用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基及金耳原种制作方法技术

本发明专利技术提供一种用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基，包括一级发酵液体培养基、二级发酵液体培养基和发酵罐液体培养基；一级发酵液体培养基的pH为6

【技术实现步骤摘要】
用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基及金耳原种制作方法


[0001]本专利技术涉及金耳菌种
，具体而言涉及一种用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基及金耳原种制作方法。

技术介绍

[0002]金耳(学名：Naematelia aurantialba(Bandoni&M.Zang)Millanes&Wedin)是耳包革科、耳包革属真菌。金耳菌种是由金耳菌丝和毛韧革菌丝两种组合构成，是二型菌丝结合体。金耳含有丰富脂肪，蛋白质和磷、硫、锰、铁、镁、钙、钾等微量元素，是一种营养滋补品，并可作为药用。
[0003]金耳菌种制作一般包括母种活化、原种制作、栽培种扩繁三个步骤，现有技术中大多沿用传统方式的固体制种进行原种的制作，一般过程为：采用木屑、麦麸、玉米面、稻壳、棉籽壳、白糖等以不同比例混合装袋并灭菌，再接入母种，并在18
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25℃的温度下培养，使菌丝长满培养瓶，吃透培养基，菌丝扭结形成白色肉质原基，原基直径达4
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5cm后用作原种。
[0004]但是因为固体菌种利用木屑等原料，菌丝吃透培养基并长满菌种袋需要一定时间，菌丝较慢的生长速度使原种制作周期可长达45
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50天，从而导致金耳菌种制作周期长。

技术实现思路

[0005]本专利技术目的在于针对现有技术的不足，提供一种用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基及金耳原种制作方法，通过对传统金耳原种制作步骤进行改变，将金耳原种从使用固体种转变为使用液体发酵种，极大程度的降低了金耳原种制作成本，缩短了金耳原种制作周期，进而缩短了金耳栽培种制作周期。
[0006]本专利技术第一方面涉及一种用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基，包括一级发酵液体培养基、二级发酵液体培养基和发酵罐液体培养基；
[0007]所述一级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉5
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10g，豆粨粉0
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5g，葡萄糖10
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15g，蛋白胨1
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3g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，维生素B110mg；
[0008]所述二级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉5
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10g，豆粨粉0
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5g，葡萄糖10
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15g，蛋白胨1
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3g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g；
[0009]所述发酵罐液体培养基是在所述一级发酵液体培养基中加入重量百分比为1.5％
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2.0％的木屑粉。
[0010]在可选的实施方式中，所述一级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉10g，葡萄糖15g，蛋白胨3g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，维生素B110mg。
[0011]在可选的实施方式中，所述一级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉5g，葡萄糖10g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，维生素
B110mg。
[0012]在可选的实施方式中，所述一级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉10g，豆粨粉5g，葡萄糖15g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，维生素B110mg。
[0013]本专利技术第二方面涉及一种高海拔地区金耳原种制作的方法，包括以下步骤：
[0014]S1、将金耳固体母种接种至一级发酵液体培养基中，并在恒温摇床中以预设的温度和转速进行震荡培养，得到金耳一级液体菌种；
[0015]S2、将步骤S1得到的金耳一级液体菌种接种至二级发酵液体培养基中，并在恒温摇床中以预设的温度和转速进行震荡培养，得到金耳二级液体菌种；
[0016]S3、将步骤S2得到的金耳二级液体菌种接种至发酵罐液体培养基中，持续通入过滤的无菌空气，并在预设的温度下进行培养，得到金耳原种。
[0017]在可选的实施方式中，所述步骤S1中，每100mL的一级发酵液体培养基接种金耳固体母种3.0
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5.0cm2。
[0018]在可选的实施方式中，所述步骤S1中，培养条件如下：
[0019]温度22
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26℃，转速140
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200r/min，培养时间84
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96h。
[0020]在可选的实施方式中，所述步骤S2中，金耳一级液体菌种的接种量为二级发酵液体培养基总体积的5％
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15％。
[0021]在可选的实施方式中，所述步骤S2中，培养条件如下：
[0022]温度22
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26℃，转速200
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240r/min，培养时间84
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96h(可以给个范围)。
[0023]在可选的实施方式中，所述步骤S3中，金耳二级液体菌种的接种量为发酵罐液体培养基总体积的5％
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10％；
[0024]培养条件如下：
[0025]通气量为3
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5L/min，发酵罐内的温度为22
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26℃，培养时间96
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120h。
[0026]通过上述方案的实施，本专利技术提出的用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基，给金耳菌种中的菌丝生长提供一个最佳的营养、酸碱度、温度、供氧量，使菌丝快速生长，迅速扩繁，在短时间达到一定菌球数量，完成一个发酵周期。
[0027]本专利技术的金耳原种制作方法，通过三次生物发酵，第一次发酵高温低速富营养，促进休眠菌丝活化，加速萌发；接着进行第二次发酵，低温高速，促进菌丝迅速扩繁，形成菌丝球；最后通过发酵罐扩大培养，已达到最佳菌丝活力、生物量；如此，扩繁17
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20天即可制得金耳原种，且每毫升菌丝干重可达7.16
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9.23mg/mL，菌丝球直径均在2mm以下，极大的缩短了金耳原种制作周期，进而缩短了金耳栽培种制作周期。
附图说明
[0028]图1是本专利技术的高海拔地区金耳原种制作的方法的流程图。
[0029]图2是本专利技术的实施例1中一级发酵培养过程实物图。
[0030]图3是本专利技术的实施例1中二级发酵培养过程实物图。
[0031]图4是本专利技术实施例1得到的金耳原种菌丝球实物图。
具体实施方式
[0032]为了更了解本专利技术的
技术实现思路
，特举具体实施例并配合所附图式说明如下。
[0033]在本公开中参照附图来描述本专利技术的各方面，附图中示出了许多说明的实施例。本公开的实施例不必定意在包括本专利技术的所有方面。应当理解，上面介绍的多种构思和实施例，以及下面更加详细地描述的那些构思和实施方式可以以很多方式中任意一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基，其特征在于，包括一级发酵液体培养基、二级发酵液体培养基和发酵罐液体培养基；所述一级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉5
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10g，豆粨粉0
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5g，葡萄糖10
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15g，蛋白胨1
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3g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，维生素B110mg；所述二级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉5
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10g，豆粨粉0
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5g，葡萄糖10
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15g，蛋白胨1
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3g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g；所述发酵罐液体培养基是在所述一级发酵液体培养基中加入重量百分比为1.5％
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2.0％的木屑粉。2.根据权利要求1所述的用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基，其特征在于，所述一级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉10g，葡萄糖15g，蛋白胨3g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，维生素B110mg。3.根据权利要求1所述的用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基，其特征在于，所述一级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉5g，葡萄糖10g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，维生素B110mg。4.根据权利要求1所述的用于高海拔地区金耳原种制作的液体培养基，其特征在于，所述一级发酵液体培养基的pH为6
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7，组分包括：按比例每升培养基含可溶性淀粉10g，豆粨粉5g，葡萄糖15g，蛋白胨1g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁0.5g，维生素...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩宏，祁正华，冶晓燕，李正平，蒲鑫，乔冠军，王零春，司才宇，曾有韬，聂斌，张林森，陈福堂，党仁美，
申请(专利权)人：临夏回族自治州农业科学院，
类型：发明
国别省市：