一种魁蚶来源的具有抗氧化和抗衰老活性的多肽及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种具有抗氧化和抗衰老活性的多肽及其应用。该多肽的氨基酸序列为VCIGTNGQL。该多肽具有优异的清除DPPH和ABTS自由基的能力，具有亚铁离子螯合活性，具有氧自由基吸收能力，具有抑制脂质氧化能力，具有延长秀丽隐杆线虫寿命和增加线虫体内抗氧化酶CAT、GSH

【技术实现步骤摘要】
一种魁蚶来源的具有抗氧化和抗衰老活性的多肽及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种具有抗氧化和抗衰老活性的多肽及其应用。

技术介绍

[0002]在生物体的正常有氧代谢过程中，会产生自由基和活性氧(ROS)。研究表明，过量的活性氧会攻击人体的功能物质，如核酸、蛋白质、脂质等，对细胞造成无法弥补的损害从而产生各种生理疾病，例如癌症、心脏病、糖尿病等。此外，食物中的自由基和ROS可能会导致食品变质和产生有毒化合物，从而通过质地和风味变化直接影响食品质量。抗氧化剂可以保护人体免受自由基和ROS的影响。此外，抑制自由基产生和氧化反应对于防止和减缓食品成分的自氧化至关重要。但是，通常人工合成的化学抗氧化物质对身体健康有潜在的危害，因此开发天然抗氧化物质具有更高的安全性。
[0003]多肽是一种较短的氨基酸链，具有分子质量小、易吸收、疗效显著、针对性强等优点，本专利技术发现和合成开发一种高纯度的肽类，具有优异的抗氧化及抗衰老效果。

技术实现思路

[0004]技术问题
[0005]本专利技术的目的是提供一种具有抗氧化和抗衰老活性的多肽及其应用。
[0006]技术方案
[0007]本专利技术提供的一种具有抗氧化和抗衰老活性的魁蚶(Arca inflata Reeve)多肽GF8
‑
1，其氨基酸序列为VCIGTNGQL。
[0008]本专利技术公开了魁蚶(Arca inflata Reeve)多肽GF8
‑
1的制备方法，具体如下：
[0009]步骤1)内脏粗蛋白提取
[0010]将新鲜魁蚶(Arca inflata Reeve)剥壳、取出内脏清洗、沥干水分、称重，将称重好的内脏按3：1体积质量比加入预冷好的磷酸盐缓冲液(pH 8.0，0.03M)匀浆提取，离心，弃残渣，收集上清。将上清液置于磁力搅拌器中，冰水浴条件下，根据0℃条件下的硫酸铵饱和度表按0～100％缓慢均匀加入对应质量的硫酸铵进行盐析提取。盐析结束后，离心，收集沉淀。将沉淀复溶，透析去除硫酸铵，冷冻干燥后得到内脏粗蛋白。
[0011]步骤2)魁蚶内脏蛋白的酶解
[0012]对内脏粗蛋白酶解，得酶解产物AVPH。
[0013]具体地，酶解采用α
‑
糜蛋白酶，酶解条件为pH 8.42，水解时间176min，水解温度为45.3℃，E/S为7.67％。
[0014]步骤3)酶解产物AVPH逐级分离
[0015]采用分子截留量(MWCO)为30kDa、10kDa和3kDa的超滤离心管对AVPH溶液进行逐级分离，得到AVPH
‑Ⅰ
(MW<3kDa)级分，冻干。再使用分子排阻凝胶Sephadex G
‑
15层析柱对AVPH
‑Ⅰ
(MW<3kDa)级分进行分离，用蒸馏水进行洗脱，收集洗脱峰，冻干，得到GF8样品。
[0016]步骤4)GF8样品纯化
[0017]采用RP
‑
HPLC对GF8样品进行纯化，收集洗脱峰，得到GF8
‑
1样品。
[0018]具体地，GF8的洗脱条件为：有机相(乙腈)比例在0～40min内从0％增加到40％，再以100％乙腈洗脱5min，流速为1mL/min，检测280nm波长处的吸光度值。
[0019]步骤5)GF8
‑
1多肽鉴定
[0020]采用液相质谱和串联质谱检测(LC
‑
MS/MS)鉴定GF8
‑
1的多肽序列，其氨基酸序列为VCIGTNGQL。
[0021]具体地，本专利技术所述魁蚶(Arca inflata Reeve)多肽GF8
‑
1在制备抗氧化和抗衰老产品中的应用。
[0022]进一步的，所述的制备抗氧化和抗衰老产品的使用形式可以是口服式、皮肤导入式和皮肤涂抹式。
[0023]具体地，本专利技术所述魁蚶(Arca inflata Reeve)多肽GF8
‑
1在制备食品中抗氧化剂的应用。
[0024]优选地，本专利技术所述的抗氧化剂能够耐受pH范围1
‑
11以及100℃加热240分钟。
[0025]具体地，本专利技术所述的多肽GF8
‑
1在制备食品中螯合剂的抑制食物中的脂质氧化应用。
[0026]具体地，本专利技术所述魁蚶(Arca inflata Reeve)多肽GF8
‑
1在制备化妆品中抗氧化剂和抗衰老剂的应用。
[0027]有益效果
[0028]本专利技术公开了一种小分子多肽GF8
‑
1，其具有优异的清除DPPH和ABTS自由基的能力，具有抑制脂质氧化以及延长秀丽隐杆线虫寿命的功能，可应用于化妆品、医美、保健、食品等领域，具有极大的应用价值。本专利技术公开了一种分离纯化GF8
‑
1的方法，获得了具有较强抗氧化活性的肽段。
[0029]本专利技术公开的GF8
‑
1对Fe
2+
表现出较强的螯合活性和较高的氧自由基吸收能力。
[0030]本专利技术公开的GF8
‑
1也可作为抗氧化剂用于食品领域。此外，GF8
‑
1在较宽的pH范围(1
‑
11)和加热240分钟(100℃)中，其抗氧化活性保持不变或增加。
[0031]本专利技术公开的GF8
‑
1是MW<3kDa的肽段，可以作为稳定的抗氧化剂运用在药品、食品、化妆品中，同时，相比于其他较长的肽段，短肽段具有生产成本低，质量控制简单的生产优势。
附图说明
[0032]图1：AVPH
‑Ⅰ
的凝胶洗脱图谱
[0033]图2：GF3液相洗脱图谱
[0034]图3：GF5液相洗脱图谱
[0035]图4：GF8液相洗脱图谱
具体实施方式：
[0036]以下结合具体实施例对本专利技术的技术方案做进一步说明，应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不是对本专利技术的限制。
[0037]下述各实施例中所述的实验方法和检测方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可在市场上购买得到。
[0038]实施例1魁蚶(Arca inflata Reeve)多肽GF8
‑
1的制备方法
[0039]1.1魁蚶内脏蛋白的提取：
[0040]用预冷的蒸馏水清洗魁蚶(山东省青岛市城阳海产品市场)内脏，在冷柜中放置30min沥干水分，然后称重。将称重好的内脏按3：1体积质量比加入预冷好的PBS缓冲液(pH 8.0，0.03M)，然后用高速组织捣碎机于10000rpm转速下充分匀浆3min(为保证低温，匀浆不要连续进行)。将内脏匀浆液冰浴超声40min，并不断用玻棒进行搅拌使其充分提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有抗氧化和抗衰老活性的多肽GF8
‑
1，其氨基酸序列为VCIGTNGQL。。2.如权利要求1所述的多肽GF8
‑
1在制备抗氧化和抗衰老产品中的应用。3.根据权利要求2所述的多肽GF8
‑
1，其特征在于，多肽GF8
‑
1制备抗氧化和抗衰老产品中的使用形式为口服式、皮肤导入式和皮肤涂抹式。4.根据权利要求3所述的多肽GF8
‑
1，其特征在于，多肽GF8
‑
1在制备化妆品中抗氧化剂和抗衰老剂的应用。5.根据权利要求4所述的多肽GF8
‑
1，其特征在于，多肽GF8
‑
1在制备食品中抗氧化剂的应用。6.根据权利要求5所述的多肽GF8
‑
1，其特征在于，所述的抗氧化剂能够耐受pH范围1
‑
11以及100 ℃加热240分钟。7.根据权利要求5所述的多肽GF8
‑
1，其特征在于，所述的多肽GF8
‑
1在制备食品中螯合剂的抑制食物中脂质氧化的应用。8.一种具有抗氧化和抗衰老活性的多肽GF8
‑
1制备方法具体如下：步骤1）内脏粗蛋白提取将新鲜魁蚶（Arca inflata Reeve）剥壳、取出内脏清洗、沥干水分、称重，将称重好的内脏按3：1体积质量比加入预冷好的磷酸盐缓冲液（pH 8.0，0.03 M）匀浆提取，离心，弃残渣，收集上清。将上清液置于磁力搅拌器中，冰水浴条件下，根据0 ℃条件下的硫酸铵饱和度表按0 ~ 100%缓...

【专利技术属性】
技术研发人员：于荣敏，石慧，朱建华，
申请(专利权)人：于荣敏，
类型：发明
国别省市：