利要求2所述鉴定辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中应用的方法，其特征在于，步骤一中的实验动物分组包括：将db/db和对照db/m小鼠适应性喂养1周后，根据体重和血糖随机分成空白对照组、辣木叶组，每组C57BKS db/db和db/m小鼠各10只；空白对照、辣木粉分别口饲去离子水，辣木叶粉末水溶液200mg/kg
·
BW；每天口饲1次，连续给药8周；观察并记录各组小鼠状态，每2周检测1次动物体重，眼底静脉采血检测一次随机血糖、血脂。4.如权利要求3所述鉴定辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中应用的方法，其特征在于，小鼠状态包括饮食、饮水、排尿量、毛色变化、行为异常和其他特殊变化。5.如权利要求2所述鉴定辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中应用的方法，其特征在于，步骤二中的血清生化指标的检测包括：采用腹腔静脉采血的方法收集小鼠血液于2mL EDTA抗凝管，全自动血细胞计数仪计数血细胞后，3500rpm常温离心5min，收集血浆，用全自动血生化分析仪检测小鼠肝功能指标以及代谢指标，指标包括谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、肌酐、血清尿素氮和血清葡萄糖。6.如权利要求2所述鉴定辣木在制备改善血糖和非酒精性脂肪肝病保健品中应用的方法，其特征在于，步骤三中的抗氧化指标的检测包括：利用电动组织研磨仪将肝脏组织破碎并匀浆，15000r/min离心15min后取上清，测定过氧化氢酶CAT、超氧化物歧化酶T
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SOD和谷胱甘肽过氧化物酶、总抗氧化能...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱伟，李文学，齐从政，杨光宇，张岩，李军涛，黄冰，
申请(专利权)人：广州市疾病预防控制中心广州市卫生检验中心，广州市食品安全风险监测与评估中心，广州医科大学公共卫生研究院，
类型：发明
国别省市：
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