区分2,5二甲基吡嗪和2,6-二甲基吡嗪的液相分析方法技术

本发明专利技术公开了一种区分2,5二甲基吡嗪和2,6

【技术实现步骤摘要】
区分2,5二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的液相分析方法


[0001]本专利技术属于吸附分离
，具体涉及一种区分2,5二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的液相分析方法。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]烷基吡嗪属含氮的杂环化合物，作为重要的风味物质，主要贡献食品中的坚果味、烤肉味和烤面包味。烷基吡嗪具有极低的阈值，其中，2,5
‑
二甲基吡嗪(2,5
‑
Dimethylpyrazine,2,5
‑
DMP)在食品中只添加1
‑
2ppm就可以起到明显的增香作用。由于阈值低，烷基吡嗪可以显示出强烈的气味特性，是我国GB2760
‑
86规定允许使用的香精物质，在食品工业中主要用作调味的食品添加剂和一些香料中间体。
[0004]烷基吡嗪除了具有独特的风味价值之外，在医药方面也具有重要价值，可用作药物或医药中间体。例如，2,5
‑
DMP可以作为抗菌类药物5
‑
甲基吡嗪
‑2‑
羧酸的重要合成原料。
[0005]目前，实验室以异丙醇胺为原料合成2,5
‑
二甲基吡嗪，此反应工艺中，主要有2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪这两个产物。由于这两个产物是同分异构体，沸点相近，很难用气相检测区分，使得其分离提纯相对困难。
[0006]目前烷基吡嗪的检测方法一般为GC
‑
MS，此方法一般用于样品中烷基吡嗪的微量检测以及定性分析，并且检测时间长，样品处理步骤繁琐复杂，造价更高，一般只能检测mM级别的吡嗪化合物，且检测幅度窄，不能区分2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪同分异构体，对于大量检测浓度较高的样品，并不是一个很好的选择。

技术实现思路

[0007]为了解决现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一种区分2,5二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的液相分析方法，本专利技术提供的分析方法简单有效，能够在10min以内分开2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪，且分离度为2.61，符合分离要求。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术的技术方案为：
[0009]本专利技术的第一个方面，提供一种区分2,5二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的液相分析方法，所述方法利用高效液相色谱法进行，其中，
[0010]色谱柱采用C18色谱柱；
[0011]流动相为:0.25％三氟乙酸水溶液:乙腈＝95:5，体积比；
[0012]洗脱方式为等度洗脱。
[0013]优选的，所述高效液相色谱法为结合二极管阵列检测器的高效液相色谱法。进一步优选的，二极管阵列检测器检测波长:280
±
2nm。
[0014]优选的，所述高效液相色谱法的柱温为25～35℃。进一步优选的，所述高效液相色
谱法的柱温为30℃。
[0015]优选的，所述高效液相色谱法的进样量为4～6μL。进一步优选的，所述高效液相色谱法的进样量为5μL。进样流速为1.0ml/min，若流速大于1.0ml/min，则出峰较早，影响分离度；若流速小于1.0ml/min，则需要较长的检测时间。
[0016]优选的，所述区分2,5二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的分析方法，包括以下步骤：
[0017](1)分别称取2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的标准品，用0.25％三氟乙酸水溶液：乙腈＝95：5的混合溶液溶解定容，配制成浓度为1.0mg/mL的标准溶液；
[0018](2)称取待测样品，用流动相溶解定容，配制成浓度为1.0mg/mL的待测样品溶液；
[0019](3)色谱条件：色谱柱采用C18色谱柱；流动相为:0.25％三氟乙酸水溶液:乙腈＝95:5，体积比；洗脱方式为等度洗脱；检测波长为280
±
2nm，柱温为30℃；
[0020](4)取5μL上述标准溶液或待测样品溶液，按照上述色谱条件，注入配有二极管阵列检测器的高效液相色谱仪进行测试：
[0021](5)用外标法分别计算2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的含量。
[0022]进一步优选的，所述外标法的计算公式如下：
[0023]含量＝Cr*Ax/Ar*Cx*100％
[0024]其中：
[0025]Cx为样品浓度；
[0026]Cr为对照浓度；
[0027]Ax为样品峰面积；
[0028]Ar为对照峰面积；
[0029]x分别为2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪。
[0030]优选的，所述色谱柱为月旭Ultimate LP
‑
C18 5μm，4.6*150mm。Ultimate LP
‑
C18 5μm，4.6*150mm色谱柱在低pH条件下，相比其它C18色谱柱，具有最佳稳定性和最长的使用寿命，适用于分离极性化合物，对极性化合物有极强的保留和良好的峰形。
[0031]本专利技术的有益效果为：
[0032]本专利技术利用高效液相色谱检测2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪，能够区分2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪并用外标法进行定量分析，实现了2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的高效检测，检测时间短，在10min内便可实现两者的分离，由图谱可知2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的分离度是2.61＞1.5，符合分离要求。本专利技术采用高效液相色谱方式进行测定的方法能简便而准确地测定2,5
‑
二甲基吡嗪的浓度，为生产、使用、销售及科研各领域内对不同纯度的2,5
‑
二甲基吡嗪测定提供了一种快速检测手段。
[0033]本专利技术采用单一的三氟乙酸水溶液和乙腈作为流动相，相较于添加了甲酸、甲醇的流动相而言，甲醇作为流动相，噪音大，且容易与样品中的酸类物质反应形成酯，而乙腈则没有这种顾虑，提高检测精度；本专利技术采用等度洗脱，相较于梯度洗脱，操作十分方便且简单有效；本专利技术采用的设备均为常规设备，操作简单，成本低，可大规模应用。
附图说明
[0034]构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种区分2,5二甲基吡嗪和2,6
‑
二甲基吡嗪的液相分析方法，其特征在于，所述方法利用高效液相色谱法进行，其中，色谱柱采用C18色谱柱；流动相为:0.25％三氟乙酸水溶液:乙腈＝95:5，体积比；洗脱方式为等度洗脱。2.根据权利要求1所述的液相分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱法为结合二极管阵列检测器的高效液相色谱法。3.根据权利要求2所述的液相分析方法，其特征在于，二极管阵列检测器检测波长:280
±
2nm。4.根据权利要求1所述的液相分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的柱温为25～35℃。5.根据权利要求4所述的液相分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的柱温为30℃。6.根据权利要求1所述的液相分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的进样量为4～6μL，进样流速为1.0ml/min。7.根据权利要求6所述的液相分析方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的进样量为5μL。8.根据权利要求1所述的液相分析方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)分别称取2,5
‑
二甲基吡嗪和2,6
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二甲基吡嗪的标准品，用0.25％三氟乙酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜瑞，古静燕，徐道林，张磊，孙越，朱振峰，
申请(专利权)人：济南悟通生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：