一种抗新城疫病毒蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术涉及鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抗新城疫病毒的生物制品或药物中的应用，属于抗病毒生物制品技术领域。本发明专利技术提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抗新城疫病毒生物制品或药物中的应用。本发明专利技术所述应用能够制备得到一种抗新城疫病毒的新的生物制品(免疫激动剂)，所述免疫激动剂能够抑制新城疫病毒复制、提升IFN

【技术实现步骤摘要】
一种抗新城疫病毒蛋白及其应用


[0001]本专利技术涉及抗病毒药物
，具体涉及鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抗新城疫病毒的药物中的应用。

技术介绍

[0002]新城疫主要感染鸡、野鸡、火鸡、鹌鹑等。其中以鸡最易感，野鸡次之，其对家禽具有高度的传染性。世界动物卫生组织(OIE)规定的必报传染病之一，该病常对养禽业造成巨大的损失。其病原为新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)，NDV为副黏病毒科，正腮腺炎毒属，禽正腮腺炎病毒1型成员，编码基因组为单股负链不分节段有囊膜RNA病毒。
[0003]目前，新城疫的防控主要是通过疫苗免疫，主是包括灭活疫苗和活疫苗，灭活疫苗主要的缺点是不能激活细胞免疫应答反应，对于不同基因型的病毒无法产生足够的交叉免疫保护效力，存在一定的免疫失败可能。此外，活疫苗也存在一些缺点，如在机体条件弱、饲养环境差等条件下，活苗毒株可引起鸡群发病，因此，针对提高机体先天性免疫能力起到促进作用的生物制品仍较缺乏。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抗新城疫病毒的生物制品或药物中的应用。本专利技术所述应用能够制备得到一种抗新城疫病毒的新生物制品，所述生物制品能够抑制新城疫病毒复制、提升IFN
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α转录水平、促进STAT1上调表达、调节ISGs的转录表达水平。
[0005]本专利技术提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抗新城疫病毒的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0006]本专利技术还提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抑制新城疫病毒复制的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]本专利技术还提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备提升IFN
‑
α转录水平的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0008]本专利技术还提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备促进STAT1上调表达的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0009]本专利技术还提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备调节ISGs的转录表达水平的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0010]优选的是，所述ISGs包括IFITM3、ZAP和Viperin中的一种或两种以上。
[0011]优选的是，所述应用包括：
[0012]过表达鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白用于制备促进ISGs的转录表达水平的生物制品或药物；抑制鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的表达用于制备降低ISGs的转录表达水平的生物制品或药物。
[0013]本专利技术还提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备促进抗新城疫病毒的先天性免疫反应的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0014]本专利技术还提供了一种过表达鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的重组载体，所述重组载体以pCMV
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HA作为骨架载体，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0015]本专利技术还提供了一种过表达鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的宿主细胞，所述宿主细胞的类型包括大肠杆菌，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0016]本专利技术提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抗新城疫病毒的生物制品或药物中的应用。本专利技术所述应用能够制备得到一种抗新城疫病毒的新生物制品或药物，所述生物制品或药物能够抑制新城疫病毒复制、提升IFN
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α转录水平、促进STAT1上调表达、调节ISGs的转录表达水平，其中ISGs包括IFITM3、ZAP和Viperin中的一种或两种以上；外源过表达的Mertk蛋白可发挥抗新城疫病毒效应，在抗NDV先天性免疫中具有一定作用。
附图说明
[0017]图1为本专利技术提供的荧光定量PCR检测Mertk(Mer)基因的表达变化结果图；
[0018]图2为本专利技术提供的荧光定量PCR检测IFN
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α基因的表达变化结果图；
[0019]图3为本专利技术提供的荧光定量PCR检测STAT1基因的表达变化结果图；
[0020]图4为本专利技术提供的荧光定量PCR检测IFITM3基因的表达变化结果图；
[0021]图5为本专利技术提供的荧光定量PCR检测ZAP基因的表达变化结果图；
[0022]图6为本专利技术提供的荧光定量PCR检测Veripin基因的表达变化结果图；
[0023]图7为本专利技术提供的Western Blot检测过表达Mertk与否对于新城疫病毒NP蛋白以及宿主细胞STAT1的表达比较结果图；
[0024]图8为本专利技术提供的半数组织培养感染剂量(TCID
50
)测定DF1细胞上清中新城疫病毒滴度，分别于12h和24h收取正常DF1细胞上清以及过表达Mertk DF1细胞上清用于TCID
50
检测并比较新城疫病毒滴度变化结果图。
具体实施方式
[0025]本专利技术提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抗新城疫病毒的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。在本专利技术中，编码所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。在本专利技术具体实施例中，本专利技术将过表达鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的重组载体转染鸡成纤维细胞系DF1细胞，检测Mertk基因mRNA转录水平以及Mertk蛋白表达变化，发现Mertk mRNA和蛋白表达水平均出现了上调，进一步检测新城疫病毒感染细胞上清中的病毒半数组织培养感染剂量(TCID
50
)，显示新城疫病毒滴度显著下降(p<0.05)，证实外源过表达的Mertk蛋白可发挥抗新城疫病毒效应。
[0026]本专利技术还提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抑制新城疫病毒复制的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
具体实施例证明，过表达鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白能够抑制新城疫病毒的复制。
[0027]本专利技术还提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备提升IFN
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α转录水平的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。具体实施例证明，过表达鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白能够提升IFN
‑
α转录水平。
[0028]本专利技术还提供了鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备促进STAT1上调表达的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抗新城疫病毒的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备抑制新城疫病毒复制的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备提升IFN
‑
α转录水平的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。4.鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备促进STAT1上调表达的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。5.鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白在制备调节ISGs的转录表达水平的生物制品或药物中的应用，所述鸡源受体酪氨基酸激酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述ISG...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭磊，丁铲，仇旭升，廖瑛，孙英杰，宋翠萍，
申请(专利权)人：中国农业科学院上海兽医研究所，
类型：发明
国别省市：