木犀草苷在制备延缓和/或治疗肝脏纤维化的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了木犀草苷在制备延缓和/或治疗肝脏纤维化的药物中的应用。本发明专利技术通过实验发现，FGFR2的表达量与肝纤维化进程正相关，即FGFR2对肝纤维化的病程具有促进作用，且FGFR2的失活可以扭转这种促进作用，而木犀草苷可以逆转FGFR2的过度激活，延缓肝纤维化的发展进程。因此，木犀草苷可作为一种FGFR2抑制剂，抑制FGFR2的过度激活；还可以降低肝细胞对TGF

【技术实现步骤摘要】
木犀草苷在制备延缓和/或治疗肝脏纤维化的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及治疗人类肝脏纤维化的药物开发领域，特别涉及木犀草苷在制备延缓和/或治疗肝脏纤维化的药物中的应用。

技术介绍

[0002]肝脏纤维化是一种肝脏疾病，病因有很多，在临床上主要有病毒性肝炎、酒精肝、脂肪肝、自身免疫性疾病等。临床表现主要为疲乏无力，食欲减退，有时伴恶心，呕吐，慢性消化不良，慢性胃炎，出血等。目前主要治疗方法包括：针对原发病去除致病因素，如抗乙型肝炎、丙型肝炎病毒治疗、抗血吸虫治疗、戒酒等；针对肝纤维化本身的治疗，如通过抑制炎症或脂质过氧化，或者抑制肝星状细胞的增生活化，以及促进胶原降解等。
[0003]肝纤维化是与肝修复相关的正常生理机制，但过度持久时，会导致肝硬化和肝衰竭。研究表明，肝星状细胞(HSC)激活及其后续胶原蛋白分泌导致肝内细胞外基质过度积累，从而导致肝纤维化。在HSC激活后，其他肝细胞，如肝窦内皮细胞和肝脏成纤维细胞，参与了胶原蛋白的积累。胶原蛋白分泌是成纤维过程中决定性的过程，并受多种信号调节。
[0004]FGFR2是一种酪氨酸激酶受体，可以激活MAPK和Wnt信号通路，在肝纤维化的发展中发挥关键作用。有报道称，FGFR2的过表达是触发HSC的激活主要因素之一；同时，通过基因敲除FGFR2已被证实可以在各种动物模型中减少肝纤维化。这表明FGFR2在肝纤维化的发展中发挥着关键作用，并且使用特定的抑制剂来针对FGFR2可能是治疗肝纤维化的潜在治疗策略。
[0005]木犀草苷(cynaroside，简称CYN)，又称木犀草素
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O
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葡萄糖苷、青兰苷，结构式如式I所示，是一种天然黄酮类化合物，存在于多种植物中，具有消炎、止咳、抗过敏、抗肿瘤等的功效。但到目前为止，尚未有公开木犀草苷可以用于抑制肝脏纤维化进程。
[0006]
技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供木犀草苷在制备延缓和/或治疗肝脏纤维化的药物中的应用。
[0008]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0009]木犀草苷(Cynaroside)在制备延缓和/或治疗肝脏纤维化的药物中的应用。
[0010]所述的肝脏纤维化包括FGFR2过度活化(激活)导致的肝脏纤维化、TGF
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β诱导的肝脏纤维化、四氯化碳诱导的肝脏纤维化、以及高脂饮食诱导的肝脏纤维化中的至少一种；该
木犀草苷作为活性成分，能够降低肝细胞对TGF
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β的敏感性，减弱细胞被激活的程度，能够抑制FGFR2过度激活阻碍肝脏纤维化发展。
[0011]所述的FGFR2过度活化包括FGFR2过表达和/或bFGF诱导的FGFR2过度活化。
[0012]所述的木犀草苷的使用剂量(动物)优选为10～20mg/Kg。
[0013]所述药物可以含有一种或多种药学上可接受的载体或辅料。
[0014]所述的辅料包括缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂和润滑剂中的至少一种。
[0015]所述的药物还进一步制成针剂、胶囊、丸剂、片剂、口服液或颗粒剂等。
[0016]木犀草苷(Cynaroside)在体外抑制肝细胞纤维化中的应用。
[0017]所述的肝细胞包括肝星状细胞和人肝癌细胞；优选为肝星状细胞LX
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2和人肝癌细胞HUH
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7中的至少一种。
[0018]所述的木犀草苷的使用浓度优选为5～20μmol/L；进一步优选为10μmol/L。
[0019]木犀草苷(Cynaroside)在制备FGFR2抑制剂中的应用。
[0020]所述的木犀草苷可以作为活性成分，抑制FGFR2的激活，进而延缓肝脏纤维化的发展进程。
[0021]本专利技术相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0022]1、本专利技术通过实验发现，成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)的表达量与肝纤维化进程正相关，即FGFR2对肝纤维化的病程具有促进作用，且FGFR2的失活可以扭转这种促进作用，而CYN可以逆转FGFR2的过度激活，延缓肝纤维化的发展进程，即本专利技术筛选得到了一种可以作为治疗肝纤维化药物的成分的小分子化合物CYN，其能够减缓肝纤维化的发生和发展，可用于开发延缓肝脏纤维化或抗肝脏纤维化的药物。
[0023]2、本专利技术通过验证FGFR2促进肝星状细胞激活和肝细胞胶原分泌的结果，筛选了一种特定的FGFR2抑制剂：细胞实验结果显示，CYN可抑制FGFR2过表达和过度bFGF导致的FGFR2高度激活，减少HSC细胞激活和肝细胞胶原分泌；使用四氯化碳小鼠模型和非酒精性脂肪性肝病小鼠模型进行的动物实验表明，CYN治疗可在纤维化形成期间减少肝纤维化。这些结果表明，CYN可在细胞水平和小鼠模型中预防肝纤维化形成。
附图说明
[0024]图1是FGFR2的高表达与肝脏纤维化的吻合情况图；其中，A为FGFR2在肝纤维组织(人类HBV感染性维化(GSE38941)、人类酒精性维化(GSE28619)和人类非酒精性维化(GSE48452)引起的人类肝纤维化样本以及和四氯化碳(CCl4)小鼠肝纤维化样本(GSE152329，GSE98577))和正常肝组织中的表达差异倍数；B为FGFR2在不同病程的肝纤维化中的表达变化(通过挖掘对比肝纤维转优劣两种归后FGFR2表达量的变化(GSE175448))；C为FGFR2的表达量与肝纤维化评分(Ishak score)的相关性(通过对肝纤维化组织及正常肝组织进行免疫组化)；D为通过western blot检测FGFR2在肝纤维化组织和正常肝组织中的表达水平；E为通过q
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PCR检测FGFR2在肝纤维化组织和正常肝组织中的表达水平；F为通过q
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PCR测定不同诱导天数(4、8、12、16、20天)的四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化样品的ACTA2的表达情况；G为通过q
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PCR不同诱导天数(4、8、12、16、20天)的四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化样品的FGFR2的表达情况。
[0025]图2是FGFR2驱动肝脏纤维化的过程图；其中，A为通过qPCR对敲高FGFR2(FGFR2
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OE)的LX
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2细胞系和Huh
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7细胞系进行检测，对比肝纤维化marker的表达量；B为通过western blot分析在TGF
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β诱导下的野生型和FGFR2
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OE细胞系们的marker表达量；C为通过ELISA测定两种细胞内的α
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SMA表达量；D为通过ELISA测定两种细胞的培养上清中的I型胶原蛋白含量；E为建立共培养模型的示意图(过表达的细胞被培养在上层小室里，野生型细胞培养在下层，滤网直径为0.8μm以阻碍细胞透过；收集经过48h培养的细胞，通过ELISA测定下本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.木犀草苷在制备延缓和/或治疗肝脏纤维化的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述的肝脏纤维化包括FGFR2过度活化导致的肝脏纤维化、TGF
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β诱导的肝脏纤维化、四氯化碳诱导的肝脏纤维化、以及高脂饮食诱导的肝脏纤维化中的至少一种。3.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：洪岸，陈小佳，孟其麟，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：