一种菜籽油总酚的提取方法及其含量检验方法技术

本发明专利技术公开了一种菜籽油总酚的提取方法及其含量检验方法，所述提取方法包括如下步骤：步骤一、称取菜籽油于玻璃试管中，加入甲醇，涡旋振荡混匀、超声、冷冻；步骤二、将玻璃试管中的上层液体转移至另一洁净试管，于金属浴弱氮气吹干，残渣复溶于甲醇

【技术实现步骤摘要】
一种菜籽油总酚的提取方法及其含量检验方法


[0001]本专利技术涉及一种植物油中多酚的提取方法及其含量检测方法，具体涉及一种菜籽油总酚的提取方法及其含量检验方法。

技术介绍

[0002]菜籽油总酚的提取方法有很多种，已经报道的主要是有机溶剂萃取法、超声波辅助浸提法、固相萃取法等。有机溶剂萃取法工艺简便、成本低、纯度高，但其提取率低、耗时长；超声辅助浸提法提取率高、提取物不易被破坏，但产品纯度不高；固相萃取法样品回收率高，精密度好，但固相萃取小柱一般价格昂贵。
[0003]研究发现，菜籽油总酚分为酚酸和单宁，酚酸又包括游离酚酸和结合酚酸。游离酚酸占总酚的6.5～9.0％，其中主要是芥子酸，占其总量的70～85％，另外还含有少量游离的p
‑
水杨酸、香草酸、龙胆酸、原儿茶酸、丁香酸、p
‑
香豆酸、阿魏酸(顺式及反式)、咖啡酸和绿原酸等。结合酚酸占总酚的80％，其中主要是芥子碱(也称为芥子酸胆碱酯)，在菜籽中的含量约为0.4～1.0％。结合酚酸经碱水解，会产生少量的p
‑
水杨酸、香草酸、原儿茶酸、丁香酸、p
‑
香豆酸、阿魏酸和咖啡酸。因此，冷榨菜籽油和浸出菜籽油中多酚主要为芥子酸、芥子碱和芥子酸葡萄糖苷及肉桂酸衍生物。热处理可使芥子酸和芥子碱水解脱羧转化为canolol(2，6
‑
二甲氧基
‑4‑
乙烯基苯酚)，故热榨菜籽油多酚主要为canolol和少量的芥子酸、芥子碱和芥子酸葡萄糖苷及肉桂酸衍生物。
[0004]目前，我国植物油总酚含量测定主要参考标准《LS/T 6119—2017》中的福林酚法(Folin
–
Ciocalteu)，该方法以没食子酸作为标准品，其检测原理为：在碱性条件下，福林酚试剂氧化多酚中酚羟基(
‑
OH基团)并显蓝色，蓝色的深浅程度与含酚基团的数目成正比关系。没食子酸分子结构存在三个
‑
OH基团，而菜籽油代表性多酚canolol分子结构中存在一个
‑
OH基团，官能团结构和数量不一致。
[0005]文献显示，大豆油、橄榄油、油茶籽油等植物油总酚测定的标准品多为没食子酸，而菜籽或菜籽油中总酚测定的标准物不尽相同，有芥子酸、咖啡酸、鞣酸、单宁酸等。其中，芥子酸做标准物最多，结果用芥子酸当量表示。但未见用canolol作为标准品的研究与应用。

技术实现思路

[0006]鉴于目前植物油总酚含量测定行业标准不太适用于菜籽油中总酚含量测定，本专利技术提供了一种菜籽油总酚的提取方法及其含量检验方法。
[0007]本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：
[0008]一种菜籽油总酚的提取方法，包括如下步骤：
[0009]步骤一、称取0.5～1.5g菜籽油于玻璃试管中，加入5～15mL甲醇，涡旋、混匀1～5min，超声10～30min，再放入冰箱冷冻，冷冻温度为
‑
90～
‑
8℃、时间为0.5～12h；
[0010]步骤二、将玻璃试管中的上层液体转移至另一洁净试管，于35～45℃金属浴弱氮
气吹干，残渣复溶于5～15mL、甲醇
‑
水溶液(甲醇的体积浓度30～100％)中，涡旋振荡0.5～1.5min混匀，得到菜籽油总酚提取液，于
‑
18℃保存备用。
[0011]一种菜籽油总酚含量检验方法，包括如下步骤：
[0012]步骤一、分别移取canolol标准品工作液、甲醇
‑
水溶液及菜籽油总酚提取液各0.25～1.25mL于10mL比色管中；
[0013]步骤二、先加入4～6mL水，再加入0.5～1.5mL福林酚试剂、1～3mL碳酸钠溶液，涡旋振荡0.5～1.5min混匀，加水定容至刻度；
[0014]步骤三、60～80℃水浴反应20～40min，取出，冷却至室温；
[0015]步骤四、在760～780nm波长条件下测定吸光度；
[0016]步骤五、根据canolol标准品工作液的吸光度与各canolol标准品工作液的canolol浓度，绘制标准曲线；
[0017]步骤六、根据步骤五绘制的标准曲线，以canolol作校正标准定量测定菜籽油中总酚含量，菜籽油中总酚含量的计算公式如下：
[0018][0019]式中，X为菜籽油中总酚的含量；C为由标准曲线查得canolol浓度；D为样品定容后的稀释倍数，如未进行稀释，则D＝1；V为提取液吹干后的复溶体积；m为菜籽油总酚提取液试样质量。
[0020]相比于现有技术，本专利技术具有如下优点：
[0021]1、本专利技术中菜籽油总酚的提取方法采用甲醇溶解，超声辅助提取，同时利用冷冻将菜籽油和提取液较好分离，将有机溶剂萃取法和超声波辅助浸提法结合起来，大大节约了提取时间，且提取的菜籽油总酚含量高。
[0022]2、本专利技术将植物油总酚含量测定行业标准中的标准品(没食子酸)替换成canolol后，更适用于菜籽油中总酚含量测定。
附图说明
[0023]图1为菜籽油中多酚混标液相色谱图，从左往右依次为：没食子酸、原儿茶酸、没食子酸甲酯、对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、香草醛、松柏醇、丁香醛、芥子酸、阿魏酸、松柏醛、水杨酸、鞣花酸、肉桂酸、canolol；
[0024]图2为不同样品检测液相色谱图举例；
[0025]图3为没食子酸标准曲线；
[0026]图4为Canolol标准曲线；
[0027]图5为反应液全波长扫描结果。
具体实施方式
[0028]下面结合附图对本专利技术的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。
[0029]本专利技术提供了一种菜籽油总酚含量检验方法，具体包括以下内容：
[0030]1、试剂和材料
[0031]甲醇(色谱级)、UP水、碳酸钠、福林酚(Folin
‑
Ciocalteu)试剂(2mol/L)、canolol标准品(CAS号：28343
‑
22
‑
8，分子式：C
10
H
12
O3，相对分子质量：180.2005，纯度：≥95％)。
[0032]2、仪器和设备
[0033]酶标仪、天平、涡旋振荡仪、氮吹仪、水浴锅、具塞试管、10mL比色管。
[0034]3、溶液的配置
[0035]50％甲醇
‑
水溶液：准确移取50mL甲醇至100mL容量瓶，加水定容至刻度。
[0036]7.5％碳酸钠溶液(质量浓度)：称取7.5g
±
0.01g碳酸钠，加适量水溶解，转移至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。
[0037]4、标准品溶液的配置：
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种菜籽油总酚的提取方法，其特征在于所述提取方法包括如下步骤：步骤一、称取菜籽油于玻璃试管中，加入甲醇，涡旋振荡混匀、超声、冷冻；步骤二、将玻璃试管中的上层液体转移至另一洁净试管，于金属浴弱氮气吹干，残渣复溶于甲醇
‑
水溶液中，涡旋振荡混匀，得到菜籽油总酚提取液。2.根据权利要求1所述的菜籽油总酚的提取方法，其特征在于所述步骤一中，涡旋振荡混匀时间为1～5min，超声时间为10～30min，冷冻温度为
‑
90～
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8℃、时间为0.5～12h。3.根据权利要求1所述的菜籽油总酚的提取方法，其特征在于所述步骤二中，金属浴温度为35～45℃，涡旋振荡混匀时间为0.5～1.5min。4.根据权利要求1所述的菜籽油总酚的提取方法，其特征在于所述菜籽油、甲醇、甲醇
‑
水溶液的用量比为0.5～1.5g：5～15mL：5～15mL，甲醇
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水溶液中甲醇的体积浓度为30～100％。5.一种权利要求1
‑
4任一项所述方法提取的菜籽油总酚含量检验方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：步骤一、分别移取canolol标准品工作液、甲醇
‑
水溶液及菜籽油总酚提取液于比色管中；步骤二、加入水、福林酚试剂、碳酸钠溶液，涡旋振荡混匀，加水定容至刻度；步骤三、水浴反应，取出，冷却...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚英政，梁强，熊伟，宣朴，赵玲，胡子惠，李颜，徐霞，
申请(专利权)人：四川省农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：