本发明专利技术涉及生物制品的制备方法,更具体地说涉及从人胆汁中提取胆红素的方法。本发明专利技术主要包括胆汁过滤,酸洗分液,蒸馏过滤以及干燥等步骤。本方法能快速直接地从人胆汁中提取胆红素,工艺简单,容易掌握,特别适用于分散零星的小批量提取。采用本发明专利技术提取胆红素只需50分钟左右,提取所得胆红素含量在85%以上,其收率可达万分之5.5左右,而且辅料用量少又是一些常用试剂。(*该技术在2008年保护过期,可自由使用*)
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物制品的制备方法,更具体地说,涉及从人的胆汁中提取胆红素的方法。胆红素是一种贵重的生化制品,通常由动物的胆汁,特别是由较大的动物,诸如猪、牛、羊的胆汁中提取制备。最近,有人开辟了一条从人的胆汁中提取胆红素的新途径。从人胆中提取胆红素,一般采用两种方法(1)钙盐法主要工艺流程如下(鲜胆汁+石灰水)/(加热) 过滤 (加水稀释+抗氧剂+盐酸)/(静置) 过滤 (加酒精稀释+抗氧剂+盐酸)/(静置) 抽出酒精 (加入酒精)/(静置) (抽出酒精)/(温水冲洗) 过滤 (加氯仿)/(静置+抗氧剂) (分液)/(抽滤) 蒸馏→抽滤→出精品→干燥(2)离子交换法主要工艺流程如下(胆汁+碱水)/(加热) (处理树脂)/(上柱) 吸附 (加盐酸+抗氧剂)/(清洗) 酒精去杂→氯仿洗脱→蒸馏→干燥若由等同数量的人胆汁来提取胆红素,采用钙盐法需要36小时才能完成提取的全过程,需要很长的时间,而且乙醇、氯仿、抗氧剂、盐酸等试剂用量多,提取所得的胆红素含量一般仅为75%左右;而采用离子交换法也需4小时才能完成,而且所用的树脂为一种专用型树脂,价格昂贵且难以购得,过程中乙醇用量大。另外,虽然所得的胆红素含量较高,可达90%以上,但是其收率低,仅为万分之二左右。再有,1988年10月22日“技术市场报”第三版上,一条启事中提及利用人废胆汁提取胆红素,专利申请号为88100468和88100485,但启事中没有揭示其具体的方法,专利申请也尚未公开。本专利技术的目的在于提供一种从人的胆汁中提取胆红素的“直快”方法。本专利技术的方法主要包括以下步骤(1)胆汁过程,(2)酸洗、分液,(3)蒸馏过滤,(4)干燥上述酸洗过程的pH值控制在4.5-5。上述的蒸馏温度用水浴法控制在35-90℃。本专利技术的方法能快速直接从人胆汁中提取胆红素,工艺简单,容易掌握,特别适合于分散零星的小批量提取。采用本专利技术的方法提取胆红素只需50分钟左右,提取所得的胆红素含量在85%以上,其收率可达万分之5.5左右,而且辅料用量少又是一些常用试剂。以下,将结合实施例对本专利技术作更详细地说明。实施例一.胆汁过滤取新鲜的人的胆汁100毫升,用的确良或细绸布过滤,弃掉布上的油脂或杂质,留用经过滤下来的胆汁。二.酸洗、分液取0.5毫升氯仿加入到由上所得的胆汁中,充分搅拌均匀,置于热源上加温到70℃左右,然后加入1N氢氧化钠6-8毫升,调pH值为11-12为佳,继续加温到沸腾,测pH值8-9,放入低温水中冷却到20℃以下。再加入0.3%(重量)的亚硫酸氢钠(抗氧剂),它先须用少许水溶解后再加入。接着加入50毫升氯仿,充分搅拌均匀。用移液管慢慢地滴入1∶5稀盐酸,边加边搅拌,用广泛试纸调pH值到4.5-5,然后静置观察1.如果下部氯仿液变红,上部水溶液颜色呈浅黄色,层次分明,说明效果理想。2.如果下部颜色较淡,上部颜色较红,且混浊不清,层次不清说明酸加得较少,可适当再加一点酸,直到出现第一种情况。3.如果因酸加得过快,过多,或搅拌不匀而出现中间层,可照前方法重做一遍。即再加入适量氢氧化钠溶液,调整到pH值7-8,再用稀盐酸调pH值为5,反复多次,直至氯仿胆红素混合液提净为止。将氯仿胆红素混合液加入到分液漏斗中,稍许静置后,分液漏斗中将出现上部为杂质溶液,下部为胆红素氯仿混合液,此时即可将下部放置,上部杂质弃掉,然后,用细绸布将胆红素氯仿混合液过滤1-2遍,即可进行蒸馏。三.蒸馏过滤在分液后所得胆红素氯仿混合液中加入0.3%亚硫酸氢钠,用水浴法控制温度在35-90℃之间,冷凝管回收氯仿待冷凝管不滴氯仿,烧瓶内剩下的是糊状物时,加入2-3倍95%酒精,0.5毫升丙酮,此时可敞口蒸发到无氯仿味为止,即可进行过滤。将定性快速滤纸放于布氏漏斗或三角漏斗中,将漏斗插入抽滤瓶中,减压下抽滤至干,用无水酒精冲洗1-2遍,再用乙醚清洗1-2遍,滤干后,滤纸上的桔红色物体即为精制胆红素,重量为0.05克,收率为万分之五。四.干燥、保存过滤后的胆红素经烘干温度控制在50℃以下,干精品置于避光瓶管中且放入干燥剂低温保存。权利要求1.一种从人的胆汁中提取胆红素的方法,其特征在于所说的方法主要包括胆汁过滤、酸洗分液、蒸馏过滤以及干燥等步骤。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所说的酸洗步骤的pH值控制在4.5-5。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所说的蒸馏温度控制在35-90℃。4.根据权利要求1或3所述的方法,其特征在于所说的蒸馏用水浴法控温。全文摘要本专利技术涉及生物制品的制备方法,更具体地说涉及从人胆汁中提取胆红素的方法。本专利技术主要包括胆汁过滤,酸洗分液,蒸馏过滤以及干燥等步骤。本方法能快速直接地从人胆汁中提取胆红素,工艺简单,容易掌握,特别适用于分散零星的小批量提取。采用本专利技术提取胆红素只需50分钟左右,提取所得胆红素含量在85%以上,其收率可达万分之5.5左右,而且辅料用量少又是一些常用试剂。文档编号C07D277/44GK1042708SQ8810791公开日1990年6月6日 申请日期1988年11月14日 优先权日1988年11月14日专利技术者陈田中, 刘昌芳 申请人:陈田中, 刘昌芳本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从人的胆汁中提取胆红素的方法,其特征在于所说的方法主要包括胆汁过滤、酸洗分液、蒸馏过滤以及干燥等步骤。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:陈田中,刘昌芳,
申请(专利权)人:陈田中,刘昌芳,
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]
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