一种无致病力青枯菌的固态发酵物及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种无致病力青枯菌的固态发酵物及应用，属于微生物发酵技术领域。所述的固态发酵物营养成分包括无致病力青枯菌的有效活菌数150

【技术实现步骤摘要】
一种无致病力青枯菌的固态发酵物及应用


[0001]本专利技术属于微生物发酵
，具体涉及一种基于巨菌草资源化的无致病力青枯菌的固态发酵物及在茄果类蔬菜中的应用。

技术介绍

[0002]由青枯雷尔氏菌(Ralstoniasolanacearum，简称青枯菌)引起的作物青枯病是一种毁灭性土传病害，茄果蔬菜种植过程该病害发生尤为严重。常用防治策略包括化学农药、土壤改良、抗病品种、嫁接与轮作等，但效果均不稳定。目前为止，具有抗青枯病性能的作物品种很少，而且抗性不稳定；利用嫁接方法防治番茄青枯病虽获得成功，但因成本太高，技术难度大而导致推广和普及困难；轮作在一定程度上能够较好地防治青枯病，但受地理环境的影响，也难以大面积推广；化学农药防治虽有一定的防效，但随着化学农药使用量的日益增大，易产生抗药性、农药残留，小种分化型复杂，而且尚未有一种理想的农药可以防治青枯病，这些因素限制了他们在实际生产中的应用。生物防治具有无污染、有利于人畜安全、对生态环境友好、不易产生抗性等优点，使得人们将目光逐渐转向青枯病的生物防治。
[0003]利用无致病力青枯菌研发出植物疫苗来防治作物青枯病具有重要的生防应用潜力。在前期的研究开发中，已筛选到一株高防效和遗传稳定的无致病力青枯菌菌株FJAT
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aRS01(专利号ZL201510589990.1)，对番茄盆栽苗和田间小区的防效，分别达100％和85.71％。目前已利用该菌株生产出青枯病植物疫苗的中试产品，并在福建莆田、福建厦门、福建福鼎、浙江瑞安、海南陵水等地进行示范应用，防效均达75％以上。将青枯病植物疫苗应用到茄科蔬菜种苗健康繁育上，极大提升种苗的抗病能力。将植物疫苗添加到育苗基质和栽培基质等产品中，用于改良土壤，能够促进植株生长、降低土传病害的发病率。
[0004]目前市场上生防制剂多采用液体深层发酵技术，其对设备要求高，生产工艺复杂，而固体发酵采用的原料一般是廉价的农副产品，采用的设备也较液体发酵简单，生产成本大大低于液体发酵。目前常用固态发酵原料为麸皮、米糠、豆饼粉等，高温灭菌后粘度增加、疏松度不够、空隙小、后续接种困难等问题。在规模化生产中，为保障生产的可持续，选择来源广、营养丰富、价格低的发酵原料是降低生产成本的关键。巨菌草是一种多年生禾本科植物，分蘖能力、适应性强、是目前已知的禾本科中产量最高的植物，每亩平均年产量高达20
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30t，是一种可持续开发的资源。巨菌草糖分和粗蛋白含量高，富含赖氨酸、氨基酸、类黄酮、皂苷、芳香类物质、表面活性剂及各类有机盐，且具有来源广、数量大和价格低的特点，是一种优质的生防菌固态发酵原料。

技术实现思路

[0005]为此，需要提供一种新的农业副产物——巨菌草渣作为固态发酵的主要培养基，来生产生防制剂。
[0006]为实现上述目的，专利技术人提供了如下技术方案：
[0007]一种无致病力青枯菌的固态发酵物，所述的固态发酵物的营养成分包括：无致病
力青枯菌的有效活菌数150
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200亿个/g，有机质含量25
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29％，全氮含量为0.4
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0.7％，全磷含量为125
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140％，全钾含量为0.5
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0.7％，粗纤维含量为12
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14％，水分含量17
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18％，pH5.5
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6.0，以上含量均为质量百分数。
[0008]所述的固态发酵物的制备方法包括以下步骤：
[0009](1)种子液的制备：将无致病力青枯菌接种至营养肉汤(NutrientBroth，NB)发酵培养基中，28
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32℃、150
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200rpm振荡培养20
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28h，获得种子液；所述的无致病力青枯菌(Ralstoniasolanacearum)FJAT
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aRS01，于2015年4月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.10693(专利号ZL201510589990.1)；
[0010](2)固态发酵：在固态发酵培养基中，按15
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20％接种量加入种子液并拌匀，封口，28
‑
32℃发酵培养2
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3d，即可得到无致病力青枯菌的固态发酵物；所述的固态发酵培养基的制备方法为35
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38％巨菌草渣、25
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30％玉米粉、25
‑
30％米糠、8
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10％稻壳，加水搅拌均匀，料水质量比为1:(0.7
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1)，将混匀后物料装入聚丙烯灭菌袋，于120
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125℃灭菌15
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25min，获得无菌发酵料，冷却后备用。
[0011]优选的，所述的无致病力青枯菌的固态发酵方法，包括以下步骤：
[0012](1)种子液的制备：将无致病力青枯菌FJAT
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aRS01接种至营养肉汤发酵培养基中，30℃、170rpm振荡培养24h，获得种子液；
[0013](2)固态发酵：按质量比称取36.36％巨菌草渣、27.27％玉米粉、27.27％米糠、9.09％稻壳，加水搅拌均匀，料水质量比为1:0.8，将混匀后物料装入聚丙烯灭菌袋(150g/袋)，于121℃灭菌20min，获得无菌发酵料；无菌发酵料降温后，按质量比15％接种量加入种子液并拌匀，用无菌食用菌出菇套环封口，30℃发酵培养48h，即可获得无致病力青枯菌FJAT
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aRS01的固态发酵物。
[0014]进一步的，所述的无致病力青枯菌的固态发酵物在促进茄果类蔬菜种子萌发中的应用。
[0015]进一步的，所述的无致病力青枯菌的固态发酵物在茄果类蔬菜青枯病防治中的应用。
[0016]进一步的，所述的无致病力青枯菌的固态发酵物在促进茄果类植株生长中的应用。
[0017]进一步的，所述的无致病力青枯菌的固态发酵物在制备茄果类蔬菜抗病促长剂中的应用。
[0018]进一步的，所述的茄果类蔬菜包括番茄、辣椒或茄子。
[0019]进一步的，所述的无致病力青枯菌的固态发酵物在促进茄果类植株生长中的应用，其方法为在栽培基质中添加质量百分比≤15％的无致病力青枯菌的固态发酵物。对于番茄，添加量为5％时促长效果最好；对于辣椒和茄子，添加量为10％促长效果最好，均为质量百分比。
[0020]进一步的，所述的无致病力青枯菌的固态发酵物在促进茄果类蔬菜种子萌发中的应用，其方法为促进番茄种子萌发采用稀释50倍的无致病力青枯菌固态发酵物浸提液浸种处理；促进辣椒种子萌发采用稀释100倍的无致病力青枯菌固态发酵物浸提液浸种处理；促进茄子种子萌发采用稀释100倍的无致病力青枯菌固态发酵物浸提液浸种处理。
[0021]进一步的，所述的无致病力青枯菌的固本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种无致病力青枯菌的固态发酵物，其特征在于，所述的固态发酵物的营养成分包括：无致病力青枯菌的有效活菌数150
‑
200亿个/g，有机质含量为25
‑
29％，全氮含量为0.4
‑
0.7％，全磷含量为125
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140％，全钾含量为0.5
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0.7％，粗纤维含量为12
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14％，水分含量17
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18％，pH5.5
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6.0，以上含量均为质量百分数。2.根据权利要求1所述的无致病力青枯菌的固态发酵物，其特征在于，所述的固态发酵物的制备方法如下：种子液的制备：将无致病力青枯菌接种至营养肉汤发酵培养基中，28
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32℃、150
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200rpm振荡培养20
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28h，获得种子液；固态发酵：在固态发酵培养基中，按15
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20％接种量加入种子液并拌匀，封口，28
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32℃发酵培养2
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3d，即可得到无致病力青枯菌的固态发酵物；所述的固态发酵培养基的制备方法为35
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38％巨菌草渣、25
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30％玉米粉、25
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30％米糠、8
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10％稻壳，加水搅拌均匀，料水质量比为1:(0.7
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1)，将混...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑雪芳，王阶平，陈燕萍，陈峥，陈梅春，肖荣凤，阮传清，
申请(专利权)人：福建省农业科学院农业生物资源研究所，
类型：发明
国别省市：