一种生物制品及其制备方法和其在制备抗衰延寿产品中的应用技术

本发明专利技术提供了一种生物制品，所述生物制品的有效成分中，包含有提取自哺乳动物血液的外泌体，并提供了其制备方法和应用。本发明专利技术的的特点及优点是：本发明专利技术提供的生物制品及其制备方法和其在制备抗衰延寿产品中的应用，生物制品中包含有从血液中提取的外泌体以及miRNA，保证了外泌体内容物含量和外泌体本身的数量，同时，由于血液中的外泌体本身就是组合体，其能够更有效的实现多种功效，且来源简单、广泛，有利于长期、重复、大量的使用。大量的使用。大量的使用。

【技术实现步骤摘要】
一种生物制品及其制备方法和其在制备抗衰延寿产品中的应用


[0001]本专利技术涉及分子生物学
，具体涉及一种生物制品及其制备方法和其在制备抗衰延寿产品中的应用。

技术介绍

[0002]衰老，是指机体对环境的生理和心理适应能力进行性降低、逐渐趋向死亡的现象。衰老可分为两类：生理性衰老和病理性衰老。前者指成熟期后出现的生理性退化过程，后者是由于各种外来因素(包括各种疾病)所导致的老年性变化。人体衰老过程中的生理变化主要体现在机体组织细胞和构成物质的丧失，机体代谢率的减缓，机体和器官功能减退。衰老是不可避免的，但延缓衰老却是可能的。
[0003]机体的衰老主要受到遗传、环境、细胞基因等因素影响。遗传因素决定了各种动物的寿命都存在最高寿限。同时，外部环境(如空气质量、水质量等)和机体内部环境对衰老也会产生重大影响。此外，若机体大部分重要细胞都健康，那么机体的寿命也会相应加长。
[0004]现有医学和生物学研究发现，机体的衰老，是机体在退化时期生理功能下降和紊乱的综合表现，是不可逆的生命过程，受各种内外因素影响。线粒体病的迟发和渐进过程提示线粒体功能随着年龄的增加而退化。在正常生理状态下，机体自身的防御系统可及时清除能量代谢过程中产生的氧自由基。而在机体衰老的进程中，抗氧化防御系统作用减弱，线粒体内自由基不能有效地清除而积累，从而导致线粒体的氧化性损伤，包括生物膜损伤、mtDNA损伤等。大量的研究证实，衰老与线粒体氧化磷酸化酶活性降低以及分裂终末的组织中突变mtDNA积累密切相关。与增龄有关的突变类型主要是缺失，并且与氧化损伤有关。体细胞中mtDNA突变随年龄而增加，与衰老的程度呈正相关性。mtDNA突变的累积可诱发多种老年性疾病。
[0005]外泌体(Exosome)是由活细胞分泌的直径约为30
‑
150nm的小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中；外泌体携带有多种蛋白质、脂类、RNA等重要信息，不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用，更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
[0006]细胞分泌的外泌体通过携带生物分子(蛋白质、miRNAs、DNA和其他非编码RNAs)在细胞囊泡运输中发挥了不可或缺的作用。外泌体的功能取决于所来源的细胞类型，其可参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等多个进程中。
[0007]现有的针对抗衰老的技术研究中，存在有一些使用外泌体的相关技术文献，其主要聚焦在三个方面：
[0008]1、将某种类型的细胞进行体外培养后，分离其中的外泌体，产生抗衰老作用，其细胞来源主要为胚胎干细胞、脐带/胎盘间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、牛胎盘细胞、神经干细胞、牙髓干细胞、脂肪来源干细胞等，如公开号CN113041208A的专利技术专利《胚胎干细胞外泌体在制备美白及抗衰老药物或者化妆品中的用途》；
[0009]2、将外泌体做为传递载体，负载某些抗衰物质或修饰某些小分子物质，包括活性肽、透皮肽、小分子肽、NAMPT基因等，如公开号CN112980801A的专利技术专利《一种NAMPT基因修饰的间充质干细胞外泌体的制备方法》；
[0010]3、将外泌体与某种物质组合成组合物，共同用于抗衰老，如公开号CN111225659A的专利技术专利《包含乳酸菌来源的胞外囊泡的抗衰老组合物》。
[0011]但上述技术，均存在操作复杂、应用范围单一以及抗衰作用持续效果差等缺陷。

技术实现思路

[0012]本专利技术的目的是提供了一种生物制品及其制备方法和其在制备抗衰延寿产品中的应用。
[0013]本专利技术的上述目的可采用下列技术方案来实现：
[0014]一种生物制品，所述生物制品的有效成分中，包含有提取自哺乳动物血液的外泌体。
[0015]血液是唯一与所有器官都有接触的组织，携带着大量与机体相关的各种类型细胞，其所能产生的外泌体也是一个复杂的组合体，提取自血液的外泌体，其也具有最广泛的用途；同时，血液做为包含有外泌体的液态物质，其提取方法相对比较简单，而且血液做为机体内最大规模的液态物质，其所能够提取到的外泌体总量也明显要远高于其它器官/组织，更适于大规模、长期、重复性的施展用途。
[0016]进一步的，上述的生物制品，所述外泌体为提取自年轻哺乳动物动物体血液或血浆的外泌体。
[0017]直接提取自年轻动物体血液的外泌体，实际上是一组外泌体的集合，包含有各种类型细胞所分泌的外泌体，相互之间联系紧密，共同发挥作用。由于年轻动物体处于高速生长发育阶段，其血液中的外泌体数量和活性要远远高于年老动物体，且外泌体所包含的内容物(如miRNA等)也要明显高于年老动物体。年老动物体血液内的外泌体，随着年龄增长，其中许多与抗衰老、抗氧化、激发活力相关的因子逐渐失活或减量，从而引发了衰老以及与衰老相关疾病的发生。而年轻动物体血液中所包含的外泌体，能够通过其中所包含的内容物，综合发挥出针对衰老及与衰老相关疾病发生的拮抗性，实现抗衰延寿的相应效果。
[0018]进一步的，上述的生物制品，所述年轻哺乳动物动物体是指生长年龄小于等于该物种平均寿命的17％的动物体；优选为生长年龄等于该物种平均寿命12％
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16.5％的动物体。
[0019]由于动物体年龄总周期不同，而在针对动物体衰老机制的研究中，年龄是最直观的标准之一，故此，本专利技术也是采用年龄比例对“年轻”、“年老”的概念进行了定义。由于本专利技术的最终目的是以生物制品抑制人体的衰老，产生延寿效果的同时，拮抗由于衰老所产生的相关疾病，因而本专利技术在实验之初，即确定了以动物实验确定人体的外泌体使用效果，这也就确定了需要多种实验动物与人体的年龄之间具有相关性。
[0020]经过前期查询，为了更准确表达本专利技术所记载的“年轻动物体”、“年老动物体”的概念，申请人查询到了以下2篇相关文献，并以文献记载确定了实验小鼠的年龄定义：即“年轻”是指月龄4个月之内的小鼠，“年老”是指月龄在18个月以上的小鼠。
[0021]1、相关文献1：
[0022]《实验动物与人类年龄相关性研究进展》——中国比较医学杂志，2019，29(11)：116
‑
122，陈玥，苏丹，贵文娟，孙效容。
[0023]其中，记载了小鼠等实验动物和人年龄对应的相关性，以人类年龄计算实验动物年龄如图1中的表1所示。
[0024]2、相关文献2：
[0025]《THE MOUSE IN BIOMEDICAL RESEARCH,2ND EDITION》。
[0026]其中，记载了小鼠不同生长阶段与人类对应关系，并以C57BL/6J为例进行了统计，如图2所示。
[0027]结合上述文献记载，同时申请人也在进行了大量实验后，最终优化和确认了本专利技术中所描述的“年轻动物体”是指生长年龄小于等于该物种平均寿命17％的动物体，优选为生长年龄等于该物种平均寿命12％
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种生物制品，其特征在于，所述生物制品的有效成分中，包含有提取自哺乳动物血液的外泌体。2.根据权利要求1所述的生物制品，其特征在于，所述外泌体为提取自年轻哺乳动物动物体血液或血浆的外泌体。3.根据权利要求1
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2任一所述的生物制品，其特征在于，所述外泌体的提取来源与所述生物制品的施用对象为相同的哺乳动物。4.根据权利要求1
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3任一所述的生物制品，其特征在于，所述外泌体的提取方法为：通过超速离心与外泌体试剂盒相结合的方式提取。5.根据权利要求4所述的生物制品，其特征在于，所述外泌体的提取方法具体为：S1.获得动物体血液，并分离得到血浆；S2.若S1中获得的血浆不立即使用，则置于
‑
80℃保存；S3.采用超速差异化离心方法对步骤S1中或S2中的血浆进行分离纯化，离心后得到上清液和含有粗提外泌体的沉淀；S4.采用外泌体分离试剂盒进行外泌体提取，得到外泌体终产物；S5.若步骤S4中获得的外泌体终产物不立即使用，则置于4℃保存并于14天内使用，或置于
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80℃保存。6.根据权利要求1
‑
3所述的生物制品，其特征在于，所述生物制品中的外泌体粒径范围为20
‑
150纳米，优选的外泌体粒径范围为50
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100纳米。7.一种生物制品的制备方法，其特征在于，所述生物制品为权利要求1
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6任一所述的生物制品，其制备方法包括以下步骤：1)获得动物体血液，并分离得到血浆；2)若1)中获得的血浆不立即使用，则置于
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80℃保存；3)采用超速差异化离心方法对步骤1)中或2)中的血浆进行分离纯化，离心后得到上清液和含有粗提外泌体的沉淀；4)采用外泌体分离试剂盒进行外泌体提取，得到外泌体终产物；5)若步骤4)中获得的外泌体终产物不...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈熹，骆阳，吴舟怡，朱卿，潘金梦，陈骁锐，张辰宇，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：